Cours 3: ADN: Structure, Réplication Et Réparation Flashcards

1
Q

Que signifie ADN

A

Acide désoxyribonucléique

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2
Q

De manière générale, qu’est-ce que l’ADN

A

Polymère de désoxynucléotides bicaténaire (double brin) avec une structure de double hélice

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3
Q

Unité de base des acides nucléiques (ARN et ADN)

A

Nucléotides

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4
Q

Que contient chaque nucléotide

A

Base azotée
Sucre à 5 carbone (pentose)
1 ou plusieurs groupements phosphate

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5
Q

Comment sont numérotés les carbones du pentose des nucleotides

A

Voir image dans résumé: à partir du O dans le cycle, commmence à 1 à droite et va dans le sens horaire (5 étant le carbone à l’extérieur du cycle)

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6
Q

Différence entre nucléoside et nucléotide

A

Nucléoside=base+sucre
Nucléotide=base+sucre+phosphate

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7
Q

Donne la base et le nucléoside associé à l’abréviation A

A

Adénine
Adénosine

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8
Q

Donne la base et le nucléoside associé à l’abréviation G

A

Guanine
Guanosine

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9
Q

Donne la base et le nucléoside associé à l’abréviation C

A

Cytosine
Cytidine

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10
Q

Donne la base et le nucléoside associé à l’abréviation U

A

Uracil
Uridine

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11
Q

Donne la base et le nucléoside associé à l’abréviation T

A

Thymine
Thymidine

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12
Q

Que signifie ATP

A

Adenosine triphosphate

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13
Q

Que signifie ADP

A

Adenosine diphosphate

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14
Q

Pyrimidine vs purine

A

Pyrimidine: 1 cycle à 6 atomes qui correspond aux bases azotées T, U et C

Purine: 1 cycle à 5 atomes collés à un cycle à 6 atomes qui correspond aux bases azotées À et G

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15
Q

Bases retrouvées dans ADN

A

A T G C

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16
Q

Bases retrouvées dans ARN

A

A U G C

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17
Q

Quel est le sucre présent dans l’ARN et sa particularité

A

Bêta-D-ribose
Le carbone 2’ possède un OH

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18
Q

Quel est le sucre présent dans l’ADN et sa particularité

A

Bêta-D-2-deoxyribose
Le carbone 2’ n’a pas de OH seulement un H

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19
Q

Parmi l’ARN et l’ADN, lequel est le plus instable et pourquoi

A

ARN puisque le C-OH est très réactif et que l’ARN se dégrade donc plus facilement

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20
Q

Vrai ou faux, l’ADN est chargé positivement

A

Faux, elle est chargée négativement

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21
Q

Qu’est-ce qui confère sa charge négative aux nucléotides? À l’ADN?

A

Les groupements phosphates rendent le nucléotide négatif
L’ADN est négative à cause des phosphates impliquées dans les liens phosphodiester

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22
Q

Dans les formes les plus communes de nucléotides, combien y a t’il de phosphates et quelle est la nomenclature associée

