Cours 3 Flashcards
Les lysos ont été découverts par qui? En quelle année?
- Christina de Duve
2. Début 1950
Pourquoi on dit que la découvert des lysos s’est faite en sens inverse qu’à l’habitude?
Car on a découvert son activité biochimique avant de découvrir sa morphologie
de Duve étudiait l’activité de la phosphatase acide de quoi?
du foie de rat
Qd de Duve étudiait l’activité de la phosphatase acide du foie de rat, il obtenait des résultats étranges:
- Activité enzymatique était d’autant plus forte que le traitement était brutal
- Activité enzymatique augmente qd les fractions sont gardées au congélo pendant quelques jours
Donne un exemple qui montre que l’activité enzymatique était d’autant plus forte lorsque le traitement était brutal
L’activité enzymatique lors de l’homogénéisation en douceur était 10x moindre qu’en homogénéisation brutale
Le fait que l’activité enzymatique augmente qd les fractions sont gardées au congélo pendant quelques jours montre quoi?
il y a une phénomène de latence de l’activité enzymatique
Quelle est la conclusion de de Duve?
Les enzymes sont enfermées dans une organelle perméable au substrat et la membrane se rompt lors de conditions brutales, ce qui permet de libérer les enzymes
Au début, ils pensaient que les lysos étaient…
mitos
Vu que de Duve pensait que les lysos étaient des mitos, il a créé 2 catégories:
- motos légères: faible taux de sédimentation
2. motos lourdes: taux de sédimentation élevé
Après avoir créé 2 classes de mitos, de Duve se rend compte de quoi? Pourquoi?
- les mitos légères ne sont pas des mitos
2. pas d’activité de respiration, pas d’oxydation, pas de cytochrome-oxydase et très riche en enzymes hydrolytiques
En faisant des coupes minces de lysos au MET, on remarque quoi?
- Dimensions et formes sont diversifiées
- Souvent une vésicule (0,1-0,um de D) avec 1 membrane de mosaïque fluide
- Matrice finement granuleuse
- Collection hétéroclite de vésicules et vacuoles avec des enzymes hydrolytiques
Est-ce que les lysos sont toujours sphériques
Non, mais si ils ne sont pas sphériques: il y a une raison
Pourquoi on utilise le principe de cytoenzymologie (Gomori) pour étudier les lysos?
Car un des grands enjeux des lysos: activité enzymatique
Quel est le principe global de la cytoenzymologie?
prend une enzyme particulière et on met du phosphate de plomb pour visualiser au MET
V ou F: toutes les c ont des lysos
F: juste les euc
Quelle substance permet aux lysos de faire la digestion?
Hydrolyses acides
Combien il y a-t-il d’hydrolases acides/lyso?
50
Que font les hydrolyses acides?
dégrade la majorité des constituants caires
Donne 6 exemples d’hydrolases acides
- Protéase
- Lipase
- Phosphatase
- Phospholipase
- Ribonucléase
- Glucosidase
Entre les c hépatiques et les c rénales, lesquelles ont une plus grande activité biochimique?
hépatocytes
Pourquoi les c hépatiques et les c rénales ont une grande activité biochimique?
Car elles travaillent en continu
V ou F: les lysos sont situés au carrefour de la voie de sécrétion et de la voie exocytaire
F: au carrefour de la voie de sécrétion et de la voie endocytaire
Si toutes les c font la digestion caire, comment différencier leur activité biochimique?
Font toutes la digestion caire, mais pas toutes au même degré
Quelles sont les 4 particularités de la membrane des lysos?
- Pompes à H+ pour maintenir le pH acide
- Membrane est perméable à l’eau et aux petites molécules organiques dont la masse moléculaire es plus petite que 200D. Une fois que les macromolécules sont hydrolysées en leur monomère, vont dans le cytosol pour faire les macromolécules pour la c
- Avec la membrane, cytosol est protégé des hydrolyses acides + son pH de 7,2 diminue activité de HL
- Prots luminal sont glycosyslées pour éviter digestion par protéases
Les pomes à H+ (en plus de diminuer le pH) permettent quoi? (à grande échelle)
Diminuer le pH de manière graduelle
Où sont mis les P sur les prots qui vont aux lysos?
RCG
Comment différencier les oligossac qui arrive au RCG?
Peut pas! sont tous pareils
Donne les étapes qd on met le P sur l’oligosacc
- Prots qui vont au lysos ont une séquence signal reconnue par N-acétylglucosamine phosphotransferase
- UDP et séquence signal s’installent sur le site de reconnaissance de N-actéyl…
- Phosphotransferase met P et le sucre sur le mannose 6C
- N-acétylglucosamine phosphoglycosidase enlève le sucre
Qu’est-ce que le MP6?
Signal reconnu par les récepteurs de MP6 dans le RTG
Donne les étapes de la route primaire
- Récepteur de MP6 sont captés par la clathrine
- Prots qui vont aux lysos se fixe sur récepteur
- vés enrobées –> nue –> vésicule de transport golgienne
- Fusion avec endosmose précoces ou tardifs
- pH baisse alors MP6 et récepteurs se détachent
Comment reconnaitre une prots qui va aux lysos (autre que P sur oligosacc)?
Présence d’une séquence signal
Quel est le rôle de N-acétylglucosamine phosphotransferase?
favoriser la réaction entre UDP et oligosacc
Pourquoi on met un P et un sucre?
Car P est souvent accompagné en raison de sa charge
Pourquoi on pourrait dire que le P est transitoire?
Car sert juste à être reconnu par récepteur de MP6 pour ensuite être enlevé dans les endosomes
Qd les récepteurs de MP6 se détachent de MP6, que font-ils?
