vaje Flashcards
ločljivost
ločljivost= razdalja med točkama, da ju še vidimo kot ločeni
d= 0,61*λ / Na
λ= valovna dolžina
Na (numerična apertura) = n*sinα
n= lomni količnik sredstva, ki je med preparatom in objektivom (zrak=1, olje=1,5, steklo=1,5)
večji jkot je Na, manjši je d, večja ločljivost (boljša)
ločljivost zapisana takoj za povečavo
optični deli mikroskopa
okular - 10x povečava
objektiv
zaslonka
kondezator
zaslonka
kolektor
žarnica
kohlerjeva osvetlitev
okularno merilce
KOHLERJEVA OSVETLITEV= centriranje mikroskopa, na 10x povečavi zapreš spodnjo zaslonko, premikaš kolektor dokler ne vidiš večkotnika
okularno merilce= 100 razdelkov skupaj 1mm
1 razdelek je 10mikrometrov
urotelij
urotelij= triskladni epitelij, ki predstavlja najtesnejšo bariero pri sesalcih
oblike celic, velikost
-kroglasta
-izodiametrična (večkotna) npr. adipociti, hepatociti
-asimetrična
-vretenasta
-ploščata
-kubična
-visokoplazmatska
oblika odvisna od diferenciacije, vezave aktinskih filamentov, funkcije, okolja
velikost celic 10 - 100 µm
(izjeme živčne, jajčna, krvne)
tipi tkiv
epiteliji
Tipi tkiv:
-epitelijsko (krovno)
-živčno
-vezivno
-mišično
Epiteliji:
-enostavni ploščati (žile)
-enostavni kubični (žleze)
-enostavni visokoprizmatski (črevesje)
-večskladni ploščati (koža, grlo, nožnica)
-prehodni (sečni mehur)
-večvrstni (respiratorni)
povečava, velikost razdelka
4x 25µm
10x 10µm
40x 2,5µm
modelni sistemi in vitro hranilni medij
hranilni medij:
glukoza, esencialne ak, vitamini, soli, rastni faktorji, hormoni
37C
5% CO2
pH 7,4
lahko še antibiotiki in fungicidi
različni tipi celičnih kultur in vitro
1.) kultura tkiva (EKSPLANTATA)
odvzem materiala s stereomikroskopom
ustrezne velikosti, da hranila difundirajo do sredine
+ posnema lastnosti celic in vivo
- sčasoma propade
2) PRIMARNA CELIČNA KULTURA
po razrezu na koščke tkivo obdelamo z proteolitičnimi encimi, centrifugiramo, dolijemo nov medij
primarna c.k. prva preraste ploščo
3)SEKUNDARNA CELIČNA KULTURA
preteolitični encim, presajanje (pasaža)
vse naprej so sekundarne
po določenem št delitev izgubljajo prvotne lastnosti
4)TRAJNA CELIČNA LINIJA
neomejeno št celičnih delitev
lahko rakave ali pa notmalne celice
INVERTNI MIKROSKOP
revolver je pod mizico, celicam se približujemo iz spodnje strani
vzdrževanje celic na mikroskopu- komora
kokultura
kultura 2 ali več različnih tipov celic
direktne, indirektne
za študije medsebojnega vpliva celic
3D kulture in vitro
-sferoidi
suspenzija celic, nastanek sferoida
-organoidi
biopsija + transkripcijski faktor —> pluripotentne matične celice + hranila, rastni faktor, molekule medceličnine —–> organoid
-biotiskani modeli
kako povečati kontrast bioloških struktur?
faznokontrastni mikroskop
navadno invertni kombiniran z faznokontrastnim- za opazovanje živih neobarvanih celic
in vivo
pomembno izbrati pravo vrsto, linijo, spol in starost
standardizacija živali in dejavnikov okolja
ločitev mrtvih celic od živih
barvilo Tripan: prodira samo v celice s poškodovano plazmalemo (modro modrilo)
delež preživetja = žive / žive + mrtve
