Aspects Fondamentaux Des Sérothérapie Flashcards

1
Q

Quel sont les 2 but de sérothérapie

A

✓Prévention
✓Curation

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2
Q

Quel est l intérêt de la sérothérapie

A

✓Assurer une immunité passive transitoire lorsque le risque infectieux est immédiat et ne permet pas d’attendre le delai nécessaire pour obtenir une immunité active par le vaccin
✓Si maladie déclaré –> sérothérapie
✓Si il y a un risque imminent d infection–> séroprévention ou séroprophylaxie

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3
Q

Décrire la fonction effectrice des Ac porté par Fab

A

✓Neutralisation de l infection sans intervention du st Immunitaire inné ou adaptatif {virus,toxine}

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4
Q

Quel est la conséquence de l absence de fragment Fc sur l’Ac

A

Il n est pas nécessaire pour la neutralisation de l infection mais il ya une diminution de t1/2 du fragment F(ab’)2

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5
Q

Quels sont les fonctions principales de neutralisation directe du pathogènes des Ac porté par Fab

A

✓Neutralisation de toxines
✓Inhibition de l’adhésion bactérienne
✓Blocage de l infectiosité des virus

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6
Q

Ac neutralisant

A

✓Fragment F(ab’)2
✓Il peut protéger mais son activité est moindre que de la molécule entière
✓Ac neutralisant in vitro protège mieux que l’Ac non neutralisant –>Capacité de neutralisation est un bon indicateur de protection

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7
Q

Ac non neutralisant

A

✓cad ne se lie pas a l’Ag
✓Peut protéger mais son action est dépendante des fonctions effectrice de Fragment Fc

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8
Q

Quel est le mécanisme de neutralisation de toxine

A

✓Par Blocage de l accès à sa cible
✓Le fragment Fc se fixe sur le FcR stimule les phagocytes–> phagocytose

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9
Q

Décrire le mécanisme d’inhibition des virus

A

2 options de liaison de l’Ac:
✓1er modèle (peu probable)
•Fixation d’un seul Ac a un site du virus
✓2eme modèle
•Plusieurs Ac se fixent sur plusieurs sites sur le virus–>encombrement stérique
•Inhibition de l attachement a un récepteur cellulaire
•Inhibition des évènements post attachement et l entrée de virus

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10
Q

Quels sont les facteurs qui influencent la neutralisation des virus par l’Ac

A

✓leur fonction
✓Taille de virion et sa structure
✓Les surfaces occupés par l Ag
✓Nombre d’Ag
✓Distance qui séparent les Ag
✓Structure d’Ac

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11
Q

Quels sont les mécanismes d’échappement de virus

A

✓Mutation au niveau de l’enveloppe
✓Changement de conformation au niveau de l’enveloppe

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12
Q

Quel est la corrélation entre taux d’Ac neutralisant et la protection

A

✓Bonne corrélation entre k activités neutralisante in vitro et l’activité protectrice in vivo
✓Sauf virus Ebola

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13
Q

Fonction effectrice des Ac porté par les Ac portées par Fc
(neutralisation indirecte de pathogène)

A

✓Activation de cascade de compléments
–> lyse de pathogène ou de cellule infecté par cytotoxicité dépendante du complément (CDC)
✓ formation de complexes immun qui activent les CPA via Fc et les récepteurs de compléments (CR1,CR3,CR4)
–>phagocytose de pathogène et présentation de l’Ag au st immunitaire adaptatif par le CMH
✓interaction avec les récepteurs au fragment Fc(RFc) des IgG en particulier les Nk avec RFcgamma3
–>NK activés liberation de granzyme et perforine –> mort cellulaire par Apoptose
Cytotoxicité cellulaire dépendante des Ac(ADCC)

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14
Q

Production des Ac polyclonaux d’origine animale

A

Prv de serum d un animal immunisé par l’Ag

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15
Q

Production des Ac polyclonaux d’origine humaine

A

✓Prv de serum d’humain immunisé(vacciné)
✓Serum de donneur sain présente un titre élevé d’Ac spécifique de la pathogène

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16
Q

Quels sont les étapes se production des Ac polyclonaux

A

✓Purification des Ig (précipitations par des sels)
✓Purification par chromatographie d’échange d’ion
✓utilisation de fragments d’Ig

17
Q

Décrire Purification par chromatographie d’échange d’ion au cour de production des Ig polyclonaux

A

•pHi (Ig)>pHi (autre protéines serique)
•A pH =8
•Les Ig sont chargés (+)ou (0)
•Les autre protéines sont chargés (-)
•Donc ils sont retenue par la colonne chargée (+)
•Ig passe librement

18
Q

Decrire l utilisation de fragments d’Ig au cour de production des Ac polyclonaux

A

Par clivage enzymatique
•Tt pepsine –> F(ab’)2: 2 valences
•Tt papaine–> Fab : une seule valence
•Tt mercaptoethylamine-HCl–> reduction des pont disulfure

19
Q

Production des Ac monoclonaux

A

✓Injection de l’Ag a une sourie
✓Extraction des cellules splénique (cellule immunitaire)
✓fusion avec des cellules myelomateuse(cellule cancéreuse immortel)
✓Otention d hybridome
✓Culture et recherche d’Ac
✓Culture de la cellule productrice de l’Ac spécifique a l ‘Ag

20
Q

Comment produire des Ac chimérique=humanisé

A

Fabriquée par greffage de :
✓Fraction variable de souris
+
✓Fraction constante humaines
✓Production par:
•fermentation microbienne (levure)
•Utilisation de souris transgenique

21
Q

Définir nanobodies ou VHH

A

✓Ce sont des Ac a chaîne lourde dépourvu de chaine légère
✓Se lie a l’Ag par un seul domaine variable VHH ou nanobodies

22
Q

Quel est l intérêt de nanobodies ouVHH

A

✓Ils sont de petits tailles cible les zones qui ne sont pas accessibles par les Ac monoclonaux standard
✓Monomerique
✓Se lie avec leur cible par une affinité nM –> forte affinité
✓Stable et facile a manipuler
✓Se lie au epitopes qui sont moins immunogène tel que les sites actifs des enzymes
✓Production plus facile et moins chere que les Ac monoclonaux Standard

23
Q

quels sont les avantages des Ac polyclonaux

A

Différents spécificité et différents isotypes assure une diversité des propriétés biologiques

24
Q

Quels sont les inconvénients des Ac polyclonaux

A

✓Injection de grande quantité de sérum pour avoir l effet désiré
✓D’origine animale ou humaine risque infectieux

25
Q

Quels sont les avantages des Ac monoclonaux

A

Grande activité spécifique donc moindre dose et moindre coût

26
Q

Quels sont les inconvénients des Ac monoclonaux

A

✓Production in vitro théoriquement risque infectieux
✓Spécificités et isotypes restreint

27
Q

Quels sont les avantages des fragments d’Ac

A

✓Petite taille donc meilleure pénétration de tissus d’accès difficile
✓La production est moins coûteuse et plus facile par ingénierie car il ya possibilité d utiliser des st d expression procaryote(absence de glycosylation)

28
Q

Quels sont les inconvénients des fragments d’Ac

A

✓Perte de Fc responsable de la stabilisation et le recyclage a traver RFc
✓degradation rapide avec t1/2 courte
–>Solution Pegylation et conjugaison a l’albumine
✓Pas d action de l ‘Ac a travers Fc(ADCC, activation de compléments)
✓Risque d agglomération d’où risque d’une plus grande immunogenicite