Tema 2 Flashcards
¿Qué es la Espectrometría de Masas?
Obtención de iones en estado gaseoso a partir de moléculas para luego separarlas en función de su relación masa/carga
¿Qué caracteriza a la Espectrometría de Masas?
Versatilidad: Aplicable a todo tipo de muestras
Sensibilidad: Detección a muy baja []
Especificidad: Detecta y diferencia cualquier molécula
¿Qué diferencias tiene la Espectrometría de Masas y el Resto?
- Procesos Químicos, no Físicos
- Destrucción de la muestra
- Los iones se destruyen al detectarse
- No usa radiación electromagnética
¿Cuál es el proceso del Espectrómetro de Masas?
- Volatilizar la muestra
- Ionizar las moléculas en estado gaseoso (Nube Iónica)
- Acelerar Iones (Campo Eléctrico)
- Separar iones por masa/carga (Campo Magnético)
- Detecta iones
¿Qué sistemas de Vaporización e Ionización se dan en la Espectrometría de Masas?
El Método ESI y el Método MALDI
¿En qué se basa el Método ESI en la Espectrometría de Masas?
En la Ionización por Pulverización Eléctrica
Su espectro presenta muchos picos
Se acopla a Cromatografía e medo Líquido
¿En qué se basa el Método MALDI en Espectrometría de Masas?
Desorción por láser asistida por matriz
La muestra se solidifica y excita con un láser de ionización y volatilización de la muestra
Identifica cualquier organismo
¿En qué se basa el Método MALDI en la Espectrometría de Masas?
Desorción por láser asistida por matriz
La muestra se solidifica y excita con un láser. Se ioniza y volatiliza la muestra.
Permite identificar cualquier organismo.
¿En qué consiste el Método MALDI en la Espectrometría de Masas?
Desorción por láser asistida por matriz.
La muestra se solidifica y excita con un láser. Ionización y volatilización de la muestra.
Permite identificar cualquier organismo.
¿Qué es el Analizador de Masa en la Espectrometría de Masas?
Separa la mezcla de iones según su relación masa/carga
¿Qué es el Analizador de Sector Magnético como Analizador de Masa en la Espectrometría de Masas?
Acelera los iones. Un imán los desplazará en círculo.
¿Qué es el Espectrómetro de Masa Cuadripolar (Q) como Analizador de Masa en la Espectrometría de Masas?
4 barras alargadas en cuadrado
Conectadas eléctricamente en pares opuestos
A estos pares (polos) se aplica tensión por radiofrecuencia
Cuando haya sintonía con el ión, éste vanza
El resto se desvían
¿Qué es el Analizador de Masas de Tiempo de Velo (TOF) como Analizador de Masas en Espectrometría de Masas?
Separa iones según el tiempo que tarda en llegar al detector
¿Cómo funciona el Sistema de Detección y Registro en la Espectometría de Masas?
Un cátodo emisor recibe el impacto de partículas cargadas, y emite electrones. El espectro resultante se convierte en gráfico según su relación masa/carga. La señal del ión aparece en varios picos distribuidos según sus isótopos.
¿Qué es el Pico Molecular en la gráfica del Sistema de Detección y Registro de la Espectrometría de Masas?
Señal producida por el ión al perder un electrón
¿Qué es el Pico base en la gráfica del Sistema de Detección y Registro de la Espectrometría de Masas?
Es siempre la más intensa, corresponde al 100%
¿Qué es el Pico de Fragmentación, en la gráfica del Sistema de Detección y Registro en la Espectrometría de Masas?
Señales de fragmentos obtenidos por descomposición del ión molecular
¿Cuáles son las aplicaciones de la Espectrometría de Masas?
- Screening NEonatal
- Monitorización de Fármacos
- PRoteómica
- Toxicología (Drogas)
¿Qué es el Proteoma?
Conjunto de proteínas que un organismo sintetiza a partir de los genes que tiene, determina cómo lucha nuestro cuerpo contra agentes infecciosos.
¿Qué es el Genoma?
Contenido de DNA que contiene un organismo y que incluye cada uno de los genes que porta información para la síntesis de proteínas.
¿En qué se basan las Cromatografías?
Se basa en el diferente comportamiento de los componentes de la muestra al ser desplazados o retenidos por la acción conjunta y contrapuesta de una fase móvil que se hace pasar a través de una fase estacionaria.
¿Qué tipo de Análisis se da en las Cromatografías?
Análisis Cuntitativo y Cualitativo
¿Qué es la fase Móvil?
Eluyente. Gas o Líquido que ejercerá el efecto de DESPLAZAMIENTO de los componentes de la muestra.
¿Qué es la Fase Estacionaria? (SOLVENTE)?
Solvente. Incluida en un soporte que puede ser una columna o una superficie sólida y retendrá los componentes de la misma. RETENCIÓN.
¿Qué relación existe entre la Fase Móvil y la Fase Estacionaria’
Componentes de unión Fuerte con Fase Estacionaria = Movimiento lento en la fase móvil
Componentes de unión DÉBIL en Fase Estacionaria = Movimiento Rápido por la Fase Móvil
¿Cuáles son los tipos de Cromatografía?
