Bacteriologia: Cocos Gram-positivos (Estafilococos)

Question 1

Cocos Gram‐positivos (Estafilococos):

1) Família
2) Gêneros

Answer 1

Micrococcaceae

1) - Staphylococcus (o que vamos estudar)
- Micrococcus: não há descrição de espécies patogênicas. Relatos de espécies importantes para o equilíbrio da microbiota da pele. Colônias regulares com arranjos em 4 cocos (tétrates). Coloração amarela, laranja e vermelha em meio de cultura.
- Stomacoccus: bactérias comensais. Uma das espécies já foi associada a causa de bacteremia grave em imunocomprometidos.
- Planococcus: apresenta apenas bactérias de vida livre, não patogênias.

Question 2

Entre o gênero Staphylococcus, quais são as três bactérias patogênicas principais?

Answer 2

Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus

Question 3

Morfologia do Staphylococcus observada em microscopia óptica:

Answer 3

• Agrupamento em cachos, são irregulares.

- Coloração roxa (gram positivos).

Question 4

Características dos Staphylococcus (5):

Answer 4

• Células esféricas Gram +: cultura nova são roxas, mais velhas entram em senescência e ficam mais rosas.
• Imóveis e não formam endósporos (estruturas de resitência - esporos);
• Aeróbios, anaeróbios facultativos ou microaerófilas;
• Catalase‐positivos (enzima responsável pela conversão do peróxido de hidrogênio em água e oxigênio). Bactérias utilizam o O2 originado dessa reação em sua cadeia respiratória.
• Temperatura de crescimento: 18 a 40°C.

Question 5

Qual organização de Staphylococcus aparece em:

1) Amostras clínicas
2) Amostra de cultura líquida

Answer 5

1) Cachos irregulares

2) Cachos, pares, tétrades e em cadeia

Question 6

Qual a importância dos Staphylococcus serem Catalase‐positivos?

Answer 6

Auxilia na diferenciação entre diferentes bactéria como aquelas pertencentes ao gênero estreptococos

Question 7

Staphylococcus aureus:

1) Temperatura de crescimento ótimo?
2) pH de crescimento ótimo?

Answer 7

1) 37 graus

2) 7

Question 8

1) Em qual meio de cultura, ocorre um bom crescimento dos Staphylococcus?
2) Como se apresentam nesse meio de cultura?

Answer 8

1) Meio de cultura ágar sangue. É um meio de cultura não seletivo.
2) Colônias arredondadas, lisas, elevadas e brilhantes, independente da espécie.

Question 9

Qual a diferenciação de espécies Staphylococcus em ágar sangue?

Answer 9

A coloração:

• Staphylococccus aureus ‐ acinzentadas a amarelo dourado intenso.
• Staphylococccus epidermidis ‐ cinza a branca.

Question 10

1) Qual a principal bactéria do gênero Staphylococcus?

2) Em qual microbiota ela está presente?

Answer 10

1) Staphylococccus aureus

2) Microbiota residentes, podendo ser também agente patogênico.

Question 11

Staphylococccus aureus:

1) Aspecto macroscópico
2) Aspectos microscópicos

Answer 11

1) Colônias de coloração amarelo intenso - relacionado a nomenclatura aureus.
2) Colônias em cocos irregulares agrupadas em cachos.

Question 12

Particularidades da da fisiologia do Staphylococcus aureus:

Answer 12

• Mesófilas. Fermentam carboidratos, produzindo álcool, mas não produzem gases.
  -Tolerantes NaCl - cloreto de sódio - (10%);
• Resistentes ao calor e ao ressecamento;
• Enzimas importantes na identificação:
  • Catalase: em todas as espécies de staphylococcus.
  • Coagulase: enzima exclusiva de Staphylococcus aureus. Quando há bactérias dessa espécies soltas no plasma, ocorre formação de um coágulo.
• Amarelo em ágar sangue, podendo apresentar espécies acinzentadas. Pode ocorrer também, em algumas cepas, hemólise nesse meio de cultura (característico de algumas cepas de Staphylococcus aureus).

