Ενότητα 5: Χρώσεις μικροοργανισμών σε συστήματα ενεργού ιλύος Flashcards
Τι είναι οι χρωστικές;
Οι χρωστικές είναι άλατα, των οποίων το ένα από τα δύο ιόντα είναι χρωμοφόρο.
Πώς χαρακτηρίζεται η χρωστική όταν το χρωμοφόρο είναι θετικά φορτισμένο ιόν και όταν είναι αρνητικά;
Εάν το χρωμοφόρο είναι ένα θετικά φορτισμένο ιόν, η χρωστική χαρακτηρίζεται ως βασική (π.χ μπλε του μεθυλενίου, σαφρανίνη κ.α.), ενώ
αν το χρωμοφόρο είναι ένα αρνητικά φορτισμένο ιόν, η χρωστική είναι όξινη (π.χ. Congo red).
Ποια χρώση καλείται άμεση;
Οι βασικές χρωστικές, λόγω του αρνητικού φορτίου των κυττάρων, ενώνονται με κύτταρα και τα χρωματίζουν, και η χρώση αυτή καλείται άμεση χρώση.
Ποια χρώση καλείται έμμεση;
Στην περίπτωση των όξινων χρωστικών, το χρωμοφόρο δεν
ενώνεται με τα κύτταρα, με αποτέλεσμα τα κύτταρα να παραμένουν άχρωμα και το περιβάλλον αυτών χρωματίζεται.
Έτσι, δημιουργείται αντίθεση μεταξύ κυττάρων και περιβάλλοντος, οπότε διευκολύνεται η μικροσκόπηση.
Η χρώση αυτή είναι γνωστή ως έμμεση χρώση.
Σε τι διακρίνεται η χρώση;
Η χρώση επίσης διακρίνεται σε απλή και διαφορική.
Τι χρησιμοποιείται στην απλή χρώση;
Στην απλή χρώση χρησιμοποιείται μία μόνο χρωστική (συνήθως βασική χρωστική), διευκολύνοντας την μικροσκοπική παρατήρηση, λόγω μεγαλύτερης αντίθεσης του ειδώλου.
Που χρησιμοποιείται η διαφορική χρώση κυττάρων και πού στηρίζεται;
Η διαφορική χρώση κυττάρων χρησιμοποιείται για την ταξινομική διάκριση ομάδων μικροοργανισμών, π.χ. χρώση Gram.
Η διαφορική χρώση στηρίζεται στην εφαρμογή διαφορετικών χρωστικών, καθώς και στη διαφορετική σύσταση και φύση κυτταρικών δομών μεταξύ διαφορετικών ομάδων μικροοργανισμών.
Για τι χρησιμοποιείται η χρώση Gram και πού στηρίζεται η διάκριση;
Χρησιμοποιείται για τη διάκριση των βακτηρίων σε δύο κατηγορίες, στα Gram-θετικά και τα Gram-αρνητικά βακτήρια.
Η διάκριση στηρίζεται στη διαφορετική κυτταρική δομή των μικροοργανισμών αυτών.
Τι έχουν τα Gram-θετικά;
Στα Gram-θετικά έχουμε ένα παχύ εξωτερικό στρώμα πεπτιδογλυκάνης και
κυτταροπλασματική μεμβράνη.
Τι έχουν τα Gram-αρνητικά;
Στα Gram-αρνητικά έχουμε μία εξωτερική μεμβράνη ακολουθούμενη από ένα λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης και την κυτταροπλασματική μεμβράνη.
Τι χρησιμοποιούνται κατά την χρώση Gram;
Κατά την χρώση Gram χρησιμοποιούνται μία αρχική βασική χρωστική, ένα στερεωτικό μέσο, ένας παράγοντας αποχρωματισμού (οργανικός διαλύτης) και μία δεύτερη βασική χρωστική γνωστή ως χρωστική αντίθεσης.
Ποια είναι η διαδικασία της χρώσης Gram;
Αρχικά, τόσο τα Gram-θετικά όσο και τα Gram-αρνητικά βακτήρια χρωματίζονται μπλε με την εφαρμογή του κρυσταλλικού ιώδους, αλλά κατά την έκπλυση με αλκοόλη ή ακετόνη (καθοριστικό στάδιο της διαδικασίας), η εξωτερική μεμβράνη των Gram-αρνητικών που είχε χρωματιστεί μπλε απομακρύνεται και τα κύτταρα αποχρωματίζονται, ενώ το εξωτερικό στρώμα πεπτιδογλυκάνης των Gram-θετικών συγκρατεί το μπλε χρώμα.
Κατά την χρώση με τη δεύτερη χρωστική (σαφρανίνη), τα Gram-θετικά παραμένουν μπλε, ενώ τα αποχρωματισμένα από τον οργανικό διαλύτη Gram-αρνητικά κύτταρα χρωματίζονται κόκκινα.
Πού χρησιμοποιείται η χρώση Neisser;
Η χρώση αυτή χρησιμοποιείται για την εύρεση αποθηκευτικών χώρων
πολυφωσφορικού σε κύτταρα, και εφαρμόζεται στην ταυτοποίηση νηματοειδών μικροοργανισμών στην ενεργό ιλύ.
Επίσης, χρησιμοποιείται για την παρατήρηση μικροοργανισμών που προκαλούν εκτεταμένη βιολογική απομάκρυνση φωσφορικού, γνωστών ως Polyphosphate Accumulating Organisms (PAOs).
Χρώση με μπλε του μεθυλενίου
Πού χρησιμοποιείται;
Τι επιβεβαιώνεται με την χρήση της;
Η χρώση αυτή χρησιμοποιείται για τη διάκριση ζωντανών και νεκρών κυττάρων.
Επίσης, επιτρέπει την επιβεβαίωση της παρουσίας αποθηκευτικών χώρων πολυφωσφορικού στα κύτταρα, σε συστήματα εκτεταμένης βιολογικής αφαίρεσης φωσφόρου.
