5.5.3 Flashcards
Identification mycobacterium
Technique de prévention
Éviter aérosole
Travailler sous hotte biologique IIA ou IIB
Utiliser lumière UV entre séance de travaille
NC-3
- agent indigène ou exogène qui pèsente un potentiel de transmission par aérosols et agent causant maladie grave ou potentiellement mortel
Identification mycobacterium
Consideration en laboratoire
Sécurité personnel
- infection 3x plus élevée
- dois porter EPI
- dois être entérinée
- plan d’action
- test mantoux régulier
-N95 si contacte avec patient
Ventilation
- pression négatif
-6-12 changement d’air par H
Identification mycobacterium
Désinfection
Peau et main
- alcool 70%( contacte de 5 min)
- savon base de phénol pour rincés avec alcool 70%
Surface de travail
- savon phénol
- eau javel 1:200 à 1:1000
-formaldéhyde 3-8%(30 min)
-glutaraldehyde 2% (30 min)
Phénol 5%(10-30 min)
Identification mycobacterium
Spécimen acceptable
Spécimen respiratoire
- expectoration
- aspiration transtracheale, bronchite, broncoalveolaire
- écouvillon laryngale et nasopharynge
Liquide corporel
- pleural, péricardique, articulaire, gastric,LCR, selle, urine, pus
Tissu corporel
- sang, moelle osseuse, morceau d’organe, nodule lymphatique,os, peau
Spécimen acceptable
Expectoration
De bonne heure le matin 3 jours consécutifs
5-10 ml
Haut taux de contamination
Lavage bronchique préférable
Spécimen acceptable
Aspiration gastrique
Récupère avaler pendant la nuit
3 échantillon sur 3 jours
Exposition prolongée à l’acide gastrique tue mycobacterie
Traitement échantillon dois être faite rapidement ou neutraliser avec carbonate de sodium
Spécimen acceptable
Urine
Première urine matin 3 jours consécutif
Min 15 ml
Réfrigérée et traiter rapidement
Collection 12-24h non acceptable
Spécimen acceptable
Selle
Identifier patient avec SIDA qui risque de développer maladie mycobacterien disséminée
Si Spécimen peut pas être traité rapidement congeler à -20°C
Spécimen acceptable
Sang
Mycobacteremie souvent dans gens VIH+
Spécimen acceptable
Tissus et autre liquide corporel
2 ml LCR
3-5 ml exsudat et liquide péricardique et synovial
10-15 ml liquide abdominaux et thoracique
Tissu ou liquide placer dans 10-15 ml de sérum physiologique stérile afin d’éviter déshydratation
Spécimen inacceptable
Volume trop petit
Contamination salive
Écouvillon assécher (préférable de ne pas accepter écouvillon)
Contenant qui coule ou briser
Trop de temps entre collecte et traitement
Traitement des spécimen
Décontamination de tout spécimen contenant flore bactérienne mixte ou du mucus amant l’ensemencement
- effectuer pour garantir une récupération optimal des mycobacterie
- liquéfier l’échantillon par digestion de la matière protéique
Agent mucolytique et décontaminant
N-Acetyl-L-cysteine- hydroxyde de sodium
- agent mucolytique et liquéfient
- utiliser couramment
Le NaOH 2-4% décontamine et liquifie
Acide oxalique
- décontamine spécimen venant de patient avec fibrose kystique
- réduit contamination pseudomonas aeruginosa
Spécimen non décontaminer
Tissu ou liquide corporel recueilli de manière aseptique
Si un échantillon semble contaminer (couleur, turbine, odeur)
- coloration de gram est effectué pour détecter bactérie autre que acido résistant
LCR dois être manipulé de manière aseptique
- vortex du spécimen, la sédimentation utilisé pour frotti
- si quantité insuffisante, le spécimen dois être utilisé pour frottis et culture
Niveau de confinement
Laboratoire doivent décider qu’est-ce qui font pour l’identification
- collecte des spécimen seulement
- collecte spécimen, identifié, parfois faire test de sensibilité pour M. tuberculosis
- collecte, microscopie, isoler, identifier, faire test sensibilité sur toute les mycobacterie
Identification primaire
Faire coloration pour bactérie acido- alcoolique résistant
Décrire caractéristique morphologie des colonie pour sélection test approprier
- morphologie
- vitesse de croissance
- température optimal
- photo réactivité
Vitesse de croissance
Dépend de l’espèce mais habituellement influencer par milieux, température incubation, montant d’inoculum initial
Mycobacterie classé dans 2 catégorie:
- croissance rapide: croissance visible <7 jours
- croissance lente croissance colonie >7 jours
. Température incubation
Extrêmement étroite surtout inoculation initial
« Aérobie stricte»
Photo réactivité
Non chromogène
- non photo réactive à la lumière ou obscurité
Phoyochromogene
- non pigmentée jusqu’à ajout de lumière
- photo réactif
- pigment carotène lors exposé lumière jaune pale- orange
Scotochromogene
- produit du pigment à la lumière ou obscurité
- produit couleur jaune pale- orangé
Détection direct- coloration
Avantage/désavantage
Avantage: rapide et simple
Désavantage: contamination avec mycobacterie saprophyte dans l’eau
Frottis ZN positif- tuberculose
Patient 5-10 fois plus contagieux que patient neg
Sans traitement ou spécimen inadéquate patient peut infecter 10-15 patient par année
Morphologie colonie
2 type
Lisse
Rugueux et friable
-M. tuberculosis: colonie rugueuse avec texture
-M.avium- intracellulaire complex: Blanche brillante et souvent accompagnée de colonie translucide plus petite
Milieux de culture
Milieux loeffler donne excellent morphologie
Test biochimique
Catalase positif température Corps
Catalase négatif à 68°C
Produit niacine
-M. tuberculosis n’a pas enzyme convertie niacine en niacine ribonucleotide
- beaucoup niacine s’accumule
- jaune =positif
Réduit nitrate
Urease positif
Caractéristique M. tuberculosis
Babille acido- alcoolique résistent
Croissance très lente
Croissance 35°C
Morpho chou fleur
Aucune pigmentation
Niacine positif
Catalase positif 35° C mais négatif à 68°C
Nitrate: positif
