Микроскопски препарати

Question 1

Как се приготвя свеж микроскопски препарат?

Answer 1

На предметно стъкло се капва вода и в нея се суспендира изследвания материал с йозе. Поставя се покривно стъкло. Ако излезе течност се попива с филтърна хартийка.

Question 2

Как се приготвя препарат “висяща капка”?

Answer 2

Върху покривно стъкло се внася капка от изследваната суспензия и се покрива с предметно стъкло с вдлъбнатина в средата (ръба на кладенчето е намазан с вазелин). Препарата рязко се обръща с покривното стъкло нагоре. Капката остава херметично затворена във влажна камера и може да се наблюдава до няколко дни.

Question 3

Как се приготвя препарат “отпечатък”?

Answer 3

От твърда агарова среда с плътен посев се изрязва блокче, което се пренася върху предметно стъкло с МО нагоре. Отгоре се допира предметно стъкло, което след това се пренася върху предметно стъкло с капка вода.

Question 4

С каква цел се приготвя препарат “отпечатък”?

Answer 4

За наблюдаване на въздушния мицел и спороносците на стрептомицети и плесенни гъби.

Question 5

Кои са етапите при изготвяне на траен микроскопски препарат?

Answer 5

1. Натривка
2. Сушене
3. Фиксиране
4. Оцветяване

Question 6

Какви методи за фиксиране на микроскопските препарати се прилагат?

Answer 6

Термично - на пламъка на спиртна лампа 3 пъти по 2сек.

Химично - с етанол, метанол, формалдехид

Question 7

Каква е целта на фиксирането на микроскопските препарати?

Answer 7

Да се убият МО, да се прикрепят трайно към стъклото, да се повиши афинитетът към багрила (денатурация на белтъците - свободни амино- и карбоксилни групи).

Question 8

Какви типове багрене има?

Answer 8

Просто и сложно (диференциращо)

Question 9

Кисели багрила

Answer 9

Хромофорът е анион. Свързват се с цитоплазмените компоненти на клетката. Еозин, кисел фуксин.

Question 10

Основни багрила

Answer 10

Хромофорът е катион. Свързват се с ядрените компоненти. Метиленово синьо, основен фуксин, генциал-виолет, кристал-виолет, сафранин.

Question 11

Кои са етапите на оцветяването по Грам?

Answer 11

1. Третиране с генциал виолет
2. Третиране с луголов р-р
3. Промиване и обезцветяване с алкохол
4. Контрастиращо оцветяване с фуксин или сафранин

Question 12

Грам (+) бактерии

Answer 12

Синьо-виолетово оцветяване - генциан виолетът не се отмива. Дебел пептидогликанов слой над плазмената мембрана. р. Bacillus, Clostridium, Streptomyces, Sarcina, Staphyllococcus, Microbacterium, еукариоти

Question 13

Грам (-) бактерии

Answer 13

Розово-червено оцветяване от второто багрило (сафранинът). Тънък муреинов слой между външна и вътрешна мембрана. p. Enterobacter, Pseudomonas, Proteus, Azotobacter, Nitrobacter, Acetobacter

Question 14

Фактори, влияещи върху оцветяване по Грам

Answer 14

Естествени необработени клетки
96% алкохол за обезцветяване
3 натривки на 1 стъкло
Наблюдава се с имерсия - да се изсуши добре, за да не се образува емулсия
Фиксация на пламък
Млади култури
Богати ХС

Question 15

Методи за оцветяване на капсули

Answer 15

Негативно контрастиране - с туш, безцветна капсула на тъмен фон
Метод на Клет - метиленово синьо - оцветява клетките, фуксин - оцветява капсулите в червено

Question 16

Методи за оцветяване на спори

Answer 16

Метод на Мьолер - с карболфуксин и метиленовосиньо

Метод на Шефер-Фултон - с малахитово зелено и сафранин