02 Hämatologische Methoden

Question 1

Definition Mikrohämatokrit (PCV)

Answer 1

Volumen RBC / Gesamt Volumen Vollblut (in % oder L/L)
(in Blutröhrchen roter Teil : alles)

Question 2

von was ist die Zentrifugalkraft abhängig?

Answer 2

• radius
• rpm (umdrehungen pro min)
• erdbeschleunigung

Question 3

Klinische Bedeutung wenn PCV
- erhöht?
- erniedrigt?

Answer 3

• Polyzythämie = Erythrozytose (absolut / relativ)
• Anämie oder Blutverdünnung

Question 4

was ist der Buffy Coat?

Answer 4

WBC und Plättchen (<1%)

Question 5

für was braucht man einen Buffy Coat Ausstrich?

Answer 5

Nachweis von Parasiten und neoplastischen Zellen

Question 6

welche Farbe hat das Plasma bei
- Hd, Ktz, Schw?
- Pfd?
- Wdk?

Answer 6

• farblos
• gelblich (mehr Bilirubin)
• gelblich (wegen Carotenoide im Futter

Question 7

was bedeutet es wenn das Plasma bei Kt gelb ist?

Answer 7

Hyperbilirubinämie (auch Ikterus)

Question 8

was bedeutet es wenn das Plasma weiss ist?

Answer 8

Lipämie wegen erhöhten Triglyceriden in Lipoproteinen (mehr Chylomikrone, VLDL)

Question 9

was bedeutet es wenn das Plasma rosa ist?

Answer 9

Hämolyse
(durch in vitro oder in vivo möglich)

Question 10

von was ist die Lichtbrechung abhängig?

Answer 10

von der Konzentration gelöster Teilchen —> Totalprotein durch Refraktometrie messbar

Question 11

was beeinflusst die Refraktometrie von Totalprotein?

Answer 11

• Lipämie (falsch erhöhtes TP)
• Hämolyse (Skala nicht lesbar)
• andere Teilchen (Hetastarch, Gelatine)

(Glukose, Harnstoff, Natrium, Chlorid, Bilirubin nur wenn sie STARK abnormal sind)

Question 12

für was spricht
1. erniedrigtes HKT und TP?
2. erniedrigtes HKT und normales TP?
3. erhöhtes TP?

Answer 12

1. Blutverlust
2. andere Ursachen für eine Anämie
3. erhöhte Globuline und/oder Fibrinogen

Question 13

welche Methoden gibt es um Blutzellzahlen zu bestimmen?

Answer 13

1. Manuelle Zählung (mit Hämozytometer & Mikroskop)
2. Elektronische Zählgeräte (mit Impedanz, Laser Technologie)

Question 14

wann verwendet man die Manuelle Zellzählung mit Hämozytometer und Mikroskop?

Answer 14

• WBC bei Vögeln, Reptilien, Amphibien (haben kernhaltige Erys)
• WBC und RBC in Liquor cerebrospinalis (extrem tiefe Zellzahl)

Question 15

wie funktioniert die Impedanz Methode?

Answer 15

misst den Widerstand (Zellen sind schlechte Stromleiter) —> Grösse der Abweichung ist abhängig von der Zellgrösse
- alle Zellen gezählt = RBC Zahl, Plättchen Zahl
- Zellen lysiert, Kerne gezählt = WBC Zahl + Differenzierung nach Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten nach Grösse (Normoblasten aber mitgezählt!!!)

Question 16

was sind drei Probleme der Impedanz Methode?

Answer 16

• nur dreiteilige Differenzierung (Mono, Granulo, Lympho)
• Koinzidenz (zwei Zellen gleichzeitig, va bei erhöhten WBC)
• Nichterkennung (werden nicht erkannt wenn Zellgrösse ausserhalb Grenzen liegt

Question 17

wie funktioniert die Durchflusszytometrie?

Answer 17

Zellen fliessen in Mikrotröpfhen individuell durch fokusierte LASER Licht - Streulicht wird gemessen, dieses ist charakteristisch für jeden Zelltyp, werden dann im Zytogramm dargestellt
- Vorwärtsstreuung
- Seitwärtsstreuung

Question 18

von was hängt die
- Vorwärtsstreuung ab?
- Seitwärtsstreuung ab?

Answer 18

• von der Grösse einer Zelle (kleine Zellen haben kleineres Signal)
• vom Inhalt der Zelle (WBC mit vielen Lysosomen = grosses Signal)

Question 19

• wie können die Leukozyten bei Durchflusszytometrie differenziert werden?
• wie die Retikulozyten von Erys?

Answer 19

• mit Färbungen von Enzymen oder Fluoreszensfärbung von Nukleinsäure
• mit RNA Färbung (reife Erys haben keine mehr)

Question 20

welche Färbung kann man nach Blutausstrichen anwenden und wie funktioniert sie?

Answer 20

Romanowsky-Typ Färbungen
1. Fixation in Methylalkohol
2. Säure Farbstoff - bindet Basen (zB Eosyn Y / B)
3. Basischer Farbstoff - bindet Säuren (zB Azure B / Methylenblau)

Question 21

was findet man auf einem Blutausstrich
- am Rand?
- in der Monoschicht?

Answer 21

• grosse Bestandteile (Plättchen Aggregate, Mikrofilarien, sehr grosse oder neoplastische Zellen)
• Differenzierung & Zellmorphologie mgl

Question 22

was ist bei Plättchenaggregaten zu beachten?

Answer 22

Aggregation findet bei der Blutentnahme statt
= sind schon im EDTA Röhrchen
= elektronische Plättchenzahl ist falsch vermindert
= muss im Blutausstrich nachgeprüft werden

Question 23

wo findet man tendenziell grosse Befunde auf dem Blutausstrich?