A

1,2 ou 3
Mono-, di- ou triphosphate

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23
Q

Qu’est-ce qui lie les nucléotides ensemble dans ADN/ARN

A

Liens phosphodiester

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24
Q

Où se trouvent les liens phosphodiester

A

Entre les carbones 5’ et 3’ des sucres

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25
Quelle est la structure de l’ADN
Double hélice
26
Polarité des brins d’ADN
5’ -> 3’
27
Caractéristiques des brins d’ADN
Antiparallèles et complémentaires
28
Quel est l’appariement des bases de l’ADN
A-T et G-C
29
Quel est l’appariement des bases dans l’ARN
A-U et G-C
30
De quoi est composé le squelette de l’ADN
Sucres et phosphates
31
Différence entre l’appariement des bases A-T et des bases G-C
A-T a 2 ponts H G-C a 3 ponts H
32
Quelle paire de base de l’ADN est plus forte
G-C puisqu’elle possède 3 ponts H (vs 2 pour A-T)
33
Pourquoi dit-on que l’ADN est hétérogène
Parce que certaines zones sont plus stables que d’autres puisqu’elles contiennent plus de bases G-C
34
Décrit la double hélice d’ADN
Bases à l’intérieur et sucres+phosphates à l’extérieur Présence de sillons mineurs et majeurs
35
Combien y a t’il de bases dans le génome haploïde humain Comment cela se compare à la taille d’un noyau
3 x 10^9 paires de bases => 1-3 mètres Noyau = 10 um (micromètre)
36
Quelle est la charge des protéines qui se lient à l’ADN? Sont elles basiques ou acides?
Positive (puisque l’ADN est négatif) et basiques
37
1 tour d’hélice est équivalent à ? Paires de nucleotides
10
38
Comment peut-on dénaturer de l’ADN
Par changement de pH ou avec de la chaleur puisque cela permet de rompre les ponts H qui unissent les 2 brins d’ADN
39
CONCEPT À RETENIR Quelles sont les bases qui composent l’ADN et les bases qui composent l’ARN?
ADN: ATGC ARN: AUGC
40
CONCEPT À RETENIR Quels sont les appariements de bases dans l’ADN et dans l’ARN?
ADN: A-T et G-C ARN: A-U et G-C
41
CONCEPT À RETENIR Quels sont les sucres dans l’ADN et dans l’ARN?
ADN: bêta-D-2-deoxyribose ARN: bêta-D-ribose
42
CONCEPT À RETENIR Qu’est-ce qu’un lien phosphodiester?
Lien qui unissent les nucleotides dans les acides nucléiques Entre les carbones 5’ et 3’ des sucres des nucleotides O—P—O
43
CONCEPT À RETENIR Qu’est-ce que la polarité des brins de l’ADN
5’ —> 3’ C’est le sens de la synthèse de l’ADN donc on ajoute des nucleotides à l’extrémité 3’
44
CONCEPT À RETENIR Comment les brins d’ADN sont orientés dans la double hélice
antiparallèles et complémentaires
45
CONCEPT À RETENIR Combien de paires de bases par tour d’hélice
10
46
Caractéristique primordiale de la réplication d’ADN
Réplication semi-conservative donc ADN est doublée
47
La réplication de l’ADN se passe pendant…
Interphase (phase S)
48
Chaque ADN fille est composé de 2 brins: un ? Et un ?
Brin vieux Brin nouveau
49
Éléments des chromosomes importants à la réplication (3)
Origines de réplications multiples Centromere qui s’attache au fuseau mitotique Télomères requis pour préserver intégrité des extrémités des chromosomes
50
Ou débute la réplication
Aux origines de réplication
51
La synthèse d’ADN est unidirectionnel, vrai ou faux
Faux, elle est bidirectionnelle
52
A chaque origine de réplication, ??? Sont formées
2 fourches de réplication
53
Que font les fourches de réplication durant la réplication de l’ADN
Elles s’éloignent dans des directions opposées à partir de multiples origines de réplication
54
ADN est ouvert par…
Protéines d’initiation
55
Qu’est-ce qui sert de matrice dans la réplication de l’ADN
ADN simple brin
56
Entre les 2 fourches de réplication, ??? Se forme
Une bulle de réplication
57
Qu’est-ce qu’une origine de réplication
Région riche en appariement A-T (- stable, 2 ponts H)
58
Vrai ou faux, chaque chromosome ne contient qu’une seule origine de réplication
Faux, chaque chromosome en contient plusieurs Près de 10000 origines sur 46 chromosomes
59
Quelles sont les étapes du début de la réplication de l’ADN (4)