Question 13

Quais os principais testes bioquímicos utilizados na identificação de Staphylococcus aureus, em relação a outros Staphylococcus?

Answer 13

• Prova da coagulase e da catalase

- Fermentação/ crescimento em Ágar Manitol

Question 14

Diferenciação de Staphylococcus aureus e epidermidis em ágar manitol:

Answer 14

• Staphylococcus aureus: cresce e modifica a coloração do meio
• Staphylococcus epidermidis: não cresce e não modifica a coloração do meio

Question 15

Características de um micro-organismo perfeito, ao se estudar a patogênicidade:

Answer 15

• Boa invasão
• Boa colonização: pode se dar por proteínas de superfície que atuam na aderência do microorganismo ao tecido do hospedeiro.
• Boa dissseminação
  É um microorganismo capaz de gerar patologias graves.

Question 16

A que está relacionado, em geral, o potencial de virulência do microorganismo?

Answer 16

Aos componentes da parede celular.
Aos componentes estruturais do microorganismo
As substâncias secretadas por esses microorganismos

Question 17

1) Componentes que contribuem para a virulência do gênero Staphylococcus aureus:
2) Todo Staphylococcus apresenta esses componentes?
3) Qual componente possibilita maior aderência aos tecidos e aos diapositivos médicos?

Answer 17

1) Cápsula e camada mucoide: natureza polissacarídica com propriedades antifagocíticas (resistência a fagocitose) - maior poder de invasão.
2) Nem todos apresentam o componente capsular.
3) Camada mucoide: a maioria dos Staphylococcus apresentam essa camada.

Question 18

Quais os sorotipos de Staphylococcus aureus mais responsáveis por infecções me humanos?

Answer 18

5 e 8 (75%)

Question 19

Staphylococcus aureus:

1) O que os peptídeos glicanos determinam nas células?
2) Podem apresentar ação semelhante a qual substância?

Answer 19

1) Rigidez, por possuírem múltiplas camadas unidas por ligações cruzadas.
2) Ação semelhantes a das endotoxinas presentes nas bactérias gram negativas.
Estimulam a produção de citocinas pelos macrófagos, ativando uma via do complemento, desencadeando ação inflamatória e agregação. Isso explica a capacidade de o Staphylococcus aureus causar choque, embora não possua endotoxinas

Question 20

Staphylococcus aureus:

1) Quais componentes presentes na parede celular são espécie específicos?
2) O que esses componentes fazem?

Answer 20

1) Ácidos teicois, presentes na parede celular são espécies específicos e, apesar de serem imunologicamente fracos, podem atuar ativando a inflamação.
2) Medeiam a adesão de Staphylococcus a células mucosas, desempenhando um papel importante na indução do choque séptico.

Question 21

1) Qual o papel das proteínas de adesão?

2) O que as adesinas fazem?

Answer 21

1) As proteínas de adesão aderem as proteínas da matriz ligada aos tecidos dos hospedeiros.
As adesinas tornam os microrganismos capazes de se ligar as fibronectinas, glicoproteínas da membrana celular e ao plasma.

Question 22

1) O que é a Proteína A?
2) Ela é capaz de se liga a que?
3) O que isso provoca?

Answer 22

1) Proteína de superfície presente na maioria das amostra de Staphylococcus aureus.
2) Ela se liga a porção Fc do anticorpo.
3) Provoca efeitos quimiostáticos, anticomplementares, antifagocitários, impedindo o reconhecimento do sistema imune. Por meio dessa ligação, ela libera as estaminas, provoca reações de hipersensibilidade e lesões plaquetárias.

Question 23

Coagulase:

1) Presente apenas em qual espécie?
2) Como se apresenta?
3) O que ocorre quando bactérias coagulase positivas são inoculadas em plasma?

Answer 23

1) Staphylococcus aureus.
2) Secretada: coagulase livre ou ligação com a parede celular.
3) Quando bactérias coagulase positivas são inoculadas em plasma, ocorre formação de um coágulo.

