TP 3 Flashcards
Comment obtient-on la quantité de matière de lysozyme à partir de l’absorbance du cristal?
En utilisant la loi Beer-Lambert.
Pourquoi pouvons nous mesurer l’absorbance à 230nm du cristal ici?
Car le cristal n’est constitué que d’une seule espèce de molécule.
Pour les protéines absorbent-elles à 230nm?
A cause des acides aminés possédants un cycle aromatique dans leur chaîne latérale.
Qu’est-ce que le diagramme de phase?
Un diagramme de phase est une représentation graphique représentant les domaines de l’état physique d’un système.
Quelle est la concentration en agent cristallisant du réservoir par rapport à celle dans la goutte?
Elle est plus élevé.
Où trouve-t-on naturellement la BSA?
Dans le sérum bovin.
A quoi correspond le rendement?
Le rendement correspond au pourcentage d’enzyme conservé dans la fraction finale par rapport à la fraction de départ.
Qu’est-ce que le lysozyme? Quel est son rôle?
Le lysozyme est une enzyme aux propriétés antibactérienne.
Qu’est-ce qu’une maille?
Une unité élémentaire qui forme le cristal. Elle est constitué de plusieurs molécules.
Quelle forme géométrique à la maille ici?
Un pavé droit.
Quelles informations peuvent être apportées par la résolution de la structure d’une macromolécule?
- Son activité
- Sa taille
- Son organisation tridimensionnelle
Comment peut-on calculer le nombre de molécules à partir du nombre d’Avogadro?
En multipliant le nombre de mole par le nombre d’Avogadro.
Comment appelle-t-on une expérience où nous mesurons une donnée en fonction du temps?
Une cinétique.
Quel(s) test(s) déjà mis en œuvre précédemment (TP1-2) est à nouveau utilisé ici?
- Le test de Bradford
- Le test enzymatique
Comme pour le TP2, nous observons à nouveau l’action du lysozyme sur les bactéries. Qu’est-ce qui change dans notre expérience par rapport à celle réalisée au TP2?
Nous regardons l’action du lysozyme au cours du temps.
A quoi correspond l’enrichissement?
Il correspond à la proportion de la protéine d’intérêt dans la fraction finale par rapport aux protéines totales initiales.
A quoi sert l’obtention d’un cristal?
L’organisation régulière des molécules dans un cristal permet de déterminer leur structure tridimensionnelle par cristallographie …
Qu’est-ce que l’électrophorèse?
- Une technique de séparation des molécules qui se fait en fonction de la charge électrique et de la taille de ces dernières.
- C’est une technique permettant de séparer des fragments d’ADN en fonction de leur taille et de leur encombrement.
Quel est le principe du test de Bradford?
Le rest de Bradford est dosage colorimétrique reposant sur le changement de couleur du bleu de Coomassie après liaisons avec les AA basiques et hydrophobe des protéines.
Pourquoi cherchons-nous à calculer le rendement et l’enrichissement?
Ces 2 valeurs nous permettent de conclure sur l’efficacité de notre purification.
Quelles informations peuvent être apportées par la résolution de la structure d’une macromolécule?
- Son organisation tridimensionnelle
- Sa saille
- Son activité
Pour calculer le rendement de quelles valeurs ai-je besoin?
- De l’activité enzymatique et du volume des fractions F0 et E1.
- Des valeurs d’activités totales des fractions F0 et E1.
