TP2 Flashcards
Pourquoi utilisons-nous Micrococcus?
Car c’est une bactérie à Gram positif.
Quel est le rôle du lysozyme?
- Hydrolyser les liaisons entre des sucres membranaires des bactéries.
- Détruire la paroi peptidoglycane des bactéries à Gram positif.
Comment est chargée la matrice d’une échangeuse d’anions?
Positivement pour retenir les molécules chargées négativement.
Qu’est-ce qu’une électrophorèse?
- Une technique de séparation des acides nucléiques.
- Le déplacement de molécules chargées dans un champs électrique.
A quoi sert le tampon de charge?
- A observer la migration de l’échantillon grâce au bleu de bromophénol.
- A faciliter le changement d’échantillon grâce au glycérol.
- A dénaturer les protéines de l’échantillon.
Quelle est la charge globale du glutamate à pH 7?
Négative
Qu’est-ce qu’une chromatographie?
- Une technique de séparation des substances en solution.
- Une technique permettant de purifier des protéines.
- Une technique permettant de purifier des acides nucléiques.
Qu’est-ce qu’une sorbonne?
- Une hotte aspirante
- Une hotte protégeant l’expérimentateur
Quelles sont les propriétés chimiques de la proline?
Il possède une fonction :
- 𝛼-carboxylique
- amine secondaire
Qu’est-ce que le pHi d’une protéine?
- C’est le pH auquel une protéine est sous forme zwitterionique.
- C’est un pH auquel les groupements d’une protéine sont forcément chargés.
Quel est le rôle du gel de concentration dans un SDS-PAGE?
- Il condense les protéines à cause de la migration des ions glycines.
- Il permet une entrée homogène des protéines dans le gel de séparation.
- Il permet le changement des protéines.
Quelles sont les 3 étapes fondamentales d’une chromatographie?
- L’élution des composés retenus.
- L’équilibration de la résine.
- Le lavage de la colonne.
Qu’est-ce que la ninhydrine?
- Une molécule interagissant avec tous les AA sauf la proline.
- Une molécule interagissant avec les fonctions amines.
- Un agent utilisé par la police scientifique pour révéler les empreintes digitales.
Qu’est-ce que l’isatine?
Une molécule interagissant uniquement avec la proline.
Le HCl est à une concentration de 1M, quelle est sa normalité?
1N
Que se passe-t-il pour le groupement 𝛽-COOH du glutamate lorsque le pH est AU-DESSUS de 4,25?
Il est chargé négativement.
Qu’elle est la charge global de la proline à pH 1?
Positive
Pourquoi la proline n’a-t-elle pas de groupement 𝛽-COOH ionisable?
Car la proline ne possède qu’un seul groupement acide carboxylique.
Pourquoi utilise-t-on des conditions dénaturantes?
Nous ne voulons séparer les protéines qu’en fonction de leur taille.
Qu’est-ce qu’est le SDS et à quoi sert-il?
- C’est un détergent ionique.
- Il confère une charge globale négative à la proline.
- Il permet le dépliement de la protéine par répulsion électrostatique.
Qu’est-ce que le volume mort?
Le volume initial de la colonne avant chargement de l’échantillon.
A quoi sert le tampon glycine-sodium?
A éluer le lyzozyme par compétition.
Quel est le rôle du gel de séparation dans un SDS-PAGE?
- Il permet l’analyse des protéines séparées
- Il permet la fragmentation des protéines en fonction de leur taille.
Que se passe-t-il pour le groupement 𝛽-COOH du glutamate lorsque le pH est EN DESSOUS de 4,25?
Il n’est pas chargé.
Quels sont les rôles des protéines?
- Catalyse des réactions biologiques
- Signalisation cellulaire
- Expression du génome
- Structure des membranes cellulaires
- Motricité
Vers quel pôle vont migrer les protéines dans notre expérience?
Vers l’anode, positive.
Quelles sont les propriétés chimiques de l’acide glutamique?
Il possède une fonction:
- 𝛼-carboxylique
- 𝛽-carboxylique
- amine primaire
Qu’est-ce qu’un AA?
- Une molécule:
- avec un groupement amine
- avec un groupement carboxylique
- Le constituant élémentaire des protéines.
Comment mettons nous en évidence l’activité du lysozyme?
En regardant la diminution de la DO d’une solution de Micrococcus en présence de lyzozyme.
Qu’est-ce qu’une protéine?
Un assemblage de:
- peptides
- AA
Quel sera le blanc utilisé?
Le tampon phosphate.
A quoi sert le 𝛽-mercaptoéthanol qu’il contient?
- A casser la structure quaternaire des protéines
- A casser la structure des protéines
- A couper les pont disulfures entre les cystéines
Comment analysons-nous la séparation des protéines?
Le gel est placé dans une cuve contenant du bleu de Coomassie.
Qu’est-ce que le lysozome?
- Une enzyme
- Un facteur retrouvé dans le blanc d’œuf
- Une protéine
- Un facteur antibactérien
Pourquoi n’éluons-nous pas le lysozyme en faisant varier le pH?
- Car un pH fortement basique dénaturerait le lysozyme
- Car nous ne pourrions plus tester l’activité du lyzozyme par la suite.
Pourquoi fait-on des lavages en colonne?
Pour augmenter la pureté de l’élution?
Dans le tableau, que sont les fractions qu’il faut rajouter à la suspension de bactéries?
- Les fractions de lavage obtenues après chromatographie
- Les fractions d’élution obtenues après chromatographie
- La fraction initiale de blanc d’œuf
Qu’est-ce qu’une électrophorèse?
- Le déplacement de molécules chargés dans un champs électrique.
Une technique de séparation:
-de protéine. - des acides nucléiques.
- de molécules en fonction de leur charge.
- des molécules en fonction de leur taille
- en fonction de leurs forme