1- origine reconnue par des protéines d’initiation qui ouvrent l’hélice en séparant les brins 2- liaison de l’hélicase (brise les ponts H et dézipe ADN) 3- liaison de la primase (fait de petites amorces en ARN) 4- formation du complexe primase-helicase
60
Le processus de réplication est effectué par…
ADN polymerase
61
Quelles sont les contraintes de l’ADN polymerase
Synthétise uniquement de 5’ vers 3’ Requiert une amorce d’ADN ou d’ARN Requiert une matrice (brin à copier, région simple brin)
62
Pourquoi est-ce que l’ADN polymerase requiert une amorce
Parce qu’elle ne peut pas initier la réplication, elle doit ajouter un nouveau nucléotide sur un brin 3’ déjà existant
63
Comment se fait la synthèse de l’ADN
Par complémentarité
64
D’où vient l’énergie pour la polymérisation
Nucleotides triphosphates Énergie libérée par coupure des 2 phosphates (2 des 3 phosphates d’un nucléotide)
65
ADN polymerase couple quoi?
La libération d’énergie à la réaction de polymérisation
66
Chaque fourche fait la synthèse de combien de brins d’ADN
2 brins
67
Dans quel sens sont synthétisés les brins de chaque fourche
Les 2 en sens 5’ —> 3’ mais ils seront inverse l’un de l’autre
68
Les brins nouvellement synthétisés à la fourche ont une polarité ?
Inverse
69
Décrit la synthèse du brin conducteur
Synthèse d’ADN continue à partir d’une seule amorce
70
Décrit la synthèse d’un brin retardé/tardif
Synthèse discontinue sous forme de courts fragments qui seront ensuite réunis bout à bout
71
Fragments courts formés lors de la synthèse du brin retardé
Fragments d’Okazaki
72
Comment reconnaît-on le brin tardif du brin conducteur
Le brin tardif est celui qui synthétise en sens inverse de la progression de la fourche
73
Que retrouve-t-on entre 2 fragments d’Okazaki
Nick: brèche ou coupure simple brin, manque un lien phosphodiester
74
Qu’est-ce qui va seller la brèche/le Nick et de quelle manière
Enzyme ADN ligase En créant un lien phosphodiester
75
Étapes de l’extension et du remplacement de l’amorce d’ARN sur un brin tardif
1- extension de la nouvelle amorce d’ARN (ADN polymerase III ajoute à la nouvelle amorce pour créer un nouveau fragment d’Okazaki) 2- finalisation de l’extension de l’amorce d’ARN (par ADN polymerase III) 3- remplacement de l’amorce d’ARN par de l’ADN (par ADN polymerase I) 4- ligation du nouveau fragment d’Okazaki à la chaîne en croissance (par ADN ligase)
76
Décrit les fragments d’Okazaki chez les eukaryotes vs chez les E.coli
Eukaryotes: primase ajoute amorce d’ARN de 10 nucleotides à tous les 200/300 nucleotides E.coli: amorce de 5 nucleotides et fragments d’Okazaki de 1000 nucleotides
77
Que fait l’activité ribonuclease
Élimine l’amorce en ARN
78
Que fait ADN polymerase de réparation?
Complete l’ADN entre les fragments d’Okazaki
79
Quelles sont les protéines principales impliquées dans la réplication de l’ADN (7)
Primase ADN polymerase III ADN polymerase I ADN ligase Sliding clamp SSB (single stranded binding) protéine Helicase
80
Description et Rôle de la primase
ARN polymerase qui ne requiert pas d’amorce pour polymériser des ribonucleotides Synthétise amorces ARN à partir d’une matrice d’ADN
81
Rôle de l’ADN polymerase III selon brin conducteur ou brin tardif
Brin tardif: utilise les amorces d’ARN sur brin retardé pour synthétiser les fragments d’Okazaki Brin conducteur: 1 seule amorce d’ARN requise pour synthétiser le brin conducteur
82
ADN polymerase I est…
Enzyme avec 2 activités requises: 1- activité de nucléase (enlève amorce de ARN) 2- activité d’ADN polymerase dite de réparation
83
Que fait ADN ligase
Enzyme qui lie les 2 bouts d’ADN en créant un lien phosphodiester en utilisant ATP
84
Qu’est-ce qu’une sliding clamp
Clamp coulissant (protéine circulaire) qui maintient ADN polymerase et ADN pendant la synthèse d’ADN
85
Qu’est-ce que que la protéine SSB et à quoi sert elle?
Single stranded binded protein Protéine fixant l’ADN simple brin Rôle = empêcher ce brin de s’apparier avec brin complémentaire
