Chapitre 8

Question 1

À quoi sert un PCR

Answer 1

Amplifier un segment d’ADN particulier dans génome

Question 2

Formule

Answer 2

y = x 2^n
y= nb finale de copies
x= nb initial de copies
n= nb de cycles

Question 3

Nom de la polymérase

Answer 3

ADN polymerase Taq

Question 4

Taille max des fragments pouvant être amplifier par Taq

Answer 4

4 kb

Question 5

Nom bactérie de l’ADN polymerase Taq

Answer 5

Thermus aquaticus

Question 6

Pourquoi nombre théorique de copies n’est pas le même que nombre expérimental

Answer 6

Épuisement et dégradation de polymérase et amorces

Question 7

Étape 1 d’un PCR

Answer 7

Dénaturation (95 pendant 30 à 60s)

Question 8

Étape 2 d’un PCR

Answer 8

Hybridation (appariement des amorces) (à Tm-5 pendant 30 à 60s)

Question 9

Comment trouve t-on Tm

Answer 9

(4 x (G+C)) + (2 x (A+T))

Question 10

Que signifie Tm

Answer 10

Température de fusion: température à laquelle 50% des molécules sont associées à la matrice

Question 11

Étape 3 d’un PCR

Answer 11

Élongation (72 pendant 30 à 60s)

Durée dépend de longueur (4000b = 4min)

Question 12

Que se passe t’il à la fin du dernier cycle

Answer 12

Étape d’élongation additionnelle pour s’assurer que la synthèse de tous les brins est complète

Question 13

Nombre total de cycles

Answer 13

Plus petit ou égal à 30

Question 14

Longueur des amorces

Answer 14

15 à 35 nucléotides

17 pour génome humain

Question 15

Plus amorces est … plus l’hybridation est spécifique

Answer 15

Longue

Question 16

2 choses à éviter pour le choix d’une amorce

Answer 16

• Séquences complémentaires à l’intérieur d’une même amorce (hairpin)
• Complémentarité de bases entre les 2 amorces

Question 17

Applications du PCR

Answer 17

• Détection organismes pathogènes ou virus
• Analyse de l’expression de gènes spécifiques (suivre développement cancer)
• Identification d’individus par analyse de polymorphisme

Question 18

Nommer types de polymorphismes

Answer 18

• Variations ponctuelles SNP
• STR
• VNTR

Question 19

Nombre d’allèles de chaque individus

Answer 19

• Maternelle
• Paternelle
  Donc 2 allèles