Question 24

Coagulase:

1) O que fazem?
2) Qual a sua importância protetora?

Answer 24

1) Catalisam a transformação do fibrinogênio em fibrina.
2) Especula-se que o coagulo induzido por essas bactérias resulta no acúmulo de fibrina ao redor das células bacterianas, isolando essa área, dificultando as ações dos mecanismo de defesa do hospedeiro, protegendo-os da fagocitose.

Question 25

1) Qual a principal enzima extracelular do gênero estafilococos?
2) Qual sua relação com a virulência?

Answer 25

1) Catalase - presente em todas as espécies desse gênero.
2) É um importante fator de virulência, visto que o peróxido de hidrogênio é um microbiocida e sua degradação por essa enzima limita a capacidade dos neutrófilos.

Question 26

Hialuronidase:

1) Ação

Answer 26

1) Hidrólise de ácidos hialurônicos presente na matriz extracelula do tecido conjuntivo, facilitando a migração do microorganismo por essa matriz.

Question 27

Lipase:

1) Presença em estafilococos e em Staphylococcus aureus:
2) Ação

Answer 27

1) Presente em todas as cepas de Staphylococcus aureus e em 30% de estafilococos coagulase negativos.
2) Hidrólise de lipídeos. Observado nas áreas sebáceas do corpo. Ex: furúnculos.

Question 28

Nuclease:

1) Ação
2) Importante marcador para:

Answer 28

1) Termo estáveis - hidrolisam ácidos nucleiocos

2) Staphylococcus aureus

Question 29

Fibrinolisina:

1) Presença em Staphylococcus aureus:
2) Sinônimo
3) Ação

Answer 29

1) Todas as cepas
2) Estafiloquinases
3) Dissolução de coágulos de fibrinas

Question 30

Enzimas presentes em alguns Staphylococcus resistentes a antimicrobianos:

Answer 30

Beta-lactamases

Question 31

Exotoxinas:

1) Produzidas por:
2) Ação das exotoxinas citolíticas (citotoxinas)
3) Exemplos de citotoxinas:

Answer 31

1) Staphylococcus aureus (principal espécie produtora)
2) Destruição das células do hospedeiro, catalisação de hidrólise de fosfolipídios, desequilíbrio osmótico, aumento da permeabilidade.
3) - Toxina Alfa, Beta, Delta e Gama;
- Hemolisinas: destruição das hemácias
- Leucocidinas: destruição dos leucócitos

Question 32

Toxinas esfoliativas:

1) Produzidas por:
2) Causam:
3) Formas de toxina:
4) Defesa do organismo

Answer 32

1) Staphylococcus aureus: cepas que variam e apresentam baixa prevalência
2) Dermatites esfoliativas por citólise ou inflamação das células dos hospedeiros
- São a principal causa da síndrome da pele escaldada: acomete recém-nascidos e crianças pequenas. Pode predispor a infecções bacterianas secundárias.
3) - Termoestável
- Termolábil
4) Produção de anticorpos que neutralizam essas toxinas

Question 33

Enterotoxinas:

1) Caracteístocas
2) Produzidas por:
3) Identificação:
4) Mecanismo de ação
5) Principais sintomas
6) Tratamento
7) Duração

Answer 33

1) São termoestáveis e resistentes a hidrólises gástricas e jujunais.
2) Staphylococcus aureus.
3) A a X:
A: mais comumente associada a intoxicação alimentar.
4) São superantígenos capazes de induzir a ativação não específica de células T e a liberação de citocinas.
5) Vômitos intensos, diarreia (aquosa e mucosanguinolenta) e cólica abdominal;
6) Tratamento sintomático. Não é indicado antibiótico terapia.
7) Duração de cerca de 24 horas

Question 34

Toxina 1:

1) Produzidas por:
2) Relaciona-se com qual síndrome?
3) Mecanismo de ação:
4) Características
5) A maioria das cepas desse microrganismo responsáveis por essa síndrome, se relaciona a qual perfil de paciente?

