Cours 2 - Qualité du modèle expérimental et conditions d’hébergement Flashcards
<div> <div> <div> <div>Pourquoi utiliser des animaux?</div> </div> </div></div>
“1-Faire progresser les connaissances scientifiques<br></br>2-Comme modèles d’études d’une maladie<br></br>3-Pour développer et tester des formes potentielles de traitement<br></br>4-Pour garantir la sécurité des personnes, des animaux et de l’environnement.”
Quel animaux Louis Pasteur avait utilisé? Quel était sa théorie?
Moutons, théorie microbienne
“<div> <div> <div> <div>Qu’ont découvert Sir Frederick Banting et Dr Charles Best?</div> </div> </div></div>”
“Découvert l’insuline à l’aide de chien.”
“En quel année il y a eule premier séquençage et la première analyse d’un génome de souris?”
2002
Modèles spontanés ou naturels
<div> <div> <div> <div>Modèles animaux chez lesquels des maladies ou des affections d’origine naturelle sont identiques à celles que l’on retrouve chez l’humain (p. ex, le diabète et l’arthrite)</div> </div> </div></div>
Modèles expérimentaux
<div> <div> <div> <div>Modèles animaux chez lesquels le chercheur reproduit expérimentalement une affection ou une maladie (p. ex, le cancer ou un accident vasculaire cérébral</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Modèles génétiquement modifiés</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Modèles animaux dont le code génétique a été manipulé pour provoquer la maladie ou l’affection</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Modèles négatifs</div> </div> </div></div>
” <div> <div> <div>Modèles animaux qui sont résistants à une affection ou à une maladie donnée<br></br></div> </div> </div>”
” <div> <div> <div>Modèles orphelins<span></span><b><br></br></b></div></div> </div>”
” <div> <div> <div>Modèles animaux présentant des affections pour lesquelles il n’existe pas d’équivalent chez l’humain<br></br></div> </div> </div>”
“Vrai ou Faux, Quelle que soit l’espèce choisie il faut la garder dans les meilleures conditions possibles et assurer son bien-être.<span></span>”
Vrai
Remplacement?
<div> <div> <div> <div>Solutions autres que l’emploi d’animaux ou utilisation d’animaux ayant une sensibilité moindre.</div> </div> </div></div>
Raffinement?
<div> <div> <div> <div>Modification des procédés d’entretien ou d’expérimentation pour diminuer la douleur et la détresse et améliorer le bien- être de l’animal.</div> </div> </div></div>
Réduction?
<div> <div> <div> <div>Utilisation de modèles animaux appropriés en quantités suffisantes afin de réduire les variations et le nombre d’animaux requis<b>.</b></div> </div> </div></div>
Facteurs à considérer quandon décide d’utiliser des animaux pour l’expérimentation
“<div> <div> <div> <div>1-L’espèce, la race ou la souche<br></br>2-Le modèle animal<br></br>3-La qualité de l’animal disponible (statut génétique et de santé) <br></br>4-Les conditions d’hébergement nécessaires<br></br>5-Les manipulations qui seront effectuées</div> </div> </div></div>”
Caractéristiques des animaux à évaluer
1-génétiques :animal consanguin, non consanguin, mutant, modifié par géniegénétique…<br></br>2-biologiques :âge,poids, reproduction…<br></br>3-microbiologiques :immuno-incompétent, gnotobiotique…<br></br>4-physiologiques :pression sanguine, glycémie…<br></br>5-comportementales :nocturne, grégaire…<br></br>6-psychologiques :peur, anxiété, nervosité<br></br>7-environnementales (épigénétique).
<div> <div> <div> <div>On utilise des modèles pour<br></br> </div> </div> </div></div>
“1-Développer de nouveaux médicaments.<div> <div> <div> <div>2-Évaluer la toxicité de composés ou de médicaments.<br></br>3-Étudier la fonction des gènes.<br></br>4-Étudier les processus biologiques, physiologiques ou patho-physiologiques<span>.</span></div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Le modèle animal devrait posséder quelles caractéristiques</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>1-Le même phénotype que celui de la maladie étudiée <br></br>2-La même cause<br></br>3-Une pathophysiologie similaire<br></br>4-La même réponse au traitement</div> </div> </div></div>
Vrai ou Faux,Les modèles animaux sont très spécifiques à un champ d’étude particulier.
Vrai
Exemples de traitement où on utilise les animaux?
