A Prokarióta Transzkripció És Szabályozás Flashcards

1
Q

Mit tudsz elmondani a genomról és proteómról?

A

Ezek funkcionális egységet alkotnak a prokarióta genom 500-6000 génből áll és a transzkriptóm segítségével (RNS) átíródik proteómra.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Mi a prokarióta génexpressziós szabályozásnak a célja? Mit tudsz elmondani a prokarióta genomról, ez állandó?

A

A környezet folyamatosan változik, ezért az optimális túlélési stratégia érdekében folyamatosan változtatja a génexpressziót és a proteómot. A prokarióta genom és változtatható plazmidok és géntranszferek segítségével.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hogy néz ki a génxpressziónak a részfolyamatai prokariótákban?

A

A prokarióta genomról megtörténik az RNS szintézis, ahonnan az nyerhet valamilyen funkciót, degradálódhat vagy transzláció következhet be, ekkor a fehérjével két dolog történhet vagy funkciót nyer, vagy degradálódik.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Mi a génexpresszió első és meghatározó lépése?

A

Transzkripció

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Mi történik a transzkripció során? Hogyan keletkezik az RNS molekula? Hogyan lehet a transzkripciót felosztani? Mit tudsz elmondani a prokarióta genomjában található génekről? Milyen feladatai vannak az RNS-polimerázoknak?

A

A transzkripció során a DNS templát szálról RNS-polimeráz segítségével RNS képződik trinukleotid foszfátok alkalmazásával. A transzkripció szakaszai az iniciáció (amely 2 alrészre osztható) elongáció és a termináció. A prokarióta genom kevés nem-gén szakaszból áll, de ezek nem mindegyike aktív, ezért az RNS-polimeráznak nem csak a transzkripciós helyet kell megtalálnia, hanem a megfelelő aktív gént kódóló szekvenciát is (amelyre neki szüksége van).

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hogy néz ki az elongáció 1-es szakasz?

A

Az RNS polimeráz 5+1 alegységből épül fel, amely áll egy magi részből, ennek van két béta és két alfa alegysége ezt fogja össze az omega alegység, amely nem csak a konformációt hanem a komplexet is stabilizálja (chaperon funkciót lát el). Ez az 5 alegység önmagában nem áll össze, hanem a szigma alegység segítségével rendeződnek egybe és ülnek rá a DNS kettős hélixre, itt többféle konformációt is felvehetnek, és az RNS-polimeráz így pásztázza végig a DNS-t. Ez a faktor először viszonylag lazán kapcsolódik. A szigma faktor a DNS pásztázása közben megtalálja a promoter régiót, ahol a polimerázt kihorgonyozza, ekkor még a DNS kettős hélix formában van jelen. Ez a gén start hely előtt történik meg.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hogyan kötődik ki az RNS polimeráz?

A

Ez a régió a promoteren belül található, Pribnow-boxnak hívják, és ennek két rövid DNS szekvenciája van, amelyeket 17 bázispár választ el egymástól.
A transzkripció start helye a +1es helyen történik, az RNS polimeráz ide úgy kötődik be, hogy a -35 és a -10 es helyen lévő nukleotidokhoz kapcsolódnak, ezáltal elősegítik a transzkripciót és az enzimek érését. A kettő asszimetrikus bázispárosodást biztosít.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hogy néz ki az iniciálás második alfázisa?

A

Az RNS polimeráz ekkor a kettős hélixet elválasztja egymástól, ez lehetővé teszi az, hogy a Pribnow-box egy AT gazdag szekvencia, és ezután elindul a transzkripció, fontos hogy itt nem szükséges primer, ugyanis az a DNS replikációhoz szükséges. Fontos, hogy ebben a nyitott polimeráz promoter komplexben a kölcsönhatás erősebb a zárthoz képest.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Mondd el az elongáció folyamatát!?

A

Az elején még a szigma faktor itt megtalálható, majd egy idő után ez leválik és a core folytatja tovább a transzkripciót, és más polimeráz molekulák is bekötődhetnek ide így növelik a hatékonyságot.
Az RNS polimeráz egy buborékként megy tovább ahol a nem szintetizálódó szál a komplexen kívül található, tehát DNS-kettősszál elválik egymástól, a köztük lévő torziós feszültséget a topoizomerázok csökkentik, a polimeráz magján áthaladva a templátszál azzal 8 bázispáros hibrideket alkotva hozza létre az RNS-t. Ebben a szakaszban a legerősebb a DNS-szál és polimeráz kapcsolata. Az enzim nem fog ledisszociálni idő előtt.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hogy néz ki a termináció a prokariótákban?

A

Ekkor a polimeráz elérkezik egy palindróm részhez, ugyanis ez GC szekvenciákban gazdag, és a transzkripció után az RNS hairpin struktúrát vehet fel, és ez csökkenti a kapcsolatát a DNS- RNS polimeráznak, így termináció következik be. Az uracil gazdag régió miatt a DNS-RNS komplex is meggyengül. Más géneknél a rho terminációs faktor játszik szerepet, de ott is feltételezhető a hairpin struktúra.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Mikor indulhatnak meg transzkripciós részfolyamatok?

