Vorlesung 2 Flashcards
Was sind Baculoviren?
Baculoviren gehören zur Familie der Baculoviridae und sind doppelsträngige DNA-Viren, die viele Insektenarten infizieren, jedoch nicht in Wirbeltieren vorkommen.
Wie lautet der Name des am besten untersuchten Baculovirus?
Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcNPV).
Welche zwei Viruspopulationen entstehen in infizierten Insektenzellen?
Okkludierte und knospende Virionen.
Was ist ein okkludiertes Virus?
Ein Virus, das durch Polyhedrin während der späteren Infektionsphasen eingeschlossen und geschützt wird.
Beschreibe den Lebenszyklus eines Baculovirus in vivo.
Nach der Aufnahme von Okklusionskörpern (OB) durch Insekten löst der alkalische pH-Wert im Mitteldarm die OBs auf und setzt okkludierte Virionen (ODV) frei, die Zellen infizieren.
Was passiert während der Knospungsphase eines Baculovirus?
Virale DNA wird freigesetzt und repliziert, Nukleokapside wandern zur Plasmamembran und knospen ab, um knospende Virionen (BV) zu erzeugen.
Was ist das BaculoGold™ Expressionssystem?
Ein System, bei dem Baculovirus-DNA und ein Transfervektor mit dem zu klonenden Gen ko-transfiziert werden, um rekombinante Viren zu erzeugen.
Was ist der Hauptvorteil des Baculovirus-Expressionssystems?
Hohe Proteinausbeute bis zu 100 mg Protein pro 10 *9 Zellen und verschiedene posttranslationale Modifikationen.
Nenne einen Nachteil des Baculovirus-Expressionssystems.
Hohe Anforderungen an sterile Arbeitsbedingungen und komplexere Kultivierung im Vergleich zu Bakterien oder Hefe.
Was geschieht während der sehr späten Phase der Baculovirusinfektion?
Expression der Polyhedrin- und p10-Gene, Bildung von okkludierten Viren (ODV) und Okklusionskörpern; Zelllyse beginnt.
Was ist der Zweck der GP64-Glykoproteine bei Baculoviren?
Sie ermöglichen den Eintritt der knospenden Viren (BV) in die Zellen durch Endozytose.
Welche Rolle spielen Polyhedrine bei Baculoviren?
Sie kristallisieren um die ODV und bilden Okklusionskörper (OB), die die Viren schützen und ihre Verbreitung ermöglichen.
Wie wird ein fremdes Gen in das Baculovirusgenom integriert?
Durch Klonierung in einen Transfervektor, der homologe Sequenzen zum Baculovirusgenom enthält, und anschließende Ko-Transfektion in Sf9-Zellen.
Was ist ein “Zombie”-Effekt bei Baculoviren?
Ein Verhalten, das die Raupe dazu bringt, sich vor der Verflüssigung zu den oberen Blättern zu bewegen, um die maximale Verbreitung der OBs zu ermöglichen.
Welche Phasen umfasst der Infektionszyklus eines Baculovirus in vitro?
Frühe Phase (Virus-Synthese), späte Phase (Virusreplikation und -zusammenbau), sehr späte Phase (Bildung von ODV und Zelllyse).