Según Fase Móvil: Líquida o Gas
Según Soporte de Fase Estacionaria: Plana o Columna
Según Principio de Separación
¿Cómo son las Cromatografías según el Soporte de su Fase estacionaria?
Plana
- Soporte plano de papel o gel.
- Fase móvil se desplaza por capilaridad o gravedad.
- Se revelan por fluorescencia o Luz UV.
Columna
- Tubo relleno de fase estacionaria (líquida o sólida)
- Se inyecta fase móvil (gas o líquido)
- Al final de la columna se recoge volumen según tiempo transcurrido.
¿Cuáles son los Tipos de GRomatografía según su Principio de Separación?
- Cromatografía de Penetralidad o Exclusión
- Cromatografía de Adsorción
- Cromatografía de Reparto
- Cromatografía de Intercambio Iónico
- Cromatografía de Afinidad
¿Qué grandes tipos de Cromatografía hay?
- Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)
- Cromatografía de Gases
- Comatografía Plana
¿En qué se basa la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
- Determina gran número de compuestos en tiempos cortos.
- Más usado que el de gases.
- Determina: Hormonas, Catecolaminas, Aminoácidos, fármacos en suero y orina.
¿Qué detecta la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución?
Determina Hormonas, catecolaminas, aminoácidos y fármacos en suero y orina.
¿Qué componentes tiene la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
- Sistema impulsor de fase móvil (bomba)
- Fase estacionaria de muchas naturalezas
- Inyector de muestra
- Detector de varios tipos
- Sistema de registro-Integrador
¿Por qué se caracteriza la columna de separación en la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
Por estar precedida por una precolumna que impide la entrada de contaminantes.
¿Qué tipos de Fase Móvil tiene la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
Dos tipos:
— Móvil apolar —> Ciclohexano
— Móvil polar —> Agua
¿Por qué se caracteriza la Fase Estacionaria en la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
Que varía según su naturaleza:
— Polar
— Apolar
— Según su principio de separación
— Según el tipo de Soporte: Poroso o Película
¿Qué tipos de Detector tiene la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
Varios tipos:
- De absorbancia
- De refracción
- De fluorescencia
- De amperometría
- Espectrómetro de masas
¿Cuál es el procedimiento o fundamento de la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC)?
Una bomba impulsa de forma constante la fase móvil, polar o apolar, en forma de flujo constante y estable, que pasa a través del inyector y por la precolumna y columna.
¿Cuál es la Cromatografía de Gases más usada?
La cromatografía de Gas-Líquido (GLC)
¿En qué se basa la Cromatografía de Gases?
La fase móvil es gaseosa y la estacionaria líquida, retenida en la superficie de un sólido inerte.
¿Cuáles son los componentes de la Cromatografía de Gases?
- Fase Móvil: Gas Portador
- Fase estacionaria: Líquido no volátil.
- Columnas de desarrollo.
- Sistema de Inyeccion de muestra
- Horno para meter la columna
- Sistema de Detección
¿Qué gases componen la Fase Móvil en la Cromatografía de Gases?
Gases inertes:
— Helio
— Argón
— Neón
—Hidrógeno
Sin agua o impurezas
¿De qué está rellena la Columna de Desarrollo en la Cromatografía de Gases?
De tierra de Diatomeas o Microesferas de Vidrio
¿Qué sistemas de Detección usa la Cromatografía de Gases?
- Espectrometría de masas
- Ionización de llama
¿Cuál es el procedimiento o fundamento de la Cromatografía de Gases?
La muestra se volatiliza y luego se inyecta en la columna cromatográfica. La separación se da por solubilidad y difusión.
¿Cómo se da la separación de las moléculas en la Cromatografía de Gases?
Por solubilidad y Difusión.
¿Qué posibilidades hay en la Cromatografía Plana?
- La cromatografía en papel
- La cromatografía de Capa Fina
¿Cómo es la Fase Móvil en la Cromatografía en papel?
Disolventes orgánicos acuosos
¿Cómo es la Fase Estacionaria en la Cromatografía en papel dentro de la Cromatografía Plana?
Es agua retenida en fibras de celulosa.
¿En qué se basa la Cromatografía de Capa Fina dentro de la Cromatografía Plana?
En la cromatografía de reparto líquido-líquido, con proceso de adsorción.
¿Cómo es la Fase Líquida de la Cromatografía de Capa Fina, dentro de la Cromatografía Plana?
Es líquida, y difunde por capilaridad ascendente.
¿Cómo es la Fase Estacionaria dentro de la Cromatografía de Capa Fina, dentro de la Cromatografía Plana?
Líquida unida a gel. En vidrios o plásticos.
¿Qué es el Rf, dentro de la Cromatografía de Capa Fina, en la Cromatografía Plana?
Relación entre distancias recorridas por el soluto y por el disolvente desde el origen de la placa.
Es un valor constante para cada compuesto en las distintas cromatografías.
¿Qué es la Osmometría?
Medida del efecto osmótico de una solución.