86
Qu’est-ce que fait l’helicase
Sépare les brins Protéine de liaison a l’ADN simple brin qui maintient les brins séparés
87
Qu’est-ce que les telomeres
Bout des chromosomes Servent à préserver l’intégrité des chromosomes (les empêche de se raccourcir)
88
Quel est le risque majeur lors de la réplication de l’ADN
Perte d’information chromosomique importante si on perd un bout d’ADN a chaque nouvelle réplication des chromosomes
89
Quel est le problème avec la synthèse discontinue du brin tardif
Après la dégradation de l’amorce en ARN, il reste un bout de matrice non-réplique des brins tardifs aux extrémités des chromosomes (telomere) Puisque ADN polymerase peut pas commencer la synthèse d’ADN dans le vide (besoin d’une terminaison 3’—OH d’une amorce) et que la primase à besoin d’une matrice pour synthétiser une amorce
90
Solution au problème de la synthèse discontinue d’ADN
Enzyme telomerase: ajoute une séquence répétée d’ADN à l’extrémité 3’—OH du brin matrice du brin tardif ce qui permet d’allonger les extrémités des chromosomes et assurer intégrité lors de la réplication
91
Quelles sont les 2 parties de l’enzyme telomerase
Partie protéique et partie ARN
92
A quoi sert la partie protéique de la telomerase
Activité d’ADN polymerase capable d’utiliser son ARN comme matrice (activité de “reverse transcriptase”
93
A quoi sert la partie ARN de la telomerase
Matrice ARN
94
Étapes de la réplication des telomeres
1- extension du brin complémentaire au brin retardé, telomerase agit comme polymerase en utilisant son ARN comme matrice 2- telomerase se ré-apparie avec l’extrémité de séquence ajoutée plusieurs fois DONC ajout de plusieurs séquences répétées en tandem 3- brin tardif complète par ADN polymerase alpha qui porte une activité primase
95
La telomerase est active seulement dans…
Les gamètes et cellules souches (cellules non-différenciées et cellules embryonnaires)
96
En partie, à quoi est dû le vieillissement
Perte de l’activité telomerase dans les cellules somatiques DONC la réplication d’ADN raccourci progressivement les telomeres
97
Décrit le graphique du vieillissement des cellules selon la longueur des telomeres (voir résumé)
Cellules souches: longueur reste la même Cellules somatiques: longueur diminue progressivement Premature aging cells: longueur diminue bcp plus rapidement que dans les cellules somatiques
98
Décrit le graphique de la longueur des telomeres selon le temps pour des cellules relatives au cancer (voir résumé)
Tissu normal: diminution légère de la longueur des telomeres Tumeur précoce: perte de telomere importante Tumeur tardive (métastases): réactivation de la telomerase => longueur des telomeres augmente graduellement
99
Combien de nucleotides sont répétés en moyenne dans un telomere
10000
100
A chaque réplication, il y a une perte moyenne de combien de nucleotides
200-300
101
Comment peut-on inhiber la réplication de l’ADN dans les traitements de cancers
En donnant un analogue de Thymidine (tel l’AZT) ce qui empêche ADN polymerase de synthétiser de l’ADN
102
Inconvénient de l’inhibition de la réplication dans traitement des cancers
Cible toute les cellules du corps et pas seulement les cellules cancéreuses ce qui apporte des effets secondaires
103
CONCEPT À RETENIR dans quelle direction la réplication est effectuée
5’ —> 3’
104
CONCEPT À RETENIR quelles sont les caractéristiques d’une origine de réplication
Région riche en appariement A-T Plusieurs origines/chromosome
105
CONCEPT À RETENIR Qu’est-ce que le brin avancé et le brin tardif
Brin avancé: brin qui synthétise de manière continue dans le même sens que la fourche de réplication Brin tardif: brin qui synthétise de manière discontinue dans le sens inverse de la fourche de réplication
106
CONCEPT À RETENIR quelles sont les enzymes impliqués dans la réplication
Primase ADN polymerase III ADN polymerase I ADN ligase Sliding clamp SSB protein Helicase
107
CONCEPT À RETENIR Quelles sont les caractéristiques des ADN polymerases
