Traces Biologiques Flashcards
De quoi est fait le sang?
55% – plasma sanguin (eau, glucose, protéines, lipides)
45% – globules rouges (99%), globules blancs et plaquettes
~5’000 à 10’000 globules blancs / ml de sang –> ADN du sang
De quoi est fait le sperme?
liquide séminal + éléments cellulaires (spermatozoïdes, cellules
épithéliales,macrophages, nutriments, oligoéléments,…)
~20 à 200 millions spermatozoïdes / ml de sperme
De quoi est fait la salive
sécrétée par les glandes salivaires (99% eau, protéines, électrolytes, …)
+ cellules buccales –> contient de l’ADN
De quoi est fait la salive
sécrétée par les glandes salivaires (99% eau, protéines, électrolytes, …)
+ cellules buccales –> contient de l’ADN
De quoi est fait les traces de contact?
composés endogènes (glandes corporelles) + (semi-)exogènes
De quoi est faite les cheveux/poil?
cheveu tombé vs cheveu arraché –> présence de la racine
ADN nucléaire si racine (succès <10%)
ADN mitochondrial sinon (succès ~75%)
Quels traces biologiques sont riches en ADN? et non?
sang et sperme
le reste:
▪ salive
▪ traces de contact
▪ sécr. vaginales
▪ urine
▪ os/dent
▪ cheveux/poils
▪ ongle
Quelles sont les differentes etapes de l’exploitationd es traces biologiques?
Extraction
Quantification –> quantite que l’on va prelever
Amplification –> PCR (polymerase chain reaction) : copie des fragments d’ADN d’interet pour avoir une quantite analysable (32 cycle =1 milliard de copie)
Électrophorèse capillaire
Détermination des allèles
Def test d’orientation
Tests de natures diverses qui permettent d’attester de la nature biologique d’une trace
Expliquer la partie “nature diverses” de la def de test d’orientation
principaux types:
-observation visuelle
-tests chimiques chromophoriques (activité catalytique du fluide)
-tests immunochromatographiques (reconnaissance moléc.)
Expliquer la partie “attester” de la def de test d’orientation
on ne confirme pas, on ajoute une information d’enquete, orientation
spécificité (immunochr. > chromoph.)
faux positifs (chromoph. > immunochr.)
faux négatifs
Expliquer la partie “nature biologique” de la def de test d’orientation
strategie de ciblage:
-soit on cible un compose qui est principalement present dans le fluide (choline pour le sperme_
-soit on cible les proteines qui sont dote de proprietes catalytiques (hemoglobline)
Def test chromophorique
test qui est base sur une molecule qui a la base est incolore qui est mise en contact avec des reactif et si il y’a une enzyme –> reaction va se faire entre le test et le reactif –> donne un compose qui est colore
si ya pas d’enzyme –> lentement ou pas du tout
aspect catalytique qui va se faire
def tests immunochromatographie?
test avec une petite plaquette avec fluide qui migre
test pour le sang:
on cherche a savoir si il ya de l’hemoglobine
la on met le liquide, il y’a anticorps present qui se liront avec l’hemoglobine si il y’en a
–> on met le fluide
–> 2 lignes (controle et la ligne du test dit positif)
–> ligne controle: anticorps qui vont cibler l’hemoglobine qui est deja presente la on mt la goute
–> ligne test: anticorps qui doivent capter ceux qui sont present dans le fluide que l’on met (si y’en a pas, on voit que la barre controle (la 2eme))
Detection visuelle du sang
-lumiere blanche
–> tentative de localisation possible
–> caracterisation de trace
–> caracterisation du suppot
-lumiere forensique
–> sang peut absorber certaines longueurs d’onde –> apparait noir/fonce (420-270nm)
Quels sont les autres test que l’on peut faire sur le sang en plus de l’optique
test chimiques chromophoriques
decrire test chromophorique pour le sang
test sur l’hemoglobine car:
-specifique au sang et activite catalytique (oxyde en presence d’eau oxygene)
on va prendre une mol qui est incolore en presence d’eau oxygene (fforme reduire) et si y’a hemoglobine –> reaction se fait –> apparait colore (forme oxyde)
AH2 + H2O2 = A + 2H2O
Donner les differents indicateurs utilise pour le test chromophoriques du sang
phenolphtaleine
tetrametyle
luminol
Comment est la specificite du test chromophorique du sang? faut + ? faux - ?
ne permet pas de detecter si cest humain ou non
faux + si le susbtrat a de peroxydase ou agents oxydant (fruits.legume, rouille)
faux - : limites
Donner le cas celebre explique lors des test chromophoriques du sang?
dingo case (AU)
Test chromophorique, test optique. quoi dautre pour le sang?
test immunochromotogrpahique
Expliquer test immunochromatographique du sang
on cible la prot (pas son activite catalytique)
–> hemoglobine et glycophorine A
Que fait glycophorine A?
proteine empechant l’agregation des globules
Donner les 3 types d’indicateurs commerciaux utilise pour les test immunochromatographique du sang? Specificite ? Faux + ? et faux -?