“1-Sclérose en plaque<br></br>2-Le stress social induit une pathologie neurovasculaire favorisant la dépression<br></br>3-Maladies hépatiques<br></br>4-Traitement du cancer à l’aide de virus oncolytiques<br></br>5-Oie domestique comme modèle de stéatose hépatique”
“Vrai ou Faux, Les rats et les souris peuvent être utilisés comme modèles d’animaux pour le diabète?”
Vrai
“2 animaux qui peuvent être utilisé comme modèle pour l’alzheimer”
Souris et rat
Comment obtenir des animaux consanguins?
<div> <div> <div> <div>croisements frères - sœurs sur 20 générations</div> </div> </div></div>
Pourquoi travailler avec des animaux consanguins?
“Pour avoir des animaux totalement identiques d’un à l’autre”
<div> <div> <div> <div>On a établi arbitrairement qu’une souche est consanguine après</div> </div> </div></div>
“1- Descroisements frères - sœurs sur 20 générations, <br></br>2- Tous les individus de la colonie descendent d’ancêtres communs (un seul couple) <br></br>3- Les souches consanguines utilisées en recherche doivent être isogéniques i.e. tous les individus sont génétiquement identiques<span></span>”
Comment on peut éviter une dérive génétique (mutations spontanées qui peuvent apparaitre après plusieur générations)
Réintroduire des animaux de la même souche
Vrai ou Faux, les souches non consanguines ne sont plus très utilisés
Faux, elles le sont encore
“Principal désavantage d’utiliser des souches non consanguines?”
Elles sont génétiquement mal définies
Nommer 2 désavantages de souches non consanguines
1-Pas de système pour assurer la qualité génétique<br></br>2- Peu d’information sur leurs caractéristiques génétiques ou sur leur phénotype
“On utilise plus d’animaux avec des souches consanguines ou non cosanguines?”
souches non consanguines
“Pourquoi on a besoin de plus d’animaux avec des souches non cosanguines”
“Variabilité plus importante d’un animal à l’autre”
Pourquoi les souches non cosanguines ne devraitpas être utilisées pour les études de pharmacologie, toxicologie, ou en recherche fondamentale.
“À cause de leur grande variabilité, pas beaucoup d’information génétique”
Une des seule utilité des animaux avec souches non cosanguines?
“Lorsqu’on travail sur des études génétiques comme on ferais sur l’humain, car ça serait l’équivalent animal des études génétiques fait sur l’humain.”
“La souris diffère de l’humain par”
1-Sa taille<div> <div> <div> <div>2-Son rythme métabolique<br></br>3-Son histoire de vie</div> <div>4-Sa diète, son microbiome, ses pathogènes<br></br>5-Les différences associées à sa domestication</div> </div> </div></div>
Nouvelle technique de choix pour faire des souris transgéniques (modifiées par génie génétique)
“<div> <div> <div> <div>CRISPR-Cas9 (utilise un ARN guide pour la portion du gène qu’on veut modifier en présence d’un enzyme, on va pouvoir modifier le génome de la cellule qui va être réintroduite chez l’animal après)</div> </div> </div></div>”
“Qu’est-ce que permet les souris transgéniques?”
1-Gain d’une fonction : Le transgène surexprime une protéine endogène ouétrangère → nouveau phénotype<br></br>2-Perte de fonction : Expression d’une forme altérée d’une protéine →interfère ou bloque la fonction d’une protéine normale<br></br>3-Expression spatio-temporelle
Knockout
<div> <div> Mutation nulle/délétion pour étudier la fonction d’un gène.<br></br> </div> </div>
Knockin
Mutation introduite pour étudier la fonction altérée d’un gène.
Transgénique
Introduction d’un gène étranger (autre espèce).
“Vrai ou Faux, La recherche avec les animaux implique qu’on doit être transparent avec les données expérimentales.”
Vrai
Résumer du modèle animal (6)
1-Un modèle animal doit être adapté à l’étude proposée.<br></br>2-Les modèles animaux sont très spécifiques à un champ d’étude particulier.<br></br>3-Les modèles animaux sont créés (on ne les trouve pas par hasard !). Beaucoup de recherches sont consacrées au développement de modèles<div> <div> <div> <div>animaux.<br></br>4-On peut améliorer un modèle animal.<br></br>5-Le modèle animal utilisé doit être validé, on doit s’assurer qu’il permettra de prédire la réponse chez l’humain.</div></div></div></div>
Effets de la maladie sur la recherche?
