Va Flashcards

1
Q

En ácidos nucleicos para la cuantificación y determinación de La pureza qué hacemos..

A

Espectrofotometria

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Q

En ácidos nucleicos para la cuantificación y determinación de La pureza qué hacemos..

A

Esoectrofotometria

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3
Q

Cuando queremos purificar esos nucleicos cuáles son los diferentes o tipos de mecanismos que usamos..

A

Cromatografía de afinidad
Electroforesis

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4
Q

Capaz de inactivar ARN asas y ADN asas..

A

Proteínas K

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Q

Capaz de inactivar ARN asas y ADN asas..

A

Proteínas K

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6
Q

Se encarga de destruir proteínas que creen un enlace con el ADN por ejemplo histonas factores de transcripción y polimerasas…

A

Proteínas K

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7
Q

Cómo se activa la proteína k?

A

Bajo condiciones de desnaturalización

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8
Q

En El Paso 3 precipitación de proteínas donde se encuentra el ADN??

A

En el sobrenadante

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9
Q

Detergente ni único para romper membranas proveniendo la liberación del ADN??

A

SDs 1%

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10
Q

Buffet para mantener el pH en el cual el ADN se mantiene estable y con carga negativa….

A

50 mM Tris -HCk pH 8

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11
Q

Cómo se hace la extracción de la ARM

A

Método fenol cloroformo

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12
Q

Cómo se hace la extracción de la ARM

A

Método fenol cloroformo

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13
Q

El ADN es más polar que el ARN???

A

Verdadera

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14
Q

El ADN es más polar que el ARN???

A

Verdadera

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15
Q

La pureza de 1.8 a 2 de ADN se considera..

A

Optima

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16
Q

Rango que se considera aceptable de ADN pureza..

A

1.6-1.8

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17
Q

Rango que se considera aceptable de ADN pureza..

A

1.6-1.8

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18
Q

Contaminación con compuestos aromáticos y proteínas La pureza del ADN está prox

A

Menor de 1.6

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19
Q

Contaminación de la ARN

A

Se da cuandk está la lurezamauor de 2.1

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20
Q

Contaminación de la ARN

A

Se da cuandk está la lurezamauor de 2.1

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21
Q

Concentración de agarosa típica

A

0.6% a 4%

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22
Q

La movilidad de la base a la concentración de garosa la movilidad disminuye o aumenta al aumentar el porcentaje de agarosa??

A

Si

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23
Q

Cuál es el voltaje aplicado en la electroforesis???

A

100 v a 130v

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24
Q

Cuál es el voltaje aplicado en la electroforesis???

A

100 v a 130v

25
Q

Simplemente el voltaje de la electroforesis..

A

La movilidad aumenta aunque no necesariamente se incrementa la resolución

26
Q

La mayor tiempo de corrida..

A

Mayor resolución

27
Q

Al incrementar la temperatura de la electróforesis..

A

La movida se incrementa Pero puede incrementar que se puede fundir el gel

28
Q

Qué hace el bromuro de etirdio??

A

Absorbe de 260-360 nm

29
Q

Se intercala en las bases para la visualización de ácidos nucleicos ??

A

Bromuro de etidio

30
Q

Se intercala en las bases para la visualización de ácidos nucleicos ??

A

Bromuro de etidio

31
Q

Cómo es el proceso de lavado en la extracción del ADN??

A

Se lava un par de veces de etanol al 75%
✓ Remueve sales y otras impurezas sin disolver en el ADN

32
Q

Cuál es el coeficiente para la buscarle en concentración impureza del ADN??

A

Coeficiente 260/280

33
Q

Cuál es el coeficiente para la buscarle en concentración impureza del ADN??

A

Coeficiente 260/280

34
Q

Pero una mejor resolución del voltaje aplicado en la electroforesis se usa…

A

5v / cm del gel
Es decir 70v

35
Q

Dónde se utilizaba la electroforesis capilar??