Answer 34

1) Staphylococcus aureus.
2) Síndrome do Choque Tóxico: doença aguda, multissistêmica, caracterizada por febre, rash cutâneo, erupção eritematosa muscular difusa, descamação, hipotensão e falência de múltiplos órgãos.
3) Induz a liberação de linfócitos, citocinas e macrófagos, aumentando a hipersensibilidade a toxina.
4) Produzida localmente, resistente ao calor,
5) Mulheres menstruadas que fazem uso de absorventes internos ou indivíduos que apresentam infecções em seus ferimentos (mais crianças).

Question 35

Qual o padrão ouro do diagnóstico laboratorial de infecções bacterianas?

Answer 35

Isolamento dos microrganismos nos locais de infecções.

Question 36

Como é realizada a cultura/ cultivo dos microorganismos?

Answer 36

Por meio da coleta de amostras biológicas:
- Pus coletado por swab
- Sangue (hemocultura)
- Aspirado traqueal
- Líquido cerebroespinhal
- Nasofaringe anterior
Meio de cultura rico em ágar sangue (estafilococcus) - pouco exigentes do ponto de vista nutricional.

Question 37

Formas além da cultura para identificar o patógeno:

Answer 37

Pode-se, então, fazer a observação em microcópicos (coloração de gram) e macroscópicos.
obs: a observação a fresco é inconclusiva na observação de estafilococos saprofíticos e patogênicos.

Question 38

Testes fisiológicos em caso de suspeita de Staphylococcus aureus:

Answer 38

1) Crescimento em ágar manitol: mudança de coloração após o crescimento das bactérias.
2) Teste da catalse: detectar a enzima catalase (citocromo oxidase) presente em todas as espécies de estafilococos. Casa haja liberação de bolhas de oxigênio, após reação enzimática, utilizando-se peróxido de hidrogênio: resultado positivo.
3) Teste da coagulase: utilizado para confirmar se a infecção é causada por stafilococcus aureus (enzima específica dessa espécie). Formação de coágulos após a inoculação da bactéria no plasma.
4) Teste de DNAse: mais incomum. Inoculação de colônias em meio contendo DNA. Após o crescimento é realizado uma leitura por meio do azul de toluidina ou do hipoclorito.
5) Tete de sensibilidade: também não é comum.
Ensaio de disco de fusão, usando antimicrobianos ja conhecidos.
90% dos stafilococcus aureus produzem a enzima beta-lactamase, sendo resistêntes a penincilina G.
65% das espécies de aureus e de 75% de epidermites possuem resistência a oxacilina e meticilina.

Question 39

Ensaio de sensibilidade para diferenciar os estafilococos coagulase negativos:

Answer 39

Utiliza-se o antimicrobiano novobiocina:

• Saprofíticos: resistêntes a novobiocina
• Epidermidis: são sensíveis

Question 40

Hemocultura automatizada:

Answer 40

Teste baseado no crescimento das bactérias (assim como na hemocultura)
Possível detectar e quantificar a produção e o consumo de dióxido de carbono em medidas colorimétricas e de fluorescência, sendo possível avaliar a presença de microorganismos na amostra clínica.
Redução dos possíveis falsos positivos

Question 41

Tipos de infecção por Staphylococcus aureus:

Answer 41

1) Superficial: ex: infecções cutâneas
2) Profunda: invasão na corrente sanguíneo. podendo levar a infecção de múltiplos focos e ou choque séptico ou tóxico. Ex: endocardite. Pode ocorrer mesmo sem apresentar, anteriormente, uma infecção superficial.