“1-Perte d’animaux<br></br>2-Perte de résultats expérimentaux ou résultats faussés<br></br>3-Risques pour les gens qui travaillent avec ces animaux<br></br>4-Perte de ressources (argent)”
Types de maladies?
<div> <div> <div> <div>1-maladies spontanées<br></br>2-maladies induites par des agents pathogènes<br></br>3-maladies induites par les manipulations expérimentales</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Parvovirus</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>1-Affecte de façon chronique la réponse immunitaire in vivo, les effets sont variables selon la souche et le tissu lymphoïde<br></br>2-Interfère avec études sur le cancer</div> </div> </div></div>
“<div> <div> <div> <div><span>Helicobacter hepaticus</span></div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Augmentation marquée de l’incidence de néoplasmes hépatiques.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Programme de surveillance de la santé des rongeurs</div> </div> </div></div>
1-On place des animaux sentinelles dans les salles.<div> <div> <div> <div>2-Ils reçoivent la litière souillée des autres animaux, leurs restes de nourriture et d’eau.<br></br>3-On teste périodiquement les sentinelles (au moins 4 fois/an)</div> </div> </div></div>
Teste périodiquement les sentinelles?(5)
<div> <div> <div> <div>1-Sérologie<br></br>2-PCR<br></br>3-Bactériologie </div> <div>4-Parasitologie <br></br>5-Nécropsie</div> </div> </div></div>
Vrai ou Faux, Pour le programme de surveillance de la santé des rongeur on peutégalement prendre des animaux de la colonie mais il faut beaucoup d’animaux pour avoir un échantillon représentatif.
Vrai
<div> </div>
<div> <div> <div> <div>Programme de conditionnement des animaux (Chien, chat, primates non-humains, grenouilles...)</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Les animaux sont mis en quarantaine et subissent:<br></br>1-Examen vétérinaire <br></br>2-Vaccination</div><div> <div> <div> <div>3-Traitements antiparasitaires <br></br>4-Soins de base </div> <div>5-Bilan sanguin<br></br>6-Traitement des conditions pathologiques</div> </div> </div></div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Évaluation du matériel biologique, on doit tester?</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div>1-les lignées cellulaires<br></br>2-les cellules tumorales<br></br>3-les hybridomes et les fluides biologiques d’origine animale<br></br>4-quelque soit la provenance de ce matériel : laboratoire du chercheur, laboratoire d’un collègue,compagnie privée incluant ATCC.</div> </div> </div>
Les tests PCR sont requis car?
<div>1-Plus sensibles que les tests MAP ou RAP (Mouse antibody production ou le Rat antibody production).</div>
<div>2-Ne requiert pas l’utilisation d’animaux.</div>
<div> <div> <div> <div>Un point limite éthique</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>C’est un moment <b>prédéterminé</b>, dans le cadre d’un protocole expérimental, pour arrêter, diminuer ou minimiser toute souffrance ou détresse subie par un animal.</div> </div> </div></div>
Pour le point limite il faut prévoir?
<div> <div> <div>Les complications pouvant menacer le bien-être physique ou psychologique d’un animal dans le cadre d’une étude, d’un protocole.</div> </div> </div>
Pour le point limite il faut planifier?
<div> <div> <div> <div>L’action retenue lors de l’atteinte d’un point limite</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div>Lors de l’atteinte d’un point limite l’action retenue sert à</div> </div> </div>
1-Soulager rapidement l’animal (traitement, arrêt des procédures euthanasie.<br></br>2-Agir le plus tôt possible tout en respectant les objectifs scientifiques visés.<br></br>3-Ne pas oublier de déterminer la responsabilité de chacun.
