Tema 2: Métodos de estudio e investigación I Flashcards

1
Q

Cómo se denomina en microscopía a la capacidad de presentar distintos y separados dos puntos adyacentes a una distancia mínima?

A

Poder de Resolución

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Q

Cómo se denomina en microscopía a la distancia mínima entre dos puntos para que estos puedan distinguirse como tales?

A

Límite de resolución

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Q

Límite de resolución del ojo humano

A

200 µm

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4
Q

Límite de resolución de Microscopio óptico

A

0,2 µm

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5
Q

Pasos de preparación de muestras para M. óptica

A

1) Fijación
2) Inclusión
3) Microtomía
4) Tinción

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6
Q

En qué consiste el proceso de fijación de una muestra

A

Mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo

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7
Q

Qué técnica de preparación de muestras se encarga de mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo

A

Fijación

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8
Q

Objetivos de la fijación

A

Detener degradación, Insolubilizar componentes, Dar consistencia, Facilitar tinción

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9
Q

Tipos de fijación

A

física y química

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10
Q

En qué se basa la fijación física

A

criofijación (congelación)

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11
Q

Con qué tipo de fijación se relaciona la criofijación

A

Física

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12
Q

En qué consiste la criofijación

A

Congelación de tejido fresco

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13
Q

Inconveniente de la criofijación

A

Reversibilidad del proceso

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14
Q

Cuando se usa la fijación física?

A

Cuando no se puede usar la química

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15
Q

técnicas de criofijación física

A

Tratamiento previo con crioprotectores, congelación instantánea

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16
Q

Crioprotectores (ejemplos)

A

DMSO, propitenglicol, sacarosa, glicerol

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17
Q

Funciones de los crioprotectores

A

Evita que se formen cristales, aumentan densidad

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18
Q

Función de congelación instantánea en criofijación

A

evita formación de cristales, evita rotura de estructuras tisulares

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19
Q

Qué se utiliza para la congelación instantánea de la criofijación

A

N2 líquido, gas carbónico

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20
Q

En qué se basa la fijación química

A

Mantener estructuras tisulares mediante el empleo de agentes químicos

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21
Q

Tipos de agentes químicos en fijación química

A

Entrecruzantes, oxidantes y precipitantes

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22
Q

Ejemplos de agentes entrecruzantes (fijación química)

A

Formaldehído, glutaraldehído

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23
Q

Qué tipo de agente es el formaldehído en fijación química

A

Entrecruzante

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24
Q

Qué tipo de agente es el glutaraldehído en fijación química

A

Entrecruzante

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25
Q

Qué es la trama espacial

A

Gel que se forma por acción de agentes entrecruzantes en fijación química

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26
Q

En qué se basa la acción de agentes entrecruzantes en fijación química

A

Cambio de proteínas, de sólidas a gel, formando la trama espacial

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27
Q

Funciones de la trama espacial

A

preserva posición, da consistencia al tejido

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28
Q

Cuál de los dos agentes entrecruzantes es buen fijador de membranas

A

Glutaraldehído

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29
Q

Qué agente entrecruzante da una fijación reversible

A

Formaldehído

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30
Q

Qué agente entrecruzante da una fijación irreversible

A

Glutaraldehído

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31
Q

En qué tipo de microscopía se usa formaldehído como agente entrecruzante

A

Óptica

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32
Q

En qué tipo de microscopía se usa glutaraldehído como agente entrecruzante

A

Óptica y electrónica

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33
Q

Qué agente entrecruzante se usa para M. óptica

A

glutaraldehído y formaldehído

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34
Q

Qué agente entrecruzante se usa para M. electrónica

A

Glutaraldehído

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35
Q

Componentes de formaldehído

A

Aminas, Aa aromáticos

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36
Q

Componentes de glutaraldehído

A

Grupos polares, malla proteica

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37
Q

Ejemplo de agente oxidante de fijación química

A

tetraóxido de osmio

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38
Q

característica principal de agentes oxidantes en fijación química

A

Electrodensos (aportan contraste)

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39
Q

Ejemplo de agentes precipitantes en fijación química

A

Ácido pícrico

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40
Q

En qué se basan los agentes precipitantes (fijación química)