A

Amikor a protein-nukleinsav kapcsolatok konformáció változást hoznak létre proteinekben.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Mi jellemző a prokarióták környezetére? Milyen két új megfigyelés kapcsolódik a baktériumokhoz? Mikor jöhetnek létre új génexpressziós programok?

A

A prokarióták környezete állandóan változik, így a különböző változások hatására különböző génexpressziós géneket igyekeznek kifejezni az optimális érték fenntartására. Megfigyelték, hogy a baktériumok érzékenyek bizonyos baktériumokra és a saját populációjuk denzitására is, ez a quorum sensing, új génexpressziós programok akkor jönnek létre, amikor a szervezet védekező mechanizmusai ellen igyekeznek dolgozni, vagy szaporodáskor is ez történik.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Mi jellemző a prokarióták környezetére? Milyen két új megfigyelés kapcsolódik a baktériumokhoz? Mikor jöhetnek létre új génexpressziós programok?

A

A prokarióták környezete állandóan változik, így a különböző változások hatására különböző génexpressziós géneket igyekeznek kifejezni az optimális érték fenntartására. Megfigyelték, hogy a baktériumok érzékenyek bizonyos baktériumokra és a saját populációjuk denzitására is, ez a quorum sensing, új génexpressziós programok akkor jönnek létre, amikor a szervezet védekező mechanizmusai ellen igyekeznek dolgozni, vagy szaporodáskor is ez történik.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Mik a transzkripciós faktorok? Miket ismernek fel? Minek nevezzük őket?

A

Olyan fehérjék, amelyek a transzkripció iniciációját segítik elő, és közvetlenül kapcsolatba lépnek az RNS-polimerázzal, ezáltal elősegítik a transzkripciót, felismernek 8-20 bp-nyi szekvenciákat, és elősegítik a transzkripciót, nevezhetjük őket cisz-regulátoroknak, vagy akár egyes típusait operátoroknak is.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Mi jellemző a prokarióták transzkripciós faktoraira? Milyen doménjei vannak, és ezek mikért felelnek? Mik szabályozzák őket?

A

A prokarióták transzkripciós faktorai olyan fehérjék amelyek homodimer vagy homotetramer szerkezetűek. DNS-kötő doménjük hélix-alfa-hélix szerkezetű, amely a DNS-nek a nagy árkába illeszkedik be, az oligomerizációs domén a fehérje szerkezetét (dimer vagy tetramer) stabilizálja, a protein interakciós domén a fehérjével RNS-polimerázokkal és a különböző enzimekkel lép kapcsolatba. A transzkripciós faktorokat kicsi szerves molekulák is szabályozhatják a ligand-kötő doméneken keresztül (közvetlenül).

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Milyen interakciók jöhetnek létre a DNS-kettős hélixszel a transzkripciós faktorok által?

A

A transzkripciós faktorok nagy méretű fehérje-oligomerek, amelyek a DNS cukor-foszfát gerincét látják meg, és a DNS szerkezetétől függően kapcsolódnak hozzájuk, amelyet a bázispárok határoznak meg, a nagy árok a DNS-ben, szélessége miatt hozzáférhető a transzkripciós faktorok számára, míg a kis árok a proteinek számára hozzáférhetetlen lesz.

16
Q

Mit tudsz elmondani a DNS-kötő domének szerkezetéről?

A

A DNS-kötő doménekben az egyik alfa-hélix szerkezet közvetlen kapcsolatban van a DNS-sel, ez szekvencia specifikus míg a másik kanyar-hélix-kanyar szerkezet inkább csak stabilizálja a protein kapcsolódását, ezáltal ez nem egy szekvencia specifikus kötődést biztosít, ennek a mintázata eltér adenin-timin és guanin-citozin bázispárok esetén.

17
Q

Nagy árok felől nézve hogy néz ki az interakció guanin-citozin bázispárok esetén?

A

H-híd akceptor, H-híd akceptor, H-híd donor és hidrofób interakció egy hozzáférhető H-atommal

18
Q

Nagy árok felől nézve mit tudsz elmondani az interakcióról adenin-timin bázispárok esetén? Mi jellemzi egy 8bp-os kötőhelyet? Mi az egyik fontos különbség nagy és kis árok között? Mihez járul ez hozzá?

A

Az interakció itt úgy néz ki, hogy H-híd akceptor, H-híd donor, H-híd akceptor és egy hidrofób interakció a metilcsoporton keresztül. A 8 bp-os kötőhely csak egy bizonyos szekvenciájú alfa-hélixet képes bekötni, ezáltal ez egy specifikus szekvencia bekötődést segít elő. A nagy árokban a G-C és a C-G eltérő mintázatokat alakít ki, míg a kicsiben a transzkripciós faktorok azt nem tudják megkülönböztetni. Ez az egyik magyarázata annak, hogy a specifikus transzkripciós faktorok inkább a nagy árokba kötődnek.

19
Q

Hogy néz ki a prokarióták génexpressziója?

