Thématique 1 - Cours en classe

Question 1

Qu’est-ce que reconnait une enzyme de restriction

Answer 1

Un “palyndrome” de nucléotides

Question 2

Deux types d’extrémités que forme une enzyme de restriction

Answer 2

Franche

Cohésive

Question 3

Que permet deux fragments de se lier ensemble

Answer 3

Une ligase
Plus facile en cohésive que franche qui elle sera liée à la chance

La cohésive est plus facile comme du velcro mais nécessite quand meme ligase

Question 4

Plasmide: Site de clônage

Answer 4

Site du plasmide avec beaucoup de palindromes uniques ne se retrouvant pas ailleurs

Facile à couper à un seul endroit pour éventuellement rentrer le gène

Question 5

Plasmide: Gène de sélection

Answer 5

Gène permettant la résistance à un antibiotique. Permet de vérifier l’insertion du plasmide à la bactérie

Question 6

Qu’est-ce que l’ADNc

Answer 6

Morceau d’ADN complémentaire transcrite sur une molécule d’ARNm par la transcriptase inverse (enzyme) ne possédant pas d’INTRONS

Question 7

Définition et but de la transfection

Answer 7

Définition: Introduction d’ADN étranger dans une cellule eucaryote

But: Exprimer une protéine dans cette cellule et d’étudier l’effet de celle ci

Question 8

Banque d’ADN génomique

Answer 8

Collection de clônes d’ADN représentant la totalité d’un génôme

Question 9

Plasmide: Origine de réplication (Gène de réplication)

Answer 9

Séquence d’AA permettant la réplication du plasmide dans la bactérie

Question 10

Pourquoi pas tous les gènes sont copiés en ADNc

Answer 10

L’ARNm est spécifique à la cellule dans laquelle on l’a pris et exprime seulement les gènes nécessaires à sa fonction

Question 11

3 types de cellules souches

Answer 11

Totipotente
Pluripotente
Multipotente

Question 12

Cellule souche: Totipotente

Answer 12

Seules pouvant donner naissance à un organisme complet

Origine du placenta et de tous les tissus composant un individu

Question 13

Cellule souche: Pluripotente

Answer 13

Dès le 5e jour de la fécondation, les totipotente deviennent pluripotente. Cellules capables de donner naissance à tous les tissus cellulaire et des organes mais pas de tissus extra-embryonnaires comme le placenta

On veut pluripotente pour souris transgénique

Question 14

Cellule souche: Multipotente

Answer 14

Produit un nombre restreint de cellules. Une cellule multipotente de la moelle osseuse donne des cellules sanguine

Question 15

La division des cellules souches est symétrique ou asymétrique

Answer 15

Asymétrique

Question 16

Que permet une puce à ADN

Answer 16

Analyser l’expression d’un gène dans une cellule à un moment donné

Question 17

Qu,est-ce qu’une sonde sur une puce à ADN

Answer 17

Molécule d’ADN fixée à la lame

Question 18

Hybridation d’ADN

Answer 18

Propriété de l’ADN à se reformer en double hélice quand elle rencontre un brin complémentaire

Question 19

Étapes de la puce à ADN

Answer 19

1. Sonde
2. Extraction ARN de la cellule, transcription inverse par transcriptase inverse, étiquettage des ADNc
3. Extraction des données sous laser

Question 20

But de la PCR

Answer 20

Amplifier un gène

Question 21

4 ingrédients de la PCR

Answer 21

1. ADN à amplifier
2. 2 amorces
3. Polymérase
4. Thermocycleur

Question 22

Étapes d’un cycle de PCR

Answer 22

1. Chauffage 94ºC pour séparer les brins en deux
2. Attachement d’amorces aux extrémités des ADNc ciblé. Nécessaire de refroidir à 50-60ºC
3. ADN polymérase ajoute au nouveau brin pour complété deux nouveaux brins à 72ºC (Chauffage)

Question 23

Combien de doubles brins par cycle de PCR

Answer 23

2X ce qui avait avant

Début = 1
1 = 2
2 = 4
3 = 8
4 = 16
5 = 32

Question 24

7 étapes du western blot

Answer 24

1. Dénaturation des protéines par SDS et chaleur (4-3-2-1)
2. Migration sur gel
3. Transfert sur membrane
4. Bloquer la membrane
5. Anticorps 1re
6. Anticorps 2e
7. Détection enzymatique proportionnelle

Question 25

But du western blot

Answer 25

Permet la détection et l'identification de protéines spécifiques dans un échantillon