Question 42

Síndrome da pele escaldada:

1) Sinônimos
2) Toxinas responsáveis
3) Faixa etária mais afetada
4) Apresentação clínica

Answer 42

1) Doença de Ritter;
2) Toxinas epidermolíticas
3) Afeta mais recém-nascidos e crianças até 5 anos de idade.
4) Formação de eritema e descamação generalizado da camada superficial da da epiderme.
Sinal de nikolsky - pele flácida e deslizante quando é esfregada levemente.
Doença de rápida resolução.
4) Mortalidade de 5% em crianças e 60% em indivíduos
imunocomprometidos.
5) Desidratação, choque, hipotermia, infecções secundárias, sepse e morte.
6) Essencialmente clínico
7) Tratamento precoce com antibiótico
8) Empetilho bolhoso: formação de bolhas superficiais na pele

Question 43

Síndrome da pele escaldada:

1) Mortalidade
2) Complicações
3) Diagnóstico
4) Trtamento
5) Forma localizada

Answer 43

1) Mortalidade de 5% em crianças e 60% em indivíduos
imunocomprometidos.
2) Desidratação, choque, hipotermia, infecções secundárias, sepse e morte.
3) Essencialmente clínico
4) Tratamento precoce com antibiótico
5) Empetilho bolhoso: formação de bolhas superficiais na pele.
Diferentemente da síndrome escaldada propriamente dita, as amostras de empetilho bolhoso apresentam-se positivas para stafilococcus aureus.

Question 44

Infecções cutâneas geradas por Staphylococcus aureus:

1) Características
2) Exemplos

Answer 44

1) Em geral são piogênicas e localizadas.
2) - Impetigo;
- Terçol;
- Foliculite;
- Furúnculo: nódulos grandes, avermelhados, com presença de núcleo necróticos. Pode ser uma extensão da foliculite.
- Carbúnculo: aglutinação de furúnculos que se estendem para o tecido cutâneo mais profundo, tendo em alguns quadros, calafrio e febre.

Question 45

Infecção de ferida gerada por Staphylococcus aureus:

1) Quando pode ocorrer?
2) O que gera
3) Qual a relevância dessa infecção?

Answer 45

1) No pós operatório ou após traumatismo
2) Microrganismos presentes na feridas podem gerar celulites ou erisipelas.
3) Geralmente não são capazes de se estabelecer em imunocompetentes, a menos que ocorra um trauma por corpo estranho contaminado.

Question 46

Infecções disseminadas causadas por Staphylococcus aureus:

1) Características
2) Exemplos

Answer 46

1) Doenças mais graves
2) - Bacteremia;
- Endocardites (também causada por epidemidis)
- Osteomielites;
- Pneumonia;
- Artrite: causa primária de artrite séptica em jovens e adultos que estejam recebendo injeção intra-articular.

Question 47

Porque os stapylococcus epidermides estão bastante relacionados com infecções por cateteres?

Answer 47

Devido a sua capacidade de formação de biofilmes: produção de camadas mucoides de polissacarídeos que aderem aos cateteres, levando a sobreposição de bactérias e redução da ação dos antimicrobianos.

Question 48

O staphylococcus saprophyticus está mais relacionado a qual tipo de infecção?

Answer 48

Devido a sua capacidade de adesão a células do epitélio do trato urinário, se relacionam muito com infecções urinárias - depois da eschericia coli é o mais frequentes. Normalmente são bem numerosos gerando disúria.
Também pode causar algumas bacteremias

Question 49

Resistência a antimicrobianos:

Answer 49

Stapylococcus aureus está na lista de bactérias que apresentam resistência alta a certos antimicrobianos (ESKAPE)

Question 50

Mecanismos de resistência do Stapylococcus aureus:

Answer 50

• A maioria produz Beta-lactamase, sendo resistêntes a penincilina

Question 51

Antibióticos de resistência do Stapylococcus aureus:

Answer 51

Penicilina
Penicilina Sintética
Medicilina (linagens MRSA): relação com o gen MECA que codifica a proteína PBP - ligante da penincilina. Linhagem mais disseminada
Vancomicina: linhagens resistêntes intermediárica .(VISA) e linhagens resistêntes total (VRSA): espessamento da parede bacteriana, dificultando a ação dos antimicrobianos