НК Flashcards

1
Q

Какво представлява стекинга между базите в ДНК?

A
  • АБ са хидрофобни и при свързване на комплементарните вериги се притискат с широките си страни - няма водни молекули
  • хидрофобни, Вандерваалсови взаймодействия между базите
  • зависи от вида нуклеотиди - най-изразен при GC-GC, най-слаб при AT-AT
  • скелетите на двете вериги се извиват - стабилизиране
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Денатурация на ДНК зависимост

A
  • при повишена темп първо се отварят А/Т участъци, Г/Ц при по-висока темп
  • репликация и транскрипция започват от райони с А/Т, свързване с белтъци
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Същност и примери за интеркалиране между базите

A
  • съед. с пръстенни мол. - добри цитохим. бои за НК, мутагени и канцерогени
  • пропидиев йодид
  • риванол (етакридинов лактат) - вмъкване в бактериална ДНК
  • actinomycin D
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Видове ДНК спирали

A
  • В - дясна, 2нм диам., най-устойчива термодинамично, голяма и малка бразда за свързване на белтъци с ДНК
  • А - по-широка от В, при обезводняване, свойствена на двойноверижни РНК, смесени ДНК-РНК при транскрипция (ОН-група на РНК)
  • Z - лява, скелет образува зигзаг, в участъци с ЦГЦГ на ДНК, близо до промоторите на гените, разпознаване от белтъци
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Обяснете свръхспирализацията на ДНК

A
  • при прилагане на напрежение на усукване на пръстенна/линейна ДНК с фиксирани краища
  • позитивна - в посока на спирала, по-гъсти обороти
  • негативна - в обратна посока на спирала, по-редки обороти
  • при отваряне на спиралата при репликация, транскрипция
  • премахва се от топоизомерази
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Разлика между сенс и антисенс вериги на ДНК

A
  • сенс (положителна, допълнителна) - верига, която съвпада с РНК транскрипта (Т заменен с У)
  • антисенс (отрицателна, матрична) - комплементарна на РНК транскрипт, сенс верига - матрица
  • амбисенс - НК на едноверижни геноми - сенс и антисенс
  • валидни само за конкретния участък
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

РНК структурни равнища и свойства

A
  • първична - едноверижна
  • вторична - двуверижни бримки, образувани при комплементарно свързване на части след завой на 180
  • третична - доп. нагъване в пространството
  • някои с каталитична (рибозими), репликация (днес геноми на РНК-вируси)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Кои са кодиращите РНК? функция, структура

A
  • мРНК - нямат вторична структура
  • носи информация за кодиран белтък до рибозомите
  • кодираща област - кодони за разпознаване от тРНК, старт и стоп кодон
  • 5’-нетранслиран участък - място за разпознаване на рибозома
  • 3’-нетранслиран участък - зависи трайност на мРНК
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Некодиращи РНК видове

A
  • малки - структурни (рРНК, тРНК, snRNA, snoRNA), регулаторни (miRNA/siRNA, tiRNA, piRNA)
  • големи (над 200 нк) - lincRNA, enhancer RNA, Xist RNA
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Пример за голяма некодираща РНК

A

Xist RNA
- инактивиране и уплътняване на Х хромозома при женски бозайници
- в периферия на интерфазно ядро

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

РНК, участващи в транслацията примери

A
  • мРНК
  • рРНК - структурна, каталитична функция (най-голяма)
  • тРНК - 3 големи, една малка бримка, третична структура като Г - съответствие между АК (към 3’ край) и мРНК (свързване чрез антикодон)
  • SRP - разпознава сигнална последователност на белтъци, маркирани за износ, настанява рибозома върху ЕПР, пп преминава в лумена
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

РНК, участващи в зреенето на РНК примери

A
  • snRNA - процесинг на мРНК, заедно с белтъци образуват комплекс snRNP, участват с сплайсозомата, разпознават места за сплайсинг
  • snoRNA - зреене на рРНК
  • Рибонуклеаза Р - рибозим, който изрязва излишни краища на тРНК при зреене
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

РНК, участващи в репликация
Регулаторни РНК
Паразитни РНК

A
  • теломеразна РНК
  • антисенсРНК (asRNA), микроРНК (miRNA), малки интерфериращи РНК (siRNA), CRISPR
  • геномна вирусна РНК, вироиди
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Какво представлява генното заглушаване?

