Colorações Flashcards
Qual é o objetivo da coloração Sudan Black B?
Detectar lípidos finamente dispersos em células hematopoéticas, especialmente no citoplasma e nas membranas celulares.
Com quais substâncias o Sudan Black B reage?
Reage com gorduras neutras, fosfolipídios e esteróis.
Em quais contextos clínicos a coloração Sudan Black B é útil?
Para diagnosticar leucemias mieloides e doenças metabólicas, além de diferenciar células granulocíticas.
Como o Sudan Black B atua nas células?
Ele é um corante lipofílico que dissolve-se em gotículas lipídicas, gerando coloração preta ou azul escura.
Quais células hematopoéticas apresentam reação positiva ao Sudan Black B?
- Leucócitos polimorfonucleares, com intensidade crescente à medida que as células se diferenciam.
- Promielócitos mostram granulações finas, enquanto basófilos apresentam coloração intensa.
Quais são os materiais necessários para o protocolo do Sudan Black B?
5 placas de Petri: 3 com álcool a 70%, 1 com solução de trabalho, 1 com algodão embebido em formol.
Qual é o primeiro passo do protocolo de Sudan Black B?
Adicionar formol ao algodão hidrófilo e fixar as lâminas em vapores de formol (40%) por 20 minutos.
Qual é o objetivo da contra-coloração com safranina no sudan black?
Evidenciar melhor os elementos não corados pela solução Sudan Black
Qual ampliação deve ser usada para observar as lâminas no SB?
Ampliação de 1000x (objetiva de 100x).
Quais são as reações citoquimicas ?
PERLS, PAS, sudão negro B
O princípio das colorações citoquimicas consiste numa reação entre a substância química em estudo e o reagente da coloração a realizar, formando um composto ___________,que se irá depositar no citoplasma das células.
isoluvel
Qual é o objetivo da coloração pelo PAS?
Identificar carboidratos, especialmente glicogénio, em células hematológicas.
Como o PAS funciona?
O ___________o oxida _______________, formando ___________, que reagem com o __________ e produzem coloração __________-.
O ácido periódico oxida carboidratos, formando aldeídos, que reagem com o reagente de Schiff e produzem coloração magenta.
Quais substâncias o PAS pode identificar?
Glicogénio, mucoproteínas e outras substâncias ricas em carboidratos.
Onde a coloração PAS é fortemente positiva e negativa?
-fortemente positiva em neutrófilos maduros, precursores granulocíticos, plaquetas e megacariócitos.
- Fraca em monócitos.
- Negativa em células blásticas como mieloblastos, que não contêm glicogénio.
Qual é a diferença entre o sudão negro B e a mieloperoxidase, em termos de resultados?
São nos grânulos dos eosinófilos, onde há claramente uma limpeza no caso do sudão negro B (no caso da mieloperoxidase podem aparecer grânulos – resultado positivo).
O que serve como tampão no sudão negro?
os cristais de fenol da solução A, e também ajudam a dissolver o sudão
Como é a atividade da fosfatase alcalina na leucemia mieloide crónica (LMC)?
Tipicamente baixa, com scores abaixo de 15.
Em quais condições a atividade da fosfatase alcalina é muito elevada?
Reações leucemoides, metaplasia mieloide e policitemia vera. Com scores acima de 1220
Qual substrato é utilizado na coloração da fosfatase alcalina?
Alfa-naftilfosfato de sódio.
O que ocorre quando o alfa-naftilfosfato de sódio é hidrolisado?
Ele libera uma molécula de água, formando fosfato de sódio e naftol.
O que o naftol faz após ser formado?
Reage com um sal de diazônio (como azul de variamina), formando um precipitado colorido no citoplasma.
Para que serve a safranina na coloração da fosfatase alcalina?
Corar os núcleos das células brancas, criando contraste com as áreas de atividade enzimática.
Em quais células a atividade de fosfatase alcalina é mais forte?
neutrofilos
