02 Hämatologische Methoden Flashcards
Definition Mikrohämatokrit (PCV)
Volumen RBC / Gesamt Volumen Vollblut (in % oder L/L)
(in Blutröhrchen roter Teil : alles)
von was ist die Zentrifugalkraft abhängig?
- radius
- rpm (umdrehungen pro min)
- erdbeschleunigung
Klinische Bedeutung wenn PCV
- erhöht?
- erniedrigt?
- Polyzythämie = Erythrozytose (absolut / relativ)
- Anämie oder Blutverdünnung
was ist der Buffy Coat?
WBC und Plättchen (<1%)
für was braucht man einen Buffy Coat Ausstrich?
Nachweis von Parasiten und neoplastischen Zellen
welche Farbe hat das Plasma bei
- Hd, Ktz, Schw?
- Pfd?
- Wdk?
- farblos
- gelblich (mehr Bilirubin)
- gelblich (wegen Carotenoide im Futter
was bedeutet es wenn das Plasma bei Kt gelb ist?
Hyperbilirubinämie (auch Ikterus)
was bedeutet es wenn das Plasma weiss ist?
Lipämie wegen erhöhten Triglyceriden in Lipoproteinen (mehr Chylomikrone, VLDL)
was bedeutet es wenn das Plasma rosa ist?
Hämolyse
(durch in vitro oder in vivo möglich)
von was ist die Lichtbrechung abhängig?
von der Konzentration gelöster Teilchen —> Totalprotein durch Refraktometrie messbar
was beeinflusst die Refraktometrie von Totalprotein?
- Lipämie (falsch erhöhtes TP)
- Hämolyse (Skala nicht lesbar)
- andere Teilchen (Hetastarch, Gelatine)
(Glukose, Harnstoff, Natrium, Chlorid, Bilirubin nur wenn sie STARK abnormal sind)
für was spricht
1. erniedrigtes HKT und TP?
2. erniedrigtes HKT und normales TP?
3. erhöhtes TP?
- Blutverlust
- andere Ursachen für eine Anämie
- erhöhte Globuline und/oder Fibrinogen
welche Methoden gibt es um Blutzellzahlen zu bestimmen?
- Manuelle Zählung (mit Hämozytometer & Mikroskop)
- Elektronische Zählgeräte (mit Impedanz, Laser Technologie)
wann verwendet man die Manuelle Zellzählung mit Hämozytometer und Mikroskop?
- WBC bei Vögeln, Reptilien, Amphibien (haben kernhaltige Erys)
- WBC und RBC in Liquor cerebrospinalis (extrem tiefe Zellzahl)
wie funktioniert die Impedanz Methode?
misst den Widerstand (Zellen sind schlechte Stromleiter) —> Grösse der Abweichung ist abhängig von der Zellgrösse
- alle Zellen gezählt = RBC Zahl, Plättchen Zahl
- Zellen lysiert, Kerne gezählt = WBC Zahl + Differenzierung nach Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten nach Grösse (Normoblasten aber mitgezählt!!!)
was sind drei Probleme der Impedanz Methode?
- nur dreiteilige Differenzierung (Mono, Granulo, Lympho)
- Koinzidenz (zwei Zellen gleichzeitig, va bei erhöhten WBC)
- Nichterkennung (werden nicht erkannt wenn Zellgrösse ausserhalb Grenzen liegt
wie funktioniert die Durchflusszytometrie?
Zellen fliessen in Mikrotröpfhen individuell durch fokusierte LASER Licht - Streulicht wird gemessen, dieses ist charakteristisch für jeden Zelltyp, werden dann im Zytogramm dargestellt
- Vorwärtsstreuung
- Seitwärtsstreuung
von was hängt die
- Vorwärtsstreuung ab?
- Seitwärtsstreuung ab?
- von der Grösse einer Zelle (kleine Zellen haben kleineres Signal)
- vom Inhalt der Zelle (WBC mit vielen Lysosomen = grosses Signal)
- wie können die Leukozyten bei Durchflusszytometrie differenziert werden?
- wie die Retikulozyten von Erys?
- mit Färbungen von Enzymen oder Fluoreszensfärbung von Nukleinsäure
- mit RNA Färbung (reife Erys haben keine mehr)
welche Färbung kann man nach Blutausstrichen anwenden und wie funktioniert sie?
Romanowsky-Typ Färbungen
1. Fixation in Methylalkohol
2. Säure Farbstoff - bindet Basen (zB Eosyn Y / B)
3. Basischer Farbstoff - bindet Säuren (zB Azure B / Methylenblau)
was findet man auf einem Blutausstrich
- am Rand?
- in der Monoschicht?
- grosse Bestandteile (Plättchen Aggregate, Mikrofilarien, sehr grosse oder neoplastische Zellen)
- Differenzierung & Zellmorphologie mgl
was ist bei Plättchenaggregaten zu beachten?
