Type de culture cellulaire animal Flashcards
Qu’elles sont les avantages et inconvénients de la culture cellulaire animale?
AVANTAGES
Contrôle du microenvironnement
Homogénéité cellulaire
Caractérisation facile
« Économique »
Réduction de l’expérimentation animale
Reproductibilité
Conservation à moyen et long terme
DÉSAVANTAGES
Manipulations nécessitant une expertise qualifiée
« Quantité et coût »
Perte de l’état différencié en culture
Origine des cellules ?
Instabilité génotypique et phénotypique
Disponibilité de marqueurs ?
Perte des interactions cellulaires d’origine
qu’elles sont les différences entre l’état des cellule in vivo et in vitro?
Organisation tri-dimensionnelle vs bi-dimensionnelle
Perte des interactions hétérotypiques
Étalement des cellules
Motilité cellulaire
Prolifération cellulaire
Métabolisme cellulaire modifié
c’est quoi un milieu de culture?
Mélange complexe de substances nutritives, supplémenté généralement de sérum ou d’autres facteurs biologiques qui permettent la croissance des cellules in vitro en mimant les conditions existantes in vivo.
Qu’est-ce qu’un bon milieu de culture doit pouvoir faire?
❑ Maintien du pH (Pouvoir tampon)
❑ Maintien de l’osmolalité
❑ Viscosité
❑ Source de nutriments (Source d’énergie)
de quoi est composé un milieu de culture
❑Acides aminés
❑ Vitamines
❑ Sels inorganiques
❑ Glucose
❑ Tampon
Pourquoi incorporer des oligo-élément et sel minéraux dans un milieu de culture?
sels minéraux:
aident au maintien de l’équilibre osmotique et aident à réguler le potentiel membranaire
oligo-éléments:
ajoutés aux milieux sans sérum pour remplacer ceux généralement trouvés dans le sérum. Nécessaires en très faibles quantités pour une croissance cellulaire.
Pourquoi ajouter des vitamines dans un milieu de culture?
essentielles à la croissance et à la prolifération cellulaire.
ne peuvent pas être synthétisées en quantité suffisante par les cellules
adaptés le milieu à une lignée cellulaire particulière.
Les vitamines du groupe B sont le plus souvent ajoutées pour stimuler la croissance.
Que sont les carbohydrates?
source d’énergie majeure ajouter dans les milieux de culture.
glucose, galactose, maltose et fructose.
quels sont le désavantages à l’utilisation du rouge de phénol?
peut imiter l’action de certaines hormones stéroïdes (estrogène).
Dans certaines formulations sans sérum il interfère avec l’homéostasie sodium-potassium.
interfère avec la détection dans les études en cytométrie de flux.
c’est quoi le Rouge de Phénol?
- un indicateur de pH
- A pH faible, le rouge de phénol rend le milieu jaune alors qu’à des pH élevés le milieu tourne au violet.
Pourquoi faut-il éviter d’utiliser des antibiotique dans nos milieu de culture cellulaire animal?
❑ Favorise le développement de la résistance aux antibiotiques
❑ Masque (ou retarde) la présence de contaminants
❑ Masque la contamination par mycoplasmes (et même la favorise)
❑ Effets anti-métaboliques
❑ Favorise utilisation de méthodes de travail non-adéquates.
c’est quoi du FBS?
foetal bovine serum
qu’elles sont les caractéristique du FBS?
possède une forte concentration en facteurs de croissance et une faible concentration d’immunoglobulines.
- Peu nécessité un chauffage de 30 minutes à 56C avant l’utilisation.
- Doit être entreposé à -20C
- Coût élevé.
Àquoi sert l’albumine dans le sérum?
lie l’eau, les sels, les acides gras libres, les hormones et les vitamines et les transporte entre les tissus et les cellules.
Sa capacité de liaison permet l’élimination des substances
toxiques.
À quoi sert l’aprotinie dans les sérum?
agent protecteur
(inhibe plusieurs sérine protéases telle que la trypsine)