<div> <div> <div> <div>Comment développer la liste des points limites éthiques</div> </div> </div></div>
1-Identifier des indicateurs significatifs de souffrance ou de détresse chez l’espèce étudiée.<br></br>2-Choisir les observations prédictives de détérioration limite et identifier les points les plus précoces.<br></br>3-Assigner des valeurs objectives à ces observations.<div> <div> <div> <div>4-Grille d’évaluation des signes cliniques<br></br>5-Déterminer le score qui sera le point limite</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div>On développe une liste des points limites éthiques en utilisant:</div> </div> </div>
<div> <div> <div> <div>1-L’expertise développée par le laboratoire </div> <div>2-L’expertise des services vétérinaires </div> <div>3-L’expertise développée par les membres du comité local de protection des animaux.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>On développe une liste des points limites éthiques en effectuant une étude préliminaire (étude pilote) soit:</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>1-Petit nombre d’individus </div> <div>2-Surveillance accrue nécessaire<br></br>3-Rapport à soumettre au comité de protection des animaux</div> </div> </div></div>
“Caractéristique d’une animalerie”
1-Animaleries faciles à approvisionnées<div><div> <div>2-Facile d’accès pour le personnel </div> <div>3-Éviter le déplacement des animaux et cages sales à travers lieu public</div> </div> </div>
“Il y a des locaux d’hébergements séparés pour?”
1-Pour chaque espèce<div> <div> <div> <div>2-Pour animaux avec statut sanitaire différents, parfois pour des fournisseurs différents <br></br>3-S’il y a des soins particuliers à apporter aux animaux (ex : cycle de lumière inversé)</div> </div> </div></div>
“L’environnement des salles d’hébergement”
<div> <div> <div> <div>1-Température et humidité constantes <br></br>2-Cycle de lumière<br></br>3-Procédures de nettoyage et entretien</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Salles conventionnelles</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Salles qui servent à l’hébergement des animaux avec mesures de sécurité minimales.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>La barrière</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Consiste en une combinaison de mesures physiques et de procédures visant à réduire le transfert de microorganismes d’origine animale ou humaine d’un côté à l’autre de la barrière.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Barrière d’exclusion</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Empêche l’entrée de certains microorganismes d’origine animale provenant de sources extérieures</div> </div> </div></div>
” <div> <div> La barrière d’exclusion protège</div> </div>”
<div> <div> <div> <div>1-Les animaux exempts de pathogènes spécifiques 2-Les animaux immuno-compromis<br></br>3-Les animaux modifiés par génie génétique($)</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Antichambre</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Permet l’entrée des personnes et de l’équipement</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Pression positive</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Pression d’air différentielle, l’air circule de la salle, à l’antichambre, au corridor</div> </div> </div></div>
“<div> <div> <div> Barrière d’exclusion mesures physiques</div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>1-Antichambre</div> <div>2-Pression positive</div> <div>3-Portes inter-verrouillées<br></br>4-Filtres à air à haute efficacité (HEPA)<br></br>5-Éviers /douches/vestiaires<br></br>6-Cages avec couvercle filtre, cages ventilées, cages ventilées étanches, micro-isolateurs...</div> </div> </div></div>
” <div> <div> <div>Barrières d’exclusion mesures fonctionnelles</div> </div> </div>”
1-Douche (pas toujours exigée)<br></br>2-Vêtements spécifiques pour entrer.<br></br>3-Équipement de protection (masque, gants, bonnet, couvre chaussures)<br></br>4-Utilisation de hotte à flux laminaire.<br></br>5-Procédure pour ouvrir les cages, nettoyage et entretien.<br></br>6-Conditions déterminées pour : nourriture, litière, eau et tout ce qui entre en contact avec les animaux. (ex nourriture passée à l’autoclave ou irradiée, eau stérile ou chlorée, litière et cages passées à l’autoclave).
<div> <div> <div> <div>Microbiote</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Ensemble des bactéries, virus et levures vivant dans un milieu déterminé.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Animaux gnotobiotiques</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Se dit des animaux de laboratoire obtenus dans des conditions qui permettent le contrôle parfait de leur flore microbienne.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Barrière d’inclusion</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Empêche certains microorganismes d’origine animale de s’échapper de la barrière vers l’extérieur.</div> </div> </div></div>
“Barrière d’inclusion mesures physiques”
Similaires à la barrière d’exclusion sauf la pression négative pression d’air différentielle, l’air circule du corridor, à l’antichambre, à la salle.
