Competência Vetorial para Agentes Infeciosos

Question 1

Grupo 2: Disseminação e replicação
 Objetivo: provar que há disseminação e replicação do vírus de WNV no mosquito Culex sp. Assumir que já
foi provada a capacidade de infeção do vetor pelo vírus
1. Estadio do vetor?
2. Quanto tempo após a infeção deve iniciar a deteção do agente?
3. Material a utilizar para deteção do agente:
4. Técnica laboratorial:

Answer 1

1. Fêmeas adultas
2. 16 a 15 dias
   3.Material de disseção de insetos – ovários e glândulas
   salivares (para provar a disseminação)
3. qPCR (para provar a replicação)

Question 2

O que fazer quando não queremos esperar pelo PI?

Answer 2

inoculação intra torácica

Question 3

Diferença entre capacidade vetorial e competência vetorial

Answer 3

Capacidade: Eficiência de uma população de vetores na transmissão do agente
Competência: Capacidade de um vetor adquirir, manter e transmitir um determinado agente

Question 4

Como se define a competência vetorial

Answer 4

 Adquirir: infetar-se ao ingerir a refeição sanguínea
 Manter: multiplicar o agente, permitir determinado passo do seu ciclo biológico
 Transmitir determinado agente: infetar um outro hospedeiro suscetível
(Tudo isto faz parte do PI extrínseco)

Question 5

Para testar a competência vetorial, precisamos de :

Answer 5

 Testar a capacidade de um vetor se infetar
 Testar a replicação e persistência do agente no vetor
 Testar a capacidade de transmissão

Question 6

A competência depende de:

Answer 6

 Capacidade do vírus de ultrapassar as barreiras à infeção do próprio vetor
 Células epiteliais do intestino médio (multiplicação dentro da célula epitelial): quando passa a barreira, o vírus fica no hemocélio
 Glândulas salivares: após infeção, há um aumento das partículas virais na saliva

 Microbiota e imunidade do vetor
 Interação com outros agentes infeciosos

Question 7

Equipamentos para o estudo

Answer 7

Hemotek - usa-se para disseção insetos mas é um aparelho de alimentação artificial, para ver quanto tempo demoram a alimentar/engurgitar-se e excretar, permite diferentes tª e membranas → Colocação sangue (normal ou virémico) fresco e não hemolisado
Insectário -usa-se para inoculação no hemocélio (ornithodoros) é Sala/estufa/ compartimento para incubação de vetor e Permite definir variáveis ambientais e tempo de permanência

Question 8

Grupo 1: Infeção do vetor
 Objetivo: provar que há infeção do Ornithodoros erraticus pelo vírus da PSA
1. Qual o número de vetores a usar?
2. Estadios?
3. In vivo/in vitro?
4. Qual o título viral?
5. Refira quanto tempo após a infecção deve iniciar a deteção do agente?
6. Técnica laboratorial:

Answer 8

1. Entre 100 e 200
2. Ninfa ou adultos, qualquer dos sexos
   3.Numa fase inicial, pelo menos, in vitro
   4.Elevado (Tem de ser elevado – os mosquitos morrem, nem todos são infetados, etc)
3. 3 semanas
4. Hemotek, PCR e qPCR

Question 9

Grupo 3: Transmissão ao hospedeiro
 Objetivo: Comprovar a capacidade de Ornithodoros erraticus provocar infeção num novo hospedeiro
vertebrado. Assumir que já houve passagem da barreira intestinal e multiplicação do agente no vetor
1. Estadio do vetor?
2. Transmissão in vivo/in vitro:
3. Técnica laboratorial:

Answer 9

1. Macho ou fêmea; ninfa ou adulto
2.  In vivo: colocar a carraça infetada no suíno
    In vitro: colocar a carraça no hemotek, recolher saliva ou líquido da glândula coxal e inocular no suíno
3. PCR, ao sangue do suíno

Question 10

Grupo 4: Transmissão vertical
 Objetivo: Comprovar se há transmissão vertical do WNV em mosquitos
1. Estadio do vetor?
2. Tempo de incubação: do vírus
3. Deteção em que estadio?

Answer 10

1. Adulto fêmea com ovos
2. (16 a 25 dias)
3. Ovo