Toxikologische Methoden Flashcards
Test auf akute Toxizität
LD50 Test
Klassenmethode
Untersuchungen der Wirkungen, die nach einmaliger Einnahme in kurzem Zeitraum eintreten.
Berucksichtigung von speziesunterschieden
LD50 Test
in vivo
Verabreichung verschiedener Dosen
Hoher Tierverbrauch
Übertragbarkeit auf Mensch unklar
Klassenmethode
Einteilung der Tiere in Dreiergruppen 1. G: Orientierungsdosis Wirkung bestimmt Dosis für 2. Gruppe - weitere Tests in Gruppen bis positiv - falls Test positiv (2-3 Tiere sterben) Einteilung in Tox Klasse -> Abschätzung LD50 - reduzierter Tierverbrauch
Welche Informationen werden aus Tests auf akute Tox abgeleitet?
Mortalität
Klinische Zeichen
Organ Gewichte
Makroskopische Pathologie
Test auf Sensibilisierung (Haut)
Adjuvans Test, verstärkte all. Wirkung durch Zugabe von Adjuvan (-> gute Übertragbarkeit auf Menschen)
Bühler Test
- beide Tests an mind. 10 Meerschweinchen
- Tierversuch nötig, da Immunantwort nötig
- zuerst Kontrolle auf Immunantwort des Tiers
- positiv: 30% der Tiere haben Erytheme etc
Test auf Reizung (Inhalativ)
Direkt am Menschen
Test auf Reizung der Augen
Vorher Chem-phys Eigenschaften untersuchen um extreme Reizung zu vermeiden
An Kaninchen oder in vitro
Test auf Reizung der Haut
Vorher Chem-phys Eigenschaften untersuchen um extreme Reizung zu vermeiden
An Kaninchen oder in vitro
Ablauf einer in vivo Studie
- Blutuntersuchung (Auswahl geeigneter Versuchstiere)
- Verabreichung der Substanz mit Futter (3 verschiedene Dosen)
- nach 14 Tagen: klinische Zeichen, Gewicht, Futteraufmahme, Urin
- nach 28 Tagen: Blut und Organentnahme -> Histopathologie etc
Prüfung der Dosis-Wirkungs-Beziehung
Test auf Genotoxizität
Ames Test
- auxotrophe Bakterien (können Histidin nicht synthetisieren)
- Platzierung auf Nährmedium ohne Histidin -> Banterien würden absterben oder sich nicht weiter vermehren
- Zugabe potentielles Mutagen
- positiver Test: Bildung von Bakterien Kolonien, können also Histidin wieder synthetisieren ,Revertanten‘
- negativer Test: keine Änderung
Tests auf Mutagenität werden stets mit und ohne Rattenlebermikrosomen durchgeführt. Wieso?
- Stoff könnte erst bioaktiviert werden müssen (zB Aflatoxin B1)g
- wenn Stoff nur mit Extrakt mutagen: Stoff ist prämitagen und muss bioaktiviert werden
Aflatoxin B1
- natürliches Pilzgift
- Epoxidierung in Hepatocyten -> DNA Addukt
Test auf chronische Tox / Kanzerogenität
- Verabreichung via Nahrung
- 3 Dosisgruppen, Kontrollgruppe je 60-70 Tiere
- reguläre Bluttests und Kontrolle: Urin, Gewicht, Futteraufnahme
,chronische Phase‘ nach 12 Monaten - Tötung 10-20 Versuchstiere
- Organentnahme: Histopathologie: Änderungen Organgewicht etc
,karzinogene Phase‘ nach 24 Monaten - Rest Tiere töten
- Organentnahme
- > hoher Tierverbrauch
- Ratten und Mäuse
Test auf Reproduktionstoxizität
Test über mehrere Generationen (Ratten)
FO: Exposition 70 Tage vor Paarung
F1 &; F2: Exposition in utero, mit Milch und Futter
Beobachtungen:
- allg Tox (Gewicht, klinische Zeichen)
- fertilität, Reproduktion, Entwicklung
Auswertung: 3 seperate LOAEL / NOAEL für - parentale Tox - Fertilität u Reproduktion - Entwicklung d Nachkommen
Effekte reproduktionstoxischer Substanzen
Weibchen:
- verändertes Sexualverhalten
- vorzeitige Pubertät
- Fehlgeburt
- Infertalität
Männchen:
- verändertes Sexualverhalten
- vorzeitige Pubertät
- Impotenz
- Spermienanomalien
