Aspects Fondamentaux Des Sérothérapie Flashcards
Quel sont les 2 but de sérothérapie
✓Prévention
✓Curation
Quel est l intérêt de la sérothérapie
✓Assurer une immunité passive transitoire lorsque le risque infectieux est immédiat et ne permet pas d’attendre le delai nécessaire pour obtenir une immunité active par le vaccin
✓Si maladie déclaré –> sérothérapie
✓Si il y a un risque imminent d infection–> séroprévention ou séroprophylaxie
Décrire la fonction effectrice des Ac porté par Fab
✓Neutralisation de l infection sans intervention du st Immunitaire inné ou adaptatif {virus,toxine}
Quel est la conséquence de l absence de fragment Fc sur l’Ac
Il n est pas nécessaire pour la neutralisation de l infection mais il ya une diminution de t1/2 du fragment F(ab’)2
Quels sont les fonctions principales de neutralisation directe du pathogènes des Ac porté par Fab
✓Neutralisation de toxines
✓Inhibition de l’adhésion bactérienne
✓Blocage de l infectiosité des virus
Ac neutralisant
✓Fragment F(ab’)2
✓Il peut protéger mais son activité est moindre que de la molécule entière
✓Ac neutralisant in vitro protège mieux que l’Ac non neutralisant –>Capacité de neutralisation est un bon indicateur de protection
Ac non neutralisant
✓cad ne se lie pas a l’Ag
✓Peut protéger mais son action est dépendante des fonctions effectrice de Fragment Fc
Quel est le mécanisme de neutralisation de toxine
✓Par Blocage de l accès à sa cible
✓Le fragment Fc se fixe sur le FcR stimule les phagocytes–> phagocytose
Décrire le mécanisme d’inhibition des virus
2 options de liaison de l’Ac:
✓1er modèle (peu probable)
•Fixation d’un seul Ac a un site du virus
✓2eme modèle
•Plusieurs Ac se fixent sur plusieurs sites sur le virus–>encombrement stérique
•Inhibition de l attachement a un récepteur cellulaire
•Inhibition des évènements post attachement et l entrée de virus
Quels sont les facteurs qui influencent la neutralisation des virus par l’Ac
✓leur fonction
✓Taille de virion et sa structure
✓Les surfaces occupés par l Ag
✓Nombre d’Ag
✓Distance qui séparent les Ag
✓Structure d’Ac
Quels sont les mécanismes d’échappement de virus
✓Mutation au niveau de l’enveloppe
✓Changement de conformation au niveau de l’enveloppe
Quel est la corrélation entre taux d’Ac neutralisant et la protection
✓Bonne corrélation entre k activités neutralisante in vitro et l’activité protectrice in vivo
✓Sauf virus Ebola
Fonction effectrice des Ac porté par les Ac portées par Fc
(neutralisation indirecte de pathogène)
✓Activation de cascade de compléments
–> lyse de pathogène ou de cellule infecté par cytotoxicité dépendante du complément (CDC)
✓ formation de complexes immun qui activent les CPA via Fc et les récepteurs de compléments (CR1,CR3,CR4)
–>phagocytose de pathogène et présentation de l’Ag au st immunitaire adaptatif par le CMH
✓interaction avec les récepteurs au fragment Fc(RFc) des IgG en particulier les Nk avec RFcgamma3
–>NK activés liberation de granzyme et perforine –> mort cellulaire par Apoptose
Cytotoxicité cellulaire dépendante des Ac(ADCC)
Production des Ac polyclonaux d’origine animale
Prv de serum d un animal immunisé par l’Ag
Production des Ac polyclonaux d’origine humaine
✓Prv de serum d’humain immunisé(vacciné)
✓Serum de donneur sain présente un titre élevé d’Ac spécifique de la pathogène
Quels sont les étapes se production des Ac polyclonaux
✓Purification des Ig (précipitations par des sels)
✓Purification par chromatographie d’échange d’ion
✓utilisation de fragments d’Ig
Décrire Purification par chromatographie d’échange d’ion au cour de production des Ig polyclonaux
•pHi (Ig)>pHi (autre protéines serique)
•A pH =8
•Les Ig sont chargés (+)ou (0)
•Les autre protéines sont chargés (-)
•Donc ils sont retenue par la colonne chargée (+)
•Ig passe librement
Decrire l utilisation de fragments d’Ig au cour de production des Ac polyclonaux
Par clivage enzymatique
•Tt pepsine –> F(ab’)2: 2 valences
•Tt papaine–> Fab : une seule valence
•Tt mercaptoethylamine-HCl–> reduction des pont disulfure
Production des Ac monoclonaux
✓Injection de l’Ag a une sourie
✓Extraction des cellules splénique (cellule immunitaire)
✓fusion avec des cellules myelomateuse(cellule cancéreuse immortel)
✓Otention d hybridome
✓Culture et recherche d’Ac
✓Culture de la cellule productrice de l’Ac spécifique a l ‘Ag
Comment produire des Ac chimérique=humanisé
Fabriquée par greffage de :
✓Fraction variable de souris
+
✓Fraction constante humaines
✓Production par:
•fermentation microbienne (levure)
•Utilisation de souris transgenique
Définir nanobodies ou VHH
✓Ce sont des Ac a chaîne lourde dépourvu de chaine légère
✓Se lie a l’Ag par un seul domaine variable VHH ou nanobodies
Quel est l intérêt de nanobodies ouVHH
✓Ils sont de petits tailles cible les zones qui ne sont pas accessibles par les Ac monoclonaux standard
✓Monomerique
✓Se lie avec leur cible par une affinité nM –> forte affinité
✓Stable et facile a manipuler
✓Se lie au epitopes qui sont moins immunogène tel que les sites actifs des enzymes
✓Production plus facile et moins chere que les Ac monoclonaux Standard
quels sont les avantages des Ac polyclonaux
Différents spécificité et différents isotypes assure une diversité des propriétés biologiques
Quels sont les inconvénients des Ac polyclonaux
✓Injection de grande quantité de sérum pour avoir l effet désiré
✓D’origine animale ou humaine risque infectieux
Quels sont les avantages des Ac monoclonaux
Grande activité spécifique donc moindre dose et moindre coût
Quels sont les inconvénients des Ac monoclonaux
✓Production in vitro théoriquement risque infectieux
✓Spécificités et isotypes restreint
Quels sont les avantages des fragments d’Ac
✓Petite taille donc meilleure pénétration de tissus d’accès difficile
✓La production est moins coûteuse et plus facile par ingénierie car il ya possibilité d utiliser des st d expression procaryote(absence de glycosylation)
Quels sont les inconvénients des fragments d’Ac
✓Perte de Fc responsable de la stabilisation et le recyclage a traver RFc
✓degradation rapide avec t1/2 courte
–>Solution Pegylation et conjugaison a l’albumine
✓Pas d action de l ‘Ac a travers Fc(ADCC, activation de compléments)
✓Risque d agglomération d’où risque d’une plus grande immunogenicite
