Extracción Y Cuantificación De Proteínas Flashcards
Para que sirve la secuenciación de proteínas??
Para identificar el gen que la codifica y poder clonanarla
Pasos para extracción de proteínas??
*Disrupción mecánica
*Lisis celular
*Separación de las membranas y restos celulares
*Precipitación de proteínas solubles
*Centrifugación
*Resuspension de proteínas
Pasos para extracción de proteínas??
*Disrupción mecánica
*Lisis celular
*Separación de las membranas y restos celulares
*Precipitación de proteínas solubles
*Centrifugación
*Resuspension de proteínas
Durante la precipitación y centrifugación dónde quedan las proteínas solubles???
Las proteínas solubles quedan en el sobrenadante
Dónde quedan las proteínas hidrofobicas después de la centrifugación ??
En el pellet ( pastilla )
Dónde quedan las proteínas hidrofobicas después de la centrifugación ??
En el pellet ( pastilla )
Ahora sí solo quise las proteínas solubles ( sobrenadante) como las precipitó ??
Con
•sulfato de amonio (NH)SO4 no desnaturalizante
•etanol y acetona
Lis celular cuáles son los pasos ??
⭕Inhibidores de proteasas .
⭕Detergente ( SDS, desnaturalizante, triton x-1000 no desnaturalizante
⭕Algunos agentes estabilizadores
Lis celular cuáles son los pasos ??
⭕Inhibidores de proteasas .
⭕Detergente ( SDS, desnaturalizante, triton x-1000 no desnaturalizante
⭕Algunos agentes estabilizadores
Cómo podemos analizar análisis estructurales de proteínas??
Cristalografía de rayos x, espectrometría de resonancia magnética nuclear
Qué no sirve para la cuantificación de proteínas??
Ensayo de Bradford
Azul ( menos proteínas)—> rojo/café (más proteínas )