Answer 23

am Rand, werden dorthin gezogen

Question 24

was bedeutet es wenn kernhaltige RBC (nRBC) im Blut vorkommen?

Answer 24

(werden zu WBC gezählt -> manuell anzahl normoblasten pro 100 leukozyten)

• Normoblastose / Normoblastämie
• deutet auf eine regenerative Anämie hin (seltenbei Pfd)
• zB durch Bleivergiftung, gestörte Milzfunktion, Knochenmarksschädigung

Question 25

Wie heissen die Stadien bis zum Erythrozyt?

Answer 25

1. Rubriblast 2. Prorubrizyt 3. Rubrizyt 4. Metarubrizyt 5. Retukulozyt 6. Erythrozyt

Question 26

was ist die Funktion von - Häm? - Globin?

Answer 26

(reife Erys bestehen zu 1/3 aus Hb, je 4 Häm & Globin) - enthält Fe2+ = schützt vor Oxidation durch Methämoglobin-Reduktase - schützt vor Oxidation durch Glutathione-Reduktase

Question 27

welche Formen von Hämoglobin gibt es? (5)

Answer 27

- Oxyhämoglobin (HbO2) - Desoxyhämoglobin (H+Hb) - Carboxyhämoglobin (HbCO = Kohlenmonoxid-Vergiftung = kein O2 Transport) - Methämoglobin (Fe2+ in Fe3+ oxidiert = kein O2 Transport) - Cyanmethämoglobin (Met-Hb + Cyanid-Radikal)

Question 28

wie kann Hb gemessen werden?

Answer 28

- photometrisch mit Spektrophotometer (falsch erhöht bei Lipämie) - Lichtstreuung bei Flusszytometrie

Question 29

wie kann Hkt in Hb umgewandelt werden und was wenn Hb erhöht / erniedrigt?

Answer 29

- Faustregel: Hkt / 3 * 10 = Hb - erhöht = Erythrozytose (absolut / relativ) - erniedrigt = Anämie / Verdünnung

Question 30

wie kann man beurteilen ob die Hämoglobinsynthese normal ist?

Answer 30

- normal: Hb = 1/3 Hkt - gestört: Hb < 1/3 Hkt 1/3 Hb Inhalt ist maximal!!! (Hkt * 10 / 3 = maximale Hb Gehalt)

Question 31

was bedeutet MCV?

Answer 31

Mean Corpuscular Volume - durchschnittliches Volumen RBC in fL - **normozytär, mikrozytär, makrozytär** - wird direkt gemessen

Question 32

was bedeutet MCH?

Answer 32

Mean Corpuscular Hemoglobin - durchschnittliches Hb-Gehalt in einer RBC in picogram - Hb / RBC

Question 33

was bedeutet MCHC?

Answer 33

Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration - durchschnittliche Hb-Konzentration pro Liter RBC in g/L - **normochrom, hypochrom** - Hb / Hkt - wenn Hämoglobinsynthese normal: 333g/L

Question 34

wodurch kann MCH und MCHC falsch erhöht sein?

Answer 34

- Lipämie (falsch erhöhtes Hb, stört bei Photometrie) - Hämolyse

Question 35

was ist bei Kameliden zu beachten?

Answer 35

40-45% Hb-Inhalt ist normal und maximal —> gesenkte Hb-Synthese wenn: - Hb < 45%Hkt - MCHC < 450g/L

Question 36

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: normozytär, normochrom

Answer 36

Nicht-regenerative Anämie (= herabgesetzte Erythropoese) - alle Anämien im akuten Stadium - fast alle bei Pfd

Question 37

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: makrozytär, hypochrom

Answer 37

Regenerative Anämie (Blutverlust, Hämolyse)

Question 38

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: makrozytär, normochrom

Answer 38

- Regenerative Anämie - Dyserythropoese (FeLV, Pudel Makrozytose - Erythroleukämie - Cobalt-Mangel Rind

Question 39

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: mikrozytär, hypochrom

Answer 39

Eisenmangel (Kupfermangel)

Question 40

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: mikrozytär, normochrom

Answer 40

- beginnender Eisenmangel, Kupfermangel - Leberinsuffizienz - Anämie bei asiatischen Hd - Dyserythropoese bei Eng. Springer Spaniel

Question 41

auf was für eine Anämie deutet es hin wenn: normozytär, hypochrom

Answer 41

sehr selten

Question 42

was ist eine Anisozytose?

Answer 42

- bei erhöhtem RDW (= red cell distribution width) - ungleiche Größenverteilung bei RBC

Question 43

was ist bei Pfd speziell betreffend Retikulozyten?

Answer 43

sieht man nie im Blut, bleiben im Knochenmark (bei anderen Tieren bei regenerativer Anämie freigesetzt)

Question 44

was bedeutet Polychromasie?

Answer 44

- unterschiedlichen Anfärbbarkeit von Zellen - Hinweis auf Retikulozyten, sind polychromatophil

Question 45

was ist bei Retikulozyten bei Katzen speziell?

Answer 45

aggregierte & punktierte Retikulozyten - viele aggregierte Retis: akute regenerative Anämie - viele punktierte Retis: reg. Anämie vor einigen Wochen - viele von beidem: reg. Anämie, die kontinuierlich seit mehreren Wochen andauert

Question 46

ab wann werden bei Hd & Ktz Anämien als regenerativ bezeichnet?

Answer 46

anhand absoluter Reti Zahl: - Hd: > 90'000/ul - Ktz: aggregierte Reti > 60'000/ul