Култивиране и изолиране

Question 1

Какви са начините за култивиране на аероби?

Answer 1

Статично (повърхностно) култивиране в епруветка на скосен агар, петри, колби на Ру и Ференбах; или динамично (дълбочинно) на клатачен апарат или във ферментор (с продухване на стерилен въздух)

Question 2

Какви са начините за култивиране на анаероби?

Answer 2

В епруветка с течна среда, престояла на вряща водна баня за изгонване на въздуха, използва се течен парафин и гумени запушалки;
Дълбочинно в твърда среда на петри
Повърхностно в петри или епруветка с прав агар (да се прекрати достъпа на въздух)

Question 3

Какви са методите за отсраняване на въздуха при култивиране на анаероби?

Answer 3

Физични - в ексикатори, анаеростати
Химични - със свещ и редуктор
Биологични - съвместно култивиране на аероб и анаероб

Question 4

Кои МО са “микроаерофили”?

Answer 4

Растат при парциално налягане на кислорода по-ниско от атмосферното.

Question 5

Кои МО са “факултативни аероби/анаероби”?

Answer 5

Които могат да превключват метаболизма си от дишане към ферментации.

Question 6

Кои МО са “аеротолерантни анаероби”?

Answer 6

Които не използват кислород в метаболизма си, но той не пречи за тяхното развитие.

Question 7

Кои са етапите в изолирането на чиста култура?

Answer 7

1. Получаване на обогатена култура
2. Изолиране на чистата култура
3. Проверка на чистотата

Question 8

Какво е “обогатена култура” и как се получава?

Answer 8

Култура, в която преобладават представителите на даден микробен вид или група МО. Проба от изходния материал се култивира при условия, благоприятни за развитието на желаните МО.

Question 9

Кои са основните методи за получаване на чиста култура?

Answer 9

1. Фракционен метод на Пастьор - 10-кратни разреждания и посяване на петри от последните
2. Метод на изтощаващия разсев по Дригалски - плътен посев в петри с шпатула или на щрих с йозе (пренасяне от петри в петри без стерилизация на инструмента)
3. Метод на Кох - с дълбочинна посявка за анаероби

Question 10

Кои са типовете контрол върху чистотата на културата?

Answer 10

1. Визуален контрол
2. Микроскопски
3. Култивационен

Question 11

Кои са непреките методи за количествено определяне на МО?

Answer 11

Метод на Кох (CFU анализ)

Метод на пределните разреждания

Question 12

Как се осъществява метод на пределните разреждания за определяне на броя МО?

Answer 12

Приготвят се 10-кратни разреждания, от които се посяват епруветки с течна ХС (поне 3 епруветки от всяко разреждане, по 1мл инокулум). Инкубират се и се отчитат епруветките с и без растеж. Съставя се числова х-ка и по таблицата на Мак-Креди се определя НВБ МО - дели се на разрежането, от което е взета първата цифра на ЧХ.

Question 13

Как се съставя числова х-ка?

Answer 13

1-вата цифра показва броя на епруветките в последното разреждане, при което във всички посяти епруветки се наблюдава растеж. Следващите 2 цифри са броя на епруветките с растеж в следващите 2 разреждания съответно.

Question 14

Как се пресмята броя на колониите при метода на Кох?

Answer 14

Средният брой, изброени колонии/разреждането*инокулума

Question 15

Какво предимство имат непреките методи за броене пред преките?

Answer 15

Отчитат се само живи клетки

Question 16

Какви недостатъци имат непреките методи за броене пред преките?

Answer 16

Няма ХС, еднакво подходящи за развитието на всички МО, намиращи се в даден субстрат