Transfusions lab Flashcards
Varför vill man ha ett antikroppsöverskott vid blodgruppering?
För att vid antigen överskott finns inte tillräckligt med antikroppar för att ge ett bra resultat.
Vilka faktorer påverkar en ag-ak reaktion?
Specificitet mellan ag-ak Ag-ak måste hållas ihop temperatur pH Tid Jonstyrka
Hur påverkas ag-ak reaktion av kontrantrationer ak och ag?
ag-ak reaktionen följer massverkans lag tills en jämvikt mellan substanser uppstår. Denna reaktion påverkas av koncentrationen antigen och antikroppar och miljöförhållanden.
Antalet antigen/cell och antigenets tillgänglighet påverkar även dess upptag av antikroppar och vid antigen överskott blir agglutinatet svagare.
Hur kan temperatur påverka ag-ak reaktion?
Har en påverkan på massverkans lag.
Vätebindningar har även ett optimum på 4°C. AB0 reaktioner är aktiva i alla temperaturer och RhD har ett optimum i rumstemperatur.
Felkälla gällande temperatur finns om man inkuberar i kalla reagens –> falska resultat.
Hur kan pH påverka Ag-ak reaktionen?
Proteinernas laddning påverkas av pH. Med sjunkande pH släpper ag och ak ifrån varandra.
Hur kan tiden påverka ag-ak reaktionen?
Tiden påverkan massverkans lag. Ca. 75% av antikroparna måste hinna binda in för att reaktion ska ske.
Hur påverkar jonstyrkan ak-ag reaktionen?
Har betydelse för hur snabbt reaktionen går. Lägre jonstyra ger en lägre z-potential vilket ger en störrea ttraktionskraft mellan ak och ag.
För låg jonstyrka kan dock ge falskt positiva resultat, därför är det viktigt med negativa kontroller.
Vad krävs för en godkänd AB0 gruppering? Vilken mekanism bygger metoden på?
Att man hittat antikroppar mot antigen som patienten saknar enligt Landsteiners regel.
Detta ska göras av två personer där den ena testar mot antigen med anti-A och anti-B meddan den andra testar efter antikroppar. Resultaten bör stämma överens med varandra.
Metoden bygger på direkt agglutination.
Vad kan man göra om man vid en AB0 gruppering få för svagt positivt svar för att svara ut?
Man kan förstärka reaktionen genom att ex. centrifugera eller kyla provet och låta reaktionen ske igen.
Svagt positivt resultat kan fås pga. kontamination mellan brunnar, genetiska eller maligna faktorer eller att antigenuttryck är sagare vid födsel.
Vad gör man annorlunda när man ska gruppera ett barn <6 mån?
Man gör inte plasmagrupperingen utan gör antigengrupperingen med två olika reagens av anti-A och anti-B.
Vad kan vara orsaken till att plasmagruppering och antigengruppering inte stämmer överens? Ex. om man får en oväntad agglutination på plasmasidan? Hur ska avvikelsen åtgärdas?
Kan bero på köldagglutininer, irreguljära antikroppar.
Som åtgärd kan man testa att låta reaktionen ske i 37°C och om plasmagrupperingen fortfarande är positivt får man göra en antikroppsscreening med IAT.
Varför använder man AB-reagens vid AB0 grupperingar?
Man använder ett AB-reagens för de prover som visar en agglutination mot både anti-A och anti-B som en negativ kontroll.
om denna negativa kontroll visar positivt kan det bero på köldagglutininer, polyagglutinabla celler ect. Man kan då testa att tvätta erytrocyter med PBS.
Varför används två reagens av anti-A och anti-B vid AB0 gruppering?
På alla grupperingar används två reagens från olika cellkloner eftersom att det inte finns några direkta referensvärden, detta är alltså för att kolla riktigheten av metoden.
Vad gör man om en ny blodgivare på rhD gruppering visar negativt?
Man måste gå vidare med IAT då den är känsligare för att vara säker på att givaren inte är ett svagt D. Om IAT visar sig positivt gör man även en DAT för att vara säker på att IAT inte visar falskt positivt av att erytrocyterna redan sensibiliserats av ex. en hemolytisk sjukdom.
Vad innebär IAT och AHG?
IAT är en indirekt agglutinationsteknik där man letar efter fria IgG i plasma. Testerytrocyter adderas till brunn och därefter patientens plasma. Dessa agglutinerar om antikroppar finns i plasman.
AHG-reagens finns redan i brunnen och binder till IgG om det bundit till testerytrocyter och ger en synlig agglutination. AHG är alltså ett anti-IgG.