A

Desnaturalización de proteínas

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41
Q

Qué tipo de agente químico da contraste a las muestras (fijación química)

A

Oxidantes

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42
Q

Qué tipo de agente químico desnaturaliza proteínas (fijación química)

A

Precipitantes

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43
Q

Con qué agente químico se relaciona el líquido de Bovin (fijación química)

A

precipitantes

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44
Q

Por qué se utiliza el líquido de Bovin en fijación química

A

Porque no existe fijador universal

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45
Q

Qué tipo de agente químico es el tetraóxido de osmio

A

Oxidante

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46
Q

Qué tipo de agente químico es el ácido pícrico

A

Precipitante

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47
Q

Qué técnica de preparación de muestras se basa en infiltración de un medio para dar consistencia al tejido y obtener cortes finos

A

Inclusión

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48
Q

Cuáles son los medios de inclusión (para M. óptica)

A

Parafina y epoxi

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49
Q

En qué técnica de preparación de muestras se usan la parafina y el epoxi?

A

Inclusión

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50
Q

Cuál es el medio de inclusión más usado (M. óptica)

A

Parafina

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51
Q

Pasos previos a la inclusión

A

Deshidratación y aclaramiento

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52
Q

En qué se basa la deshidratación previa a la inclusión

A

Inmersión sucesiva en alcoholes de degradación creciente

53
Q

En qué se basa el aclaramiento previo a la inclusión

A

Sustitución de etanol por disolvente orgánico

54
Q

Disolventes orgánicos usado en aclaramiento previo a la inclusión

A

Benzol, xilol, tolueno

55
Q

Proceso de preparación de muestras en que se usan benzol, xilol y tolueno

A

Aclaramiento previo a la inclusión

56
Q

Por qué se realiza un aclaramiento antes de la inclusión

A

Porque el etanol no se mezcla bien con la parafina

57
Q

Función de epoxi y parafina

A

dar consistencia al tejido

58
Q

Qué técnica de preparación de muestras se basa en instrumentos de precisión para obtener cortes finos y uniformes

A

Microtomía

59
Q

Tipos de intrumentos en microtomía

A

Microtomo, criostato, vibratomo, (ultramicrotomo)

60
Q

Tipo de muestras para microtomo

A

Parafina

61
Q

con qué instrumento de microtomía se relaciona la parafina

A

Microtomo

62
Q

Tipo de muestras para criostato

A

congeladas

63
Q

Con qué instrumento de microtomía se relacionan las muestras congeladas

A

Criostato

64
Q

Tipo de muestras para vibratomo

A

Tejido fresco

65
Q

Por qué se caracteriza el vibratomo

A

manipulación rápida

66
Q

Con qué instrumento de microtomía se relacionan los tejidos frescos

A

Vibratomo

67
Q

Qué instrumento de microtomía da manipulación rápida

A

Vibratomo

68
Q

Tamaño cortes de Microtomo

A

3 - 5 µm

69
Q

Tamaño de cortes de Criostato

A

8 - 15 µm

70
Q

Tamaño de cortes de Vibratomo

A

25 µm

71
Q

Donde tiene importancia el ultramicrotomo

A

Microscopía electrónica

72
Q

Qué técnica de preparación de muestras en M. Óptica se basa en dar contraste a las células

A

Tinción

73
Q

Paso previo a tinción

A

Rehidratación

74
Q

Cuándo hay que desparafinar en preparación de muestras para M.O.?

A

En tinción

75
Q

Estructura general de un colorante

A

Cromóforo y auxocromo

76
Q

Función del cromóforo

A

dar color

77
Q

qué parte del colorante se encarga de dar color

A

cromóforo

78
Q

Función del auxocromo

A

Afinidad colorante-célula

79
Q

Qué parte del colorante se encarga de la afinidad colorante-célula

A

auxocromo

80
Q

Tipos de colorantes

A

Básicos y ácidos

81
Q

Grupo auxocromo básico

A

Amina

82
Q

carga neta de colorantes básicos

A

positiva

83
Q

Grupo auxocromo ácido

A

carboxilos

84
Q

carga neta de colorantes ácidos

A

negativa

85
Q

Componentes de colorantes básicos

A

ANs, glucosaminoglucanos, proteínas ácidas

86
Q

Componentes acidófilos (de colorantes ácidos)

