Chapitre 7 Flashcards
Définition plasmide
Séquence extra chromosomique
2 type de plasmide
- Stricte
- Relâché
Type de plasmide utilisé pour le clonage moléculaire
Relâché
Comment dénaturer l’ADN
NaOH ou chaleur (donne ADN sb)
Comment renaturer l’ADN
Baisse du pH (ajout tampon acétate) ou refroidissement lent (donne ADN db)
Comment faire la lyse alcaline des bactéries
SDS-NaOH (détergent ionique)
Comment est la réplication d’un plasmide? Unidirectionnelle ou bidirectionnelle
Unidirectionnelle
Définition vecteur de clonage
Plasmide qui sert à faire pénétrer le gène d’intérêt
Définition ADN recombinant
Gène d’intérêt + plasmide
Définition enzyme de restriction
Endonucléase reconnaissant une séquence spécifique qui présentent un motif de palindrome
Définition ligase
Enzyme qui catalyse la formation du lien phosphodiester
À quel endroit faut-il couper dans le plasmide avec l’enzyme de restriction
Endroit unique où le gène est résistant à un antibiotique
Qu’est-ce qui permet de mettre le gène d’intérêt dans le plasmide
Ligase qui reforme les liens covalents (pont H) et récrée le site EcoR1
L’électrophorèse se base sur quoi pour la séparation de molécules
Mouvement dans un champ électrique
Vitesse de migration dans gel dépend de
- % agarose (+ agarose = + taille des molécules séparées sont petites)
- Force du courant
- Force ionique du tampon d’électrophorèse
- Conformation de l’ADN (circulaire ou linéaire)
- Taille molécule (+ petit va + vite)