A
  • селективно блокиране на транслация на определени гени - пълно заглушаване и частично намаляване на активност
  • чрез miRNA, siRNA - комплементарни на нетранслирания 3’-край и участват в комплекс (RISC), заедно с ендо- и екзонуклеази
  • RISC се свързва с мРНК, спира трансация, разгражда я - използва miRNA, siRNA като матрица за разпознаване на комплементрани мРНК, активират ензими за разграждане
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Микро РНК функция, съзряване, принцип на действие

A
  • ендогенни, 18-22 нк
  • регулация на кл. и тъканна диференциация, делене на стволови клетки, апоптоза, липидна обмяна
  • 70% от гените за miRNA в части на генома без гени за протеини, някои се нуждаят от процесинг
  • незрелите са двуверижни, по-голямата част се премахва (passenger strand), остава guide strand, които се свързва с нетранслирани участъци на мРНК (RISC)
  • при пълно комплементарно свързване с мРНК тя се разгражда, при частично свързване се намалява шанса за транслация
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Разлика в действие на miRNA, siRNA

A

1) Двойноверижна РНК се образботва от Dicer и се включва в RISC, там passenger верига се отрязва, guide верига насочва RISС до (само една) таргетна мРНК - пълна комплементарност на siRNA с мРНК - сигнал на мРНК да бъде нарязана
2) pri-miRNA (двойноверижни, с бримка) след транскрипция се обработва от Drosha до pre-miRNA, в цитоплазма се обработва от Dicer до miRNA, включва се в RISC, passenger се изрязва - комплекс се свързва не напълно комплементарно с мРНК - или нарязване или забавяне на транслация

17
Q

Терапевтично риложение на siRNA, miRNA

A
  • вирусни инфекции – свързват се с вирусната РНК или блокират гени за проникване и възпроизводство на вируса в клетката
  • рак – блокират гени за туморогенезата.
  • невродегенеративни болести – блокират гени за продукти, които провокират
    заболяването - снижава нивото на
    молекулите, които увреждат нервните клетки
18
Q

Какво представлява антисенс РНК? същност, видове, особеност, приложение

A
  • едноверижни, комплементарни на кодиращи райони от мРНК, хибридизират с тях и ги блокират
  • регулация на генна експресия - натурални и синтетични
  • asRNA не работи в комплекс с RISC
  • антисенс терапия - лечение с антисенс олигонк - променя се експресия на мРНК (лечение на муск. дистрофии)
19
Q

Какво представлява CRISPR? същност, приложение

A
  • ДНК-последователности в геномите на прокариотите
  • копия на фрагменти от геноми на вируси, някога паразитирали - разпознаване и блокиране на вирусни геноми
  • на тях са основани: инактивиране на мутантни гени при човека, промяна на генотип на насекоми против пренос на паразити, мод. на раст. геном
20
Q

Начин на действие на CRISPR

A

1) При инфектиране на клетка с вирус се изрязва част от генома му и се прибавя в CRISPR
2) Когато в клетката навлезе вирус CRISPR се транскрибира, транскрипт се нарязва на CRISPR-RNA молекули, една от които е комплементарна на вирусна ДНК
3) CRISPR-RNA насочва кл. механизми към разграждане на вирусна ДНК чрез Cas9

21
Q

Приложение на CRISP в медицинска практика

A

1) Създават се къси РНК, комплементарни на проблемен ген (guide-вериги, свързани с Cas9)
2) Малките РНК разпознават комплементарния участък (хибридизация и скъсване на ДНК), Cas9 го изрязва
3) Клетката заменя изрязания участък с нормално копие от хомоложна хромозома чрез ДНК репарация и сайт-специфична рекомбинация