Tema 2: Métodos de estudio e investigación I Flashcards
Cómo se denomina en microscopía a la capacidad de presentar distintos y separados dos puntos adyacentes a una distancia mínima?
Poder de Resolución
Cómo se denomina en microscopía a la distancia mínima entre dos puntos para que estos puedan distinguirse como tales?
Límite de resolución
Límite de resolución del ojo humano
200 µm
Límite de resolución de Microscopio óptico
0,2 µm
Pasos de preparación de muestras para M. óptica
1) Fijación
2) Inclusión
3) Microtomía
4) Tinción
En qué consiste el proceso de fijación de una muestra
Mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo
Qué técnica de preparación de muestras se encarga de mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo
Fijación
Objetivos de la fijación
Detener degradación, Insolubilizar componentes, Dar consistencia, Facilitar tinción
Tipos de fijación
física y química
En qué se basa la fijación física
criofijación (congelación)
Con qué tipo de fijación se relaciona la criofijación
Física
En qué consiste la criofijación
Congelación de tejido fresco
Inconveniente de la criofijación
Reversibilidad del proceso
Cuando se usa la fijación física?
Cuando no se puede usar la química
técnicas de criofijación física
Tratamiento previo con crioprotectores, congelación instantánea
Crioprotectores (ejemplos)
DMSO, propitenglicol, sacarosa, glicerol
Funciones de los crioprotectores
Evita que se formen cristales, aumentan densidad
Función de congelación instantánea en criofijación
evita formación de cristales, evita rotura de estructuras tisulares
Qué se utiliza para la congelación instantánea de la criofijación
N2 líquido, gas carbónico
En qué se basa la fijación química
Mantener estructuras tisulares mediante el empleo de agentes químicos
Tipos de agentes químicos en fijación química
Entrecruzantes, oxidantes y precipitantes
Ejemplos de agentes entrecruzantes (fijación química)
Formaldehído, glutaraldehído
Qué tipo de agente es el formaldehído en fijación química
Entrecruzante
Qué tipo de agente es el glutaraldehído en fijación química
Entrecruzante
Qué es la trama espacial
Gel que se forma por acción de agentes entrecruzantes en fijación química
En qué se basa la acción de agentes entrecruzantes en fijación química
Cambio de proteínas, de sólidas a gel, formando la trama espacial
Funciones de la trama espacial
preserva posición, da consistencia al tejido
Cuál de los dos agentes entrecruzantes es buen fijador de membranas
Glutaraldehído
Qué agente entrecruzante da una fijación reversible
Formaldehído
Qué agente entrecruzante da una fijación irreversible
Glutaraldehído
En qué tipo de microscopía se usa formaldehído como agente entrecruzante
Óptica
En qué tipo de microscopía se usa glutaraldehído como agente entrecruzante
Óptica y electrónica
Qué agente entrecruzante se usa para M. óptica
glutaraldehído y formaldehído
Qué agente entrecruzante se usa para M. electrónica
Glutaraldehído
Componentes de formaldehído
Aminas, Aa aromáticos
Componentes de glutaraldehído
Grupos polares, malla proteica
Ejemplo de agente oxidante de fijación química
tetraóxido de osmio
característica principal de agentes oxidantes en fijación química
Electrodensos (aportan contraste)
Ejemplo de agentes precipitantes en fijación química
Ácido pícrico
En qué se basan los agentes precipitantes (fijación química)
Desnaturalización de proteínas
Qué tipo de agente químico da contraste a las muestras (fijación química)
Oxidantes
Qué tipo de agente químico desnaturaliza proteínas (fijación química)
Precipitantes
Con qué agente químico se relaciona el líquido de Bovin (fijación química)
precipitantes
Por qué se utiliza el líquido de Bovin en fijación química
Porque no existe fijador universal
Qué tipo de agente químico es el tetraóxido de osmio
Oxidante
Qué tipo de agente químico es el ácido pícrico
Precipitante
Qué técnica de preparación de muestras se basa en infiltración de un medio para dar consistencia al tejido y obtener cortes finos
Inclusión
Cuáles son los medios de inclusión (para M. óptica)
Parafina y epoxi
En qué técnica de preparación de muestras se usan la parafina y el epoxi?
Inclusión
Cuál es el medio de inclusión más usado (M. óptica)
Parafina
Pasos previos a la inclusión
Deshidratación y aclaramiento