Aggregation findet bei der Blutentnahme statt
= sind schon im EDTA Röhrchen
= elektronische Plättchenzahl ist falsch vermindert
= muss im Blutausstrich nachgeprüft werden
wo findet man tendenziell grosse Befunde auf dem Blutausstrich?
am Rand, werden dorthin gezogen
was bedeutet es wenn kernhaltige RBC (nRBC) im Blut vorkommen?
(werden zu WBC gezählt -> manuell anzahl normoblasten pro 100 leukozyten)
- Normoblastose / Normoblastämie
- deutet auf eine regenerative Anämie hin (seltenbei Pfd)
- zB durch Bleivergiftung, gestörte Milzfunktion, Knochenmarksschädigung
Wie heissen die Stadien bis zum Erythrozyt?
- Rubriblast
- Prorubrizyt
- Rubrizyt
- Metarubrizyt
- Retukulozyt
- Erythrozyt
was ist die Funktion von
- Häm?
- Globin?
(reife Erys bestehen zu 1/3 aus Hb, je 4 Häm & Globin)
- enthält Fe2+ = schützt vor Oxidation durch Methämoglobin-Reduktase
- schützt vor Oxidation durch Glutathione-Reduktase
welche Formen von Hämoglobin gibt es? (5)
- Oxyhämoglobin (HbO2)
- Desoxyhämoglobin (H+Hb)
- Carboxyhämoglobin (HbCO = Kohlenmonoxid-Vergiftung = kein O2 Transport)
- Methämoglobin (Fe2+ in Fe3+ oxidiert = kein O2 Transport)
- Cyanmethämoglobin (Met-Hb + Cyanid-Radikal)
wie kann Hb gemessen werden?
- photometrisch mit Spektrophotometer (falsch erhöht bei Lipämie)
- Lichtstreuung bei Flusszytometrie
wie kann Hkt in Hb umgewandelt werden und was wenn Hb erhöht / erniedrigt?
- Faustregel: Hkt / 3 * 10 = Hb
- erhöht = Erythrozytose (absolut / relativ)
- erniedrigt = Anämie / Verdünnung
wie kann man beurteilen ob die Hämoglobinsynthese normal ist?
- normal: Hb = 1/3 Hkt
- gestört: Hb < 1/3 Hkt
1/3 Hb Inhalt ist maximal!!!
(Hkt * 10 / 3 = maximale Hb Gehalt)
was bedeutet MCV?
Mean Corpuscular Volume
- durchschnittliches Volumen RBC in fL
- normozytär, mikrozytär, makrozytär
- wird direkt gemessen
was bedeutet MCH?
Mean Corpuscular Hemoglobin
- durchschnittliches Hb-Gehalt in einer RBC in picogram
- Hb / RBC
was bedeutet MCHC?
Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration
- durchschnittliche Hb-Konzentration pro Liter RBC in g/L
- normochrom, hypochrom
- Hb / Hkt
- wenn Hämoglobinsynthese normal: 333g/L
wodurch kann MCH und MCHC falsch erhöht sein?
- Lipämie (falsch erhöhtes Hb, stört bei Photometrie)
- Hämolyse
was ist bei Kameliden zu beachten?
40-45% Hb-Inhalt ist normal und maximal
—> gesenkte Hb-Synthese wenn:
- Hb < 45%Hkt
- MCHC < 450g/L
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
normozytär, normochrom
Nicht-regenerative Anämie (= herabgesetzte Erythropoese)
- alle Anämien im akuten Stadium
- fast alle bei Pfd
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
makrozytär, hypochrom
Regenerative Anämie (Blutverlust, Hämolyse)
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
makrozytär, normochrom
- Regenerative Anämie
- Dyserythropoese (FeLV, Pudel Makrozytose
- Erythroleukämie
- Cobalt-Mangel Rind
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
mikrozytär, hypochrom
Eisenmangel
(Kupfermangel)
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
mikrozytär, normochrom
- beginnender Eisenmangel, Kupfermangel
- Leberinsuffizienz
- Anämie bei asiatischen Hd
- Dyserythropoese bei Eng. Springer Spaniel
auf was für eine Anämie deutet es hin wenn:
normozytär, hypochrom
sehr selten
was ist eine Anisozytose?
- bei erhöhtem RDW (= red cell distribution width)
- ungleiche Größenverteilung bei RBC
was ist bei Pfd speziell betreffend Retikulozyten?
sieht man nie im Blut, bleiben im Knochenmark
(bei anderen Tieren bei regenerativer Anämie freigesetzt)
was bedeutet Polychromasie?
- unterschiedlichen Anfärbbarkeit von Zellen
- Hinweis auf Retikulozyten, sind polychromatophil
was ist bei Retikulozyten bei Katzen speziell?
aggregierte & punktierte Retikulozyten
- viele aggregierte Retis: akute regenerative Anämie
- viele punktierte Retis: reg. Anämie vor einigen Wochen
- viele von beidem: reg. Anämie, die kontinuierlich seit mehreren Wochen andauert
ab wann werden bei Hd & Ktz Anämien als regenerativ bezeichnet?
anhand absoluter Reti Zahl:
- Hd: > 90’000/ul
- Ktz: aggregierte Reti > 60’000/ul