synthétise de l'ADN synthétise de 5' vers 3' requiert une amorce requiert une matrice
108
CONCEPT À RETENIR Quelles sont les caractéristiques des ARN polymérases
synthétise des amorces d'ARN ne requiert aucune amorce requiert une matrice d'ADN
109
CONCEPT À RETENIR Qu'est-ce qu'un fragment d'Okazaki et comment est-il généré?
fragments discontinus d'ADN créés lors de la synthèse du brin tardif qui sont ensuite réunis bout à bout ils sont séparés par un "nick" et possedent chacun leur amorce d'ARN
110
CONCEPT À RETENIR Comment les télomères sont répliqués?
1- extension du brin complémentaire au brin retardé, la télomérase agit comme polymérase en utilisant sa propre ARN comme matrice 2- télomérase se ré-apparie avec l'extrémité de la séquence ajoutée plusieurs fois DONC ajout de plusieurs séquences répétées en tandem 3- brin tardif complété par ADN polymérase alpha qui porte une activité primase
111
CONCEPT À RETENIR Quels sont les rôles des télomères dans le cancer et le vieillissement?
puisque la télomérase ne se trouve pas dans les cellules somatiques, les télomères de nos cellules raccourcissent avec chaque réplication ce qui cause le vieillissement au niveau du cancer, les tumeurs précoces présentent des télomères qui raccourcissent beaucoup plus rapidement que la normale alors que les métastases permettent la réactivation de la télomérase et donc l'élongation des chromosomes
112
qu'est-ce qui peut amener à une mutation?
erreurs d'incorporation de nucléotides surviennent dans la réplication ADN des cellules subit des lésions provoquées par le métabolisme, les radiations, les composés chimiques dans l'environnement
113
que ce passe-t-il s'il n'y a pas de réparation de la mutation
une des molécules d'ADN sera mutée de facon permanente au cycle de réplication suivant et la mutation sera transmise
114
que ce passe-t-il avec les mutations des cellules germinales
elles sont héritées par la descendance
115
un changement dans la séquence d'ADN peut causer...
des maladies héréditaires/génétiques
116
décrit l'anémie falciforme
GAG code pour Glu alors que GTG code pour Val maladie génétique (mutation des cellules germinales)
117
décrit la fibrose kystique
maladie autosomale récessive mutation + fréquente (80%): délétion de 3 nucléotides codant pour la phénylalamine 508 du canal chlore CFTR mutation des cellules germinales
118
que se passe-t-il avec les mutations dans les cellules somatiques
peuvent etre a la base du cancer (4-5 mutations)
119
pourquoi est-ce que l'incidence des cancers du colon augmente avec l'âge
parce qu'il y a une accumulation de mutations somatiques
120
comment les mutations sont reconnus
systeme de réparations doivent distinguer entre bases originales et mutées généralement, les nucléotides erronés/endommagés créent une torsion ou une déformation de la double hélice qui permet de reconnaitre le mésappariement donc, on utilise le brin indemne comme matrice
121
synonyme de proofreading
correction co-réplicationnelle, correction sur épreuve
122
en général, qu'est-ce que le proofreading
ADN polymérase qui vérifie et corrige son travail pendant la synthèse
123
étapes du proofreading
1- vérification par ADN polymérase lors de l'appariement des bases 2- reconnaissance des mauvais appariements par déformation de l'hélice (ponts H différents) 3- action exonucléase de la polymérase: détache le mauvais nucléotide par hydrolyse du lien phosphodiester en reculant 4- action régulière de polymérisation de la polymérase peut reprendre
124
combien d'erreurs résiduelles occurent malgré le proofreading
1 erreur par 10 000 000 de nucléotides
125
ADN polymérase possède 2 sites soit:
site catalytique de polymérisation (P) site d'édition (E)
126
à quoi sert le site d'édition de l'ADN polymérase
excision et correction
127
si nucléotide incorrect est ajouté sur 1 des brins, que se passe-t-il
brin se déplace temporairement vers le site E pour la correction
128