A

Proteínas citoplasmáticas, gránulos de secreción y colágeno

87
Q

Ejemplos de colorantes básicos

A

hematoxilina, azul de metileno

88
Q

Qué tipo de colorante es la hematoxilina

A

Básico

89
Q

Qué tipo de colorante es el azul de metileno

A

Básico

90
Q

Ejemplos de colorantes ácidos

A

eosina, fucsina

91
Q

Qué tipo de colorante es la eosina

A

ácido

92
Q

Qué tipo de colorante es la fucsina

A

ácido

93
Q

Longitud de onda de M. Óptico de campo claro

A

400 - 700 µm

94
Q

En qué tipo de microscopía se usa contraste de fases

A

Óptica

95
Q

En qué se basa el contraste de fases

A

ver células vivas sin tinción

96
Q

el contraste de fases usa el microscopio de _______

A

Normasky

97
Q

Qué tipo de M. óptica se encarga de ver células vivas sin tinción

A

contraste de fases

98
Q

ejemplo de sonda fluorescente para M. óptica

A

DAPI

99
Q

Qué color aporta el DAPI

A

Azul

100
Q

Qué tipo de M. óptica tiene utilidad en detección de proteínas u otras moléculas mediante aminoácidos marcados con sondas fluorescentes

A

Fluorescencia

101
Q

Con qué tipo de M. óptica se relaciona el marcaje múltiple

A

fluorescencia

102
Q

Qué tipo de M. óptica usan fluorescencia

A

Fluorescencia y Confocal

103
Q

Qué tipo de M. óptica usa un láser

A

Confocal

104
Q

Sondas fluorescentes usadas en confocal

A

DFP, YPP, GFP

105
Q

En qué consiste la acción del detector en la confocal?

A

Selecciona fluorescencia y elimina la que está por encima y por debajo

106
Q

Qué tipo de M. óptica permite fluorescencia en células vivas

A

Confocal

107
Q

Qué tipo de M. óptica permite la localización de proteínas después de un tiempo

A

Confocal

108
Q

Qué tipo de microscopía no tiene lentes, sino bovinas?

A

Electrónica

109
Q

DeBroglie sobre ME

A

Descubre movimiento de electrones

110
Q

Busch sobre ME

A

Los campos magnéticos pueden utilizarse como lentes para enfocar haz de electrones

111
Q

Ruska y Knoll

A

Diseñan primer ME

112
Q

ME en 1935

A

Primer ME con PR > M. óptica

113
Q

Quién descubre mov de electrones en ME

A

DeBroglie

114
Q

Quién afirma que los campos magnéticos pueden servir de lentes en ME

A

Busch

115
Q

Quienes diseñaron ME

A

Ruska y Knoll

116
Q

Tipos de ME

A

de transmisión (MET), de barrido (MEB)

117
Q

Dónde se genera el haz de electrones en MET

A

Cátodo

118
Q

Función del Alto Vacío en MET

A

hace que los electrones vayan hacia la muestra sin chocar con ésta

119
Q

Límite de Resolución de MET

A

0,1 nm

120
Q

Partes de las bobinas electromagnéticas de MET

A

Condensador, objetivos, lentes proyectoras

121
Q

Metales pesados usados en MET

A

Citrato de plomo, osmio, acetato de uracilo

122
Q

Sustancias usadas en fijación de ME

A

Glutaraldehído, tetraóxido de osmio

123
Q

En qué microcopía se usa tetraóxido de osmio?

A

Electrónica

124
Q

Qué fija el glutaraldehído?

A

Proteínas

125
Q

Función del tetraóxido de osmio en fijación de ME?

A

Estabilización de bicapas lipídicas

126
Q

Qué fijador de ME fija proteínas?

A

Glutaraldehído

127
Q

Qué fijador de ME estabiliza bicapas lipídicas?

A

Tetraóxido de osmio

128
Q
A