A

A prokariótákban található az operon, amely az eukariótákra nem jellemző. Ez egy olyan regulátor, amely egyszerre kapcsolja be és ki a génszabályozást és egy genomról az információ egyszerre íródik le, ezért fontos, hogy ekkor policisztronos gének íródnak át, egyszerre több helyen is megindul a génátírás. Egy magasabb rendű szabályozó molekula a regulon, amely különböző kópiákban lévő genomok génátírását teszi lehetővé, de ez is egyszerre kapcsolja be és ki. Közös szabályozás és egyidejű ki- és bekapcsolás jellemzi őket.

20
Q

Mi szükséges a triptofán aminosav de novo szintéziséhez? Hol találhatók azok a gének, amelyek enzimeket kódolnak?

A

Szükség van egy regulátorra és egy operonra. Az operon tartalmaz a bioszintetizálásáért felelős 5 enzim génjét és ettől 5’ irányba még három rész található, a promoter, amely az RNS-polimeráz bekötődését biztosítja, az operátor, amely szabályozó transzkripciós faktorokat köt meg és a leader és attentive régió, amely a transzkriipció finomszabályozását teszi lehetővé. A regulátor nem része az operonnak, triptofán represszor gén, amely transzkripciós faktorok bekötődését teszi lehetővé.

21
Q

Mit tudsz elmondani a Trp represszorról?

A

Ez dimerként működik, tehát ha kapcsolódik hozzá triptofán aminosav akkor ez a promoter utáni régióhoz, az operátorhoz kapcsolódva bekötődik, gátolja a az RNS-polimerázt, így addig, amíg nem ér el egy kritikus értéket a triptofán aminosav, az folyamatosan termel, majd azután leállítja azt a folyamatot, tehát egy úgynevezett korepresszorként működik. (A triptofán az aporepresszorhoz kötődik.)

22
Q

Miket termel a laktóz operon? Milyen szabályozó régiót tartalmaz ez? Milyen mRNS íródik át?

A

A laktóz operon, olyan proteineket termel, amelyek a laktóz hasznosításához szükségesek. Az operonja tartalmazza a CAP régiót, itt találhatóak a transzkripciós faktor kötőhelyek, promoter és az operátor. A regulátor itt inhibitorként van jelölve, ugyanis az operon előtt található közvetlenül, és ez represszorként tudja azt gátolni. Erről is policisztronos mRNS íródik át.

23
Q

Az operonról milyen 3 molekula íródik át, és ezek miért felelősek?

A

A permeáz az egy transzporter fehérje, amely a laktózt szállítja a környezetből a baktériumba, míg a béta-galaktózidáz a laktózt galaktózra és glükózra bontja, meg egy allolaktózt is létrehoz, amely transzkripció szabályozásért felel. Az transzacetiláz pontos szerepét még nem ismerjük.

24
Q

Mi jellemzi a lac-represszort?

A

Ez tetramer szerkezettel rendelkezik, képes az RNS-polimeráz iniciációját gátolni, úgy hogy az operátor régióba bekötődik allolaktóz hiányában. Ám amint intracellulárisan megjelenik a laktóz a tetramer minden egysége egy allolaktózt fog megkötni, ezáltal konformációváltozás következik be, a represszor nem kötődik, elindul az RNS-polimeráz és génátíródás következik be.

25
Q

Mi jellemzi az E.coli genomban lévő szekvenciát?

A

Az E.coli genomban található operátor 1-hez kapcsolódik a tetramer egyik dimer egysége, míg a másik a tőle távolabb lévő O2 vagy O3 egységhez, ezáltal egy hurkot hoz létre, és megnöveli a represszió hatékonyságát, azonban ha ez a másik két operátor hiányzik a represszió legalább 70%-kal csökkenni fog.

26
Q

Miért fog a represszor gén könnyen inaktiválódni, ha a lac operon inaktív?

A

Azért mert ennek az inaktivitása sosem tökéletes, mindig van 4-5 permeáz amely bejuttatja a laktózt a baktériumba, és jelen vannak még kis mennyiségben a béta-galaktozidázok is (sejtenként).

27
Q

Mi kell a lac operon maximális aktiválásához?

A

A lac operon maximális aktiválásához nem elég az operon repressziója, még szükség van a CAP-re (catebolite activator protein), amely mindig jelen van a sejtben az 5’ irányban, és akkor aktív, ha cAMP-t köt meg, amelyet az adenilát cikláz termel a mindig jelenlévő ATP-ből, ez elősegíti az operátorhoz bekötődő RNS-polimeráz iniciációs aktivitását.

28
Q

Mikor aktív az adenilát cikláz enzim?

A

Ez csak akkor aktív, ha a sejt környezetében nincs glükóz, ugyanis ez csökkenti a cAMP termelését, és ekkor a baktérium kisebb hartékonysággal bontja a laktóz molekulákat, a glükóz alternatív katabolitként lesz jelen benne, ezért csökkenti a lac operon aktivitását. Ekkor a katabolit represszióra támaszkodó szabályozási mechanizmusok teszik lehetővé a baktérium számára az optimális energiaforrás szerzését.