que se passe-t-il quand la mutation n'est pas corrigée pendant la réplication ou quand une lésion survient apres la réplication
DNA Mismatch Repair
129
lors du DNA mismatch repair, les mésappariements causent ??? qui sont reconnus par ???
causent des distorsions de la double hélice reconnus par des protéines spécifiques
130
comment fonctionne le DNA mismatch repair
protéine de reconnaissance forment un complexe qui recrute une exonucléase (Exo1) une portion du nouveau brin incluant un nucléotide erroné est dégradé par exonucléase
131
comment fonctionne le DNA mismatch repair
protéine de reconnaissance forment un complexe qui recrute une exonucléase (Exo1) une portion du nouveau brin incluant un nucléotide erroné est dégradé par exonucléase réparation de la lacune créée par ADN polymérase et ligase
132
pourquoi doit-on absoluement reconnaitre le nouveau brin pendant le DNA Mismatch Repair
parce que le mécanisme est spécifique au nouveau brin
133
comment reconnait on le nouveau brin chez les bacteries E.coli
nouveau brin pas immédiatement méthylé ce qui permet la reconnaissance
134
comment reconnait on le nouveau brin chez les autres organismes
on suppose que le brin néosynthétisé contient des nicks qui permettent de l'identifier (méthylation aussi possible)
135
décrit l'endonucléase
clivent à l'intérieur de la molécule d'ADN produisant un nick (si sur un seul brin) ou une coupure (si sur les 2 brins)
136
décrit l'exonucléase
digèrent le brin d'ADN dans la direction 5' vers 3' ou 3' vers 5' (selon le type d'exonucléase) besoin d'un bout 5' ou 3' libre pour pouvoir agir donc ne peut pas agir à l'Intérieur de l'ADN
137
Exo1 peut agir à l'intérieur du brin d'ADN parce que...
un nick crée un brin libre 5' et 3'
138
décrit la dépurination
collisions thermiques entre molécules causent la perte des purines (A et G) de certains nucléotides casse pas le squelette phosphodiester de ADN mais génère des lésions perte de la base
139
suite à une dépurination, que se passe-t'il apres la réplication si il n'y a pas de réparation
1 des 2 hélices d'ADN créées a un nucléotide en moins (mutation)
140
décrit la déamination
métabolisme peut causer la perte du groupement amino de cytosines ce qui la transforme en uracil (non-complémentaire à la base située sur l'autre brin)
141
que ce passe t'il apres la réplication sans réparation suite à une déamination
appariement C--G devient un appariement A--U sur 1 des 2 ADN synthétisés (mutation)
142
décrit les dimères de thymine
rayons UV du Soleil peuvent endommager ADN en provoquant la formation de liens covalents entre 2 thymines adjacentes bris du double lien C=C à l'intérieur du cycle de la base et formation d'un lien covalent avec base inférieure ou supérieure sur le brin
143
décrit les étapes de la réparation de lésions par excision
1- ADN endommagé reconnu et portion affectée est excisée par nucléase 2- ADN polymérase de réparation se fixe au brin coupé et fait une copie complémentaire (5' vers 3') du brin normal indemne 3- cassure au niveau du squelette est reliée grace à ADN ligase
144
Vrai ou faux, peu importe le type de dommages, c'est le meme nucléase qui excise la portion affectée
faux, différents nucléases pour différents dommages
145
CONCEPT À RETENIR Quelle est la différence entre une mutation somatique et une mutation germinale
mutation germinale: héritée par descendance mutation somatique: pas héritée par descendance
146
CONCEPT À RETENIR quelles sont les conséquences d'une mutation germinale vs mutation somatique
germinale = maladie génétique somatique = cancer
147
CONCEPT À RETENIR Quelles sont les causes des mutations
erreurs d'incorporation de nucléotides par l'ADN polymérase lésions provoquées par métabolisme, radiation ou composés chimiques
148
CONCEPT À RETENIR quels sont les mécanismes de réparation de mutations
Proofreading DNA Mismatch Repair Excision
149
CONCEPT À RETENIR Comment les mutations sont reconnus dans la cellule
provoquent des distorsions de l'hélice d'ADN