TEMA 5 Flashcards
Región irregular del citoplasma en el que se sitúa el cromosoma procariótico
Nucleoide
¿De qué está formado el nucleoide?
ADN (60%) + ARN + proteínas en pequeña cantidad
Conjunto de moléculas (de ADN) que guarda/nn y transporta/n la información genética que posee un procariota: cromosoma y plásmidos
Genoma o Genomio procariota
- Porta genes NO esenciales
- Confieren ventajas selectivas
Plásmidos
- Porta los genes esenciales para el crecimiento
Cromosoma
Unas pocas especies presentan cromosomas
lineales…
Streptomyces, Borrelia…
- Estado de la célula en el cual su núcleo no tiene dotación cromosómica doble, es decir, tiene sólo un juego de cromosomas.
- No hay fases estables diploides en su ciclo.
Haploidía (n)
Separación de ADN por tamaños
Electroforesis
Características transmitidas por los plásmidos
- resistencia a antibióticos
- resistencia a metales pesados y compuestos tóxicos
- plásmidos de virulencia
- producción de bacteriocinas, antibióticosy sideróforos
- adquisición de funciones fisiológicas (utilización de azúcares o hidrocarburos)
- capacidad de transmitir genes cromosómicos
- interacciones simbióticas y fijación de nitrógeno
Su función no es conocida o no
se han detectado o no se conocen sus efectos fenotípicos…
Plásmidos crípticos
¿Qué hace el super-enrrollamiento?
- ADN se vuelva más compacto
- Facilita el plegamiento de la molécula
- Hace que el cromosoma quepa dentro de la célula
- Es importante para permitir la separación de las cadenas
Segundo nivel de retorcimiento
Superenrrollamiento
Estructura del ADN
El ADN se organiza en el nucleoide en forma de lazos, uniéndose a proteínas básicas: proteínas HL,
aunque se encuentran en mucha menor cantidad
¿Cuál es la función de las proteínas H-L?
- Estabilizar el ADN cuando está superenrrollado,
ya que el ADN es ácido (tiene muchas cargas - que se repelerían).
- Las proteínas básicas tienen cargas positivas, que ayudan al plegamiento del ADN, estabilizándolo en la conformación superenrrollada —- REGULACIÓN
Superenrrollamiento negativo
Superenrrollamiento en sentido contrario al habitual
Moléculas circulares de ADN de cadena doble (CCC y superenrollados) que pueden existir y replicarse libres en el citoplasma o integrados en el cromosoma
Plásmidos
Elemento genético que puede integrarse y replicarse integrado en el cromosoma
Episoma
Elementos fundamentales de los plásmidos
- el sitio ori para iniciar la replicación del ADN, un promotor para iniciar la transcripción y un gen para la resistencia a los antibióticos
- Promotor: Transcripción
- Gen/genes: Con información
- Región rep, participa en la replicación del ADN (entre otras funciones) y en ella que se incluye el
- oriV (Origen replicación vegetativa)
Modelo de replicación THETA (plásmidos) semiconservativa
- Una helicasa abre las dos hebras en oriV
- Se une el cebador y comienza la replicación
- Dos posibilidades:
- Una sola horquilla de replicación (unidireccional). Sigue la replicación hasta que llega otra vez a oriV.
- Dos horquillas (bidireccional). Empiezan en sentido contrario y se unen en la mitad de la molécula
- Se separan las dos copias
- Típica de plásmidos de bacterias Gram negativas
Modelo replicación en sigma o Círculo Rodante. Semiconservativa
- Una endonucleasa corta una de las cadenas en oriV
- Una helicasa va desenrollando la cadena cortada y desplazándola
- El extremo 3’-OH libre de la cadena cortada actúa de cebador
- Una ADN polimerasa va copiando la cadena hasta que llega otra vez al oriV
- Una ligasa cierra la cadena nueva
- Una ADN polimerasa copia la segunda cadena del plásmido original
Capacidad de transferencia de una célula a otra
Autotransferencia y movilización
¿Qué genes poseen los plásmidos conjugativos?
Genes tra y ori T
¿Qué genes poseen los plásmidos no conjugativos?
Plásmidos movilizables (ori T y genes mob)
y los plásmidos conjugativos les ayudan (genes tra)
- Plásmidos que llevan insertados fragmentos de ADN (gen), que nosotros queremos introducir o expresar en el hospedador.
- Para poder ser insertado es necesario cortar el vector con enzimas de restricción y una vez introducido pasa a denominarse: vector recombinante.
Vectores de clonación