Hexagon OBTI -> hemoglobine (souvent animaux)
SERATEC Hemdirect –> hemoglobine (des fois animaux)
RSID Blood –> Glycorphorine A (que pour detecter humain)
+ specifique que chromophorique
faux + : + rare que chromophorique (liquide acide)
faux - : certain ne vont pas reagir si trop de sang ou temp ambiante est trop basse
Comment peut - on faire la difference entre du sang menstruelle et peripherique ? Commercial?
test immunochromatographique –> hemoglobine + D-dimeres
D dimere = prod de degradation de la fibrine (resp.coagulation) => marqueur de sang menstruel
SERATEC PMB -> hemoglobine _ d-dimere = mais animaux peuvent reagir
Quels sont les tests pour le sperme ?
-test de detection visuelle
-test chromophorique
-test immunochromatographique
-confirmation visuel
Expliquer Detection visuelle du sperme
-lumiere blanche
–> localisation mais peu detectable car incolore
–> caracterisation de trace
–> caracterisation du support
-lumiere forensique
–> sperme fortement luminescent (420-470nm)
Expliquer test chromophorique du sperme
cible :phosphatase acide -> pas specifique au sperme mais en grande quantite + activite catalytique (coupe/hydrolyse les groupements phosphate)
donc mm chose que le sang
marqueur incolore qui presente un groupement phosphate en presence d’eau et si ya de la phosphate acide –> devient colore
A-phosphate + H2O => A + phosphate
Donner les brand commercial des test chromophoriques du sperme? specificite? faux +? faux -?
naphtylphosphate + fast blue b
bromochroroindolyhphosphate
methylumbellferyphosphate
phosphatesmo
specificite: pas assez forte pour differencier homme et animaux
faux +: jus de fruit frais, fluide contenant de la phosphatase acide (secretions vaginale mais diff d’intensite (Diff de conc.))
faux -: possible (perte d’activite par deg de la phosphate acide)
Expliquer test immunochromatographique pour le sperme
cible: prostate-specific antigen (PSA) ET Semenogeline
Def PSA? def semenogeline?
psa: Enzyme (protease) produit par la prostate et ayant pour fonction de degrader la semenogeline
semenogeline: glycoprot resp. de la viscosite du sperme au moment de l’ejaculation et qui va etre degrade (par psa) pour fluidifier et release ls spermatozoide
Donner les noms des brands de test immunochromatographique du sperme? avec leur specificite . faux +?
SERATEC PSA -> PSA (homme et primate)
RSID semen -> Semenogeline (homme)
faux +: rare (SERATEC = urine)
Expliquer la confirmation visuelle pour le sperme?
Christmas tree
–> test qui permet de colorer le spermatozoide en plusierus couelur
–>
Nuclear Fast Red -> tete coloree en rouge
Picroindigocarmine –> queue colore en vert
si on voit –> confirmation de spermatozoide
si on voit pas –> ya pas de spermatozoide mais sperme
Donner les types de test pour la salive
-Detection visuelle
-test chromophoriques
-test immunochromographique
Expliquer la detection visuelle pour la salive?
lumiere blanche :
-tentative de localisation posible mais peu detectable car incolore
-caracterisation de trace
-caracterisation de support
lumiere forensique:
-peut luminer faiblement a 420-470nm
Expliquer test chromophore pour salive
cible: alpha-amylase (conc eleve dans la salive + activite catalytique (hydrolyse/coupage des saccharides)
conception d’un papier dans lequel un colorant est enferme dans une microsphere d’amidon (il reste d’un cote du papier) MAIS si on met ce papier sur une trace potentiel de salive -> la ou ya de la salive, le colorant se fait attaquer et colorant est liberer est migre sur le papier
papier + amidon = papier + sucre si ya de l’aphaamylase (salive)
Donner la brand de test chromophorique pour la salive? specificite? faux +?
phadebas
specificite: homme ou aniamux
faux +: certain aliments, excrement
Expliquer test immunochromotographique de salive? brand? specificite? Faux +?
cible: alpha-amylase (pas son activite catalytique)
SERATEC amylase (homme et primate)
RSID saliva (homme et primate)
faux+ connus: rare (rsid= lait maternel, matiere fecale)
Quel test utiliser pour l’urine? expliquer . brand? avec specificite
immunochromatographique
cible: uromoduline (prot de tamm-horsfall)
glycoprot produite par les reins: prot la plus abondante de l’urine
brand: RSID urine -> uromoduline (humain + chien gorille)
Comment detecter les secretions vaginales ou cell epitheliales?
aucun test d’orientation spec existant. –> traces de contact preleve a l’aveugle
QUels sont les points neg des test chromophoriques et immunochromatographiqeu?
-consommation dune fraction du materiel bio requis
-limitation a une seule cible biologique par test
-sensibilite variable
-chromophorique - cher, plus facile