Voie de recyclage via des vésicules enrobées de rétromère pour retourner au RTG
Donne les étapes de la route secondaire:
- Certaines hydrolases acides et récepteur de MP6 échappent au mécanisme de reconnaissance dans le RTG et vont vers le milieu extracaire
- Endocytose par l’entremise de récepteurs permet de les capturer – précoces –> tardifs –> lysos
Décris le rétromère
Forme particulière (grosse) et fait JUSTE le recyclage des structures lysosomales
COP II utilisé dans:
RE
COP I utilisé dans:
CIREG et Golgi
Différence entre précoce et tardif:
pH plus acide dans tardif
La digestion commence où?
Tardif
V ou F: la membrane des lysos est fortement glycolyse sur le feuillet luminal
V
Quelle était la vue ancienne de la provenance des lysos?
Vésicules du RTF: pas d’intermédiaires d’endosomes
Décris la provenance des lysos primaires?
Vésicules du RTF: pas d’intermédiaires d’endosomes
Décris la provenance des lysos secs?
Fusion entre une vacuole d’endocytose et un lyso
Les expériences qui ont menées à la vue moderne ont utilisé quel composé chimique? et que montre ce composé chimique?
- Fluorescéine
2. Les intermédiaires entre le golgi et les lysos
En utilisant la Fluorescéine, comment reconnaitre les lysos?
rouge
En utilisant la Fluorescéine, comment reconnaitre les endosomes?
bleu-vert
Le compartiment endosomal est formé de quoi?
Tubules et vésicules en périphérie des c vers la région périnucléaire
Pour baisser leur pH, les endosomes ont…
pompes H+ dans leur membrane
Décris le parcours de l’endocytose du cholestérol
- endocytose par l’entremise de récepteur
- Fusion avec endosome –> baisse du pH –> cholestérol et son récepteur se dissocient
- Cholestérol reste dans la partie vésiculaire de l’endosome, alors que le récepteur va dans une partie plus tubulaire pour augmente le rapport S/V donc pour avoir plus de récepteurs
Quels sont les 4 types d’endosomes?
- Précoce
- Tardif
- Recyclage
- Corps multivésicualires
Après combien de temps, suite à l’endocytose, les ligands se retrouvent dans les endosomes précoces?
1 min
Le milieu acide des endosomes précoces permet quoi?
Dissociation du ligand avec son récepteur
Quelles sont les 2 formes que les endosomes précoces peuvent prendre? pourquoi?
Vésiculaire pour les ligands
Tubulaire pour les récepteurs: augmenter le rapport S/V pour augmenter le nbre de récepteurs qui peuvent retourner à la membrane plasmique
Dans les endosomes précoces, il y a 2 voies:
- Recyclage
2. Vers les tardifs (digestion)
Endosomes de recyclage = fusion des…
Endosomes précoces
Endosomes de recyclage = intermédiaires entre…
Précoce et membrane plasmique
Quelles sont les 3 fonctions des endosomes de recyclage?
- Recyclage des récepteurs membranaires
- Transcytose
- Stockage de prots membranaires
Qu’est-ce que la transcytose?
Forme d’endocytose, mais on transporte avec un signal pour aller à la partie apicale (on va donc de baso à apical) dans une c épithéliale
V ou F: les prots des milieux basolatéral et apical ont les memes prots
F
Donne 2 exemples de transcytose:
- Transport des IgA du milieu int vers la lumière des glandes mammaires (ext)
- Transport des IgA du lait maternel au bébé
Donne un exemple de stockage de prots membranaires fait par les endosomes de recyclage
Accumulation de transporteurs de glucose et qd signal (insuline), libération des prots à la membrane plasmique
Dans quel compartiment les hydrolases acides reçoivent-elles leur P?
RCG
V ou F: Transcytose est le passage exclusif du milieu baso (int) vers apical (ext)
F: Int vers ext, mais aussi ext vers l’int
Comment est formé un corps multivésiculaire?
Invagination de la membrane de la vacuole qui forme des vésicules à l’intérieur
Corps multivésiculaire permet quoi? Et grâce à quoi?
- Digestion des prots membranaires
2. Grâce à ubiquitines
Pourquoi les prots membranaires, pour être digérées, doivent aller dans les corps multivésiculaires?
Car sinon leur partie cytosolique ne serait pas digérée
corps multivésiculaire = intermédiaires entre…
Tardifs et lyso
Les endosomes tardifs sont proche du…
noyau et golgi
Suite à l’endocytose, les molécules se retrouvent dans l’endosome tardif après combien de temps?
5-15 min
Que font les endosomes tardifs? Grâce à quoi?
- Poursuite de la digestion
2. pompes H+ font diminuer le pH, ce qui améliore l’efficacité des hydrolases acides
Les c épithéliales ont combien de compartiments d’endosomes tardifs? et de précoces?
- 1
2. 2: 1 pour baso et l’autre pour apical
Diff entre la digestion des corps multivésiculaire et des protéasomes?
Protéasomes utilisent les poly-ubiquitines, alors que les corps multivésiculaires utilisent ubiquitine
Comment les endosomes précoces se déplacent?
microtubules
Qu’arrive-t-il lors des déplacement des endosomes précoces?
Perte du matériel à recycler vers la membrane plasmique
Fusion de corps multivésiculaires entre eux =
tardifs
Fusion de corps multivésiculaires avec tardifs =
tardifs
Fusion de tardifs + lysos =
endolysos –> lysos
molécules voyagent entre les structures via…
vésicules de transport