A

Empleado en secuenciación automatizada

36
Q

Se basa en la interacción de ácidos nucleicos y proteínas??

A

EMSA electroforesis

37
Q

Para la separación de grandes fragmentos de ADN reorienta la molécula mediante cambios periódicos en la orientación del campo eléctrico?? E 1 y E2

A

Electroforesis de campo claro

38
Q

Para la separación de grandes fragmentos de ADN reorienta la molécula mediante cambios periódicos en la orientación del campo eléctrico?? E 1 y E2

A

Electroforesis de campo claro

39
Q

Qué contiene el buffer de lisis??

A

✓50 mM Tris-HCl pH 8
✓1% de SDS
✓proteasa K

40
Q

Qué contiene el buffer de lisis??

A

✓50 mM Tris-HCl pH 8
✓1% de SDS
✓proteasa K

41
Q

La precipitación de proteínas se hace con soluciones de..

A

Acetona

42
Q

La precipitación de proteínas se hace con soluciones de..

A

Acetona

43
Q

Que si le agrega para una precipitación del ADN??

A

Alta concentración de sales NaCl

44
Q

Que si le agrega para una precipitación del ADN??

A

Alta concentración de sales NaCl

45
Q

Pasos para la extracción de ADN genómico??

A
  1. Muestra de células
  2. Añadir el buffer de lis para mantener el oh, rompoer membranas, desnaturalizar y degradar proteínas
  3. Precipitar proteínas
  4. Precipitación del ADn con alcohol frio y alta concentración de sal
    5.lavados.
  5. Resuspension de agua libre de nucleasas
  6. Cuantificación y determinación de la pureza
46
Q

Pasos para la extracción de ADN genómico??

A
  1. Muestra de células
  2. Añadir el buffer de lis para mantener el oh, rompoer membranas, desnaturalizar y degradar proteínas
  3. Precipitar proteínas
  4. Precipitación del ADn con alcohol frio y alta concentración de sal
    5.lavados.
  5. Resuspension de agua libre de nucleasas
  6. Cuantificación y determinación de la pureza
47
Q

Qué alcohol se utiliza para la extracción del ARN??

A

Se utiliza el isopropanol que es un alcohol menos polar que el etanol

48
Q

Qué alcohol se utiliza para la extracción del ARN??

A

Se utiliza el isopropanol que es un alcohol menos polar que el etanol

49
Q

Qué Rango no puede ser observado en los genes de agorosa en la electroforesis en gel??

A

20 pb

50
Q

Qué Rango no puede ser observado en los genes de agorosa en la electroforesis en gel??

A

20 pb

51
Q

Cuál es la concentración normal o típica de agarosa??

A

0.5 a 4%

52
Q

Se encarga de detectar hasta 1 Ng de dsDNA??

A

Bromuro de. Etidio

53
Q

Se encarga de detectar hasta 1 Ng de dsDNA??

A

Bromuro de. Etidio

54
Q

Este es un agente no intercalante que es una alternativa menos tóxica y menos sensible para la visualización de ácidos nucleicos??

A

SYBR

55
Q

Entonces en conclusión para lograr una mayor resolución se emplea un voltaje_________ un tiempo de corrida________ y una cantidad _______de porcentaje de agarosa

A

Menor
Mayor
Mayor

56
Q

Entonces en conclusión para lograr una mayor resolución se emplea un voltaje_________ un tiempo de corrida________ y una cantidad _______de porcentaje de agarosa

A

Menor
Mayor
Mayor

57
Q

En el campo pulsado Las cadenas más cortas les toma mayor tiempo de reorientación exhiben una menor movilidad??

A

FALSO
A las cadenas más cortas les toma menos tiempo de reventarse y exhiben una mayor movilidad

58
Q

En el campo pulsado Las cadenas más cortas les toma mayor tiempo de reorientación exhiben una menor movilidad??

A

FALSO
A las cadenas más cortas les toma menos tiempo de reventarse y exhiben una mayor movilidad