Toxicologia Genética Flashcards
Que tipo de lesões podem ocorrer no DNA e quais os agentes causadores das mesmas?
- Quebras em cadeia dupla: radiações ionizantes;
- Quebras em cadeia simples;
- Aductos: ligação de grandes moléculas reativas como a aflotoxina e o benzopireno;
- Lesões nas bases: espécies reativas de oxigénio;
- Perda de bases: pode ocorrer espontaneamente;
- Lesão por radiação ultravioleta (não ionizante).
Como funciona o teste de Ames?
O teste de Ames é utilizado para detetar se um xenobiótico é um agente cancerígeno. Utiliza estirpes de Salmonella auxotróficas para a Histidina. Se o composto em estudo causar mutações, as bactérias conseguirão crescer em meio sem histidina, são então clónicas revertentes.
Que são micronúcleos?
Micronúcleos são outro marcador utilizado para testes de deteção de agentes cancerígenos. Consistem em fragmentos cromossómicos que não possuem centrómero logo, aquando da formação dos novos núcleos antes da divisão celular, formam micronúcleos.
Quanto maior for o número de fragmentos cromossómicos, maior será o número de micronúcleos.
Qual o papel da proteína H2AX na deteção de agentes cancerígenos?
Aquando uma quebra em cadeia dupla no DNA, a histona H2A é fosforilada perto da quebra, sendo que se suspeita este ser um sinal para a atuação dos mecanismos de reparação.
Deste modo, ao marcar um anticorpo com um fluoróforo para a histona H2AX fosforilada, nos núcleos que sofreram este corte em cadeia dupla no DNA, será possível observar pontos florescentes.