“<div> <div> <div> <div>Barrière d’inclusion mesures fonctionnelles niveau de bio confinement groupe de risque 1</div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Risque faible pour l’individu et la collectivité<br></br> </div> </div> </div></div>
“Barrière d’inclusion mesures fonctionnelles niveau de bio confinement groupe de risque 2”
<div> <div> <div> <div>Risque modéré pour l’individu, limité pour la collectivité</div> </div> </div></div>
“Barrière d’inclusion mesures fonctionnelles niveau de bio confinement groupe de risque 3”
<div> <div> <div> <div>Risque élevé pour l’individu, faible pour la collectivité</div> </div> </div></div>
“Barrière d’inclusion mesures fonctionnelles niveau de bio confinement groupe de risque 4”
<div> <div> <div> <div>Risque élevé pour l’individu et la collectivité</div> </div> </div></div>
Vrai ou Faux,On ne peut pas avoir une combinaison barrière inclusion/exclusion
Faux, on peut
<div> <div> <div>Salles de procédures,Principe directeur 7</div> </div> </div>
<div> <div> Procédures invasives pouvant causer de la détresse chez les animaux doivent être effectuées dans une salle de procédure plutôt que dans la salle d’hébergement.<br></br> </div> </div>
Salles de procédures, Principe directeur 8
<div> <div> L’animalerie doit avoir de salles de procédures...afin de réduire la nécessité de transporter les animaux à l’extérieur...<br></br> </div> </div>
Salles de procédures, Principe directeur 9
Une salle de procédure séparée doit être utilisée si équipement spécialisé est requis ou si les procédures exigent un minimum de distraction.
Salles de procédures, Principe directeur 10
<div> <div> Les interventions chirurgicales doivent être effectuées sous des conditions d’asepsie et selon les normes vétérinaires reconnues.<br></br> </div> </div>
“<div> <div> <div> <div>Droits des animaux et soins de régie : 5 droits<span></span></div> </div> </div></div>”
” <div> <div> <div>1-le droit de manger et de boire<br></br>2-le droit de ne pas vivre dans l’inconfort<br></br>3-le droit de vivre sans la souffrance, les blessures et les maladies<br></br>4-le droit d’exprimer un comportement normal<br></br>5-le droit de vivre sans la peur et la détresse</div> </div> </div>”
<div> <div> <div> <div>Litière<br></br> </div> </div> </div></div>
“<div> <div> <div> <div>1-Absorbe urine et fèces, ↓ concentration d’ammoniaque.<br></br>2-Plusieurs types (copeau de bois, de papier, de maïs…)<br></br>3-Études pour évaluer la préférence des animaux<br></br>4-Ne doit pas activer les enzymes microcosmiques a/n foie</div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Nourriture<br></br> </div> </div> </div></div>
1-Plusieurs types : standard, autoclavable, irradiée, certifiée, composition ouverte ou fermée…<div> <div> <div> <div>2-Adaptée aux besoins de la recherche (en pâte, en granule, en poudre, liquide…)<br></br>3-Ne doit pas affecter l’expérimentation.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Eau<br></br> </div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Robinet, osmose inverse, stérilisée, chlorée...</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Nombre animaux/ cage</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Limité en fonctions des normes du CCPA et des besoins des animaux.</div> </div> </div></div>
“<div> <div> <div> <div>Période d’acclimatation<span></span></div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Permet à l’animal de s’adapter à son nouvel environnement. Minimum 48 h.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Luminosité<br></br> </div> </div> </div></div>
1-Réglage automatique.<div> <div> <div> <div>2-Habituellement 12h/12h, parfois 14h/10h ou selon besoins expérimentaux. <br></br>3-Intensité maximale de 300 lux a/n cage.<br></br>4-Ouverture des lumières la nuit : compromet la reproduction des rongeurs.</div> </div> </div></div>
<div> <div> <div> <div>Enrichissement du milieu, il faut donner<br></br> </div> </div> </div></div>
“<div> <div> <div> <div>1-Les occasions de socialiser<br></br>2-Les possibilités de passer le temps durant les heures d’éveil<br></br>3-Les possibilités de se cacher<br></br>4-Les possibilités et les structures pour faire de l’exercice.</div> </div> </div></div>”
“<div> <div> <div> <div>Enrichissement du milieu,Principe directeur 7<span></span><span><br></br> </span></div> </div> </div></div>”
<div> <div> <div> <div>Des mesures devraient être adoptées pour améliorer le bien-être des animaux par l’enrichissement de leur milieu en fonction des besoins propres à l’espèce et des besoins physiologiques et comportementaux individuels.</div> </div> </div></div>
” <div> <div> <div>Lavage des cages,Principe directeur 18<span><br></br></span></div> </div> </div>”
<div> <div> <div> <div>Les activités propres et les activités sales effectuées dans une salle de lavage doivent être séparées les unes des autres.</div> </div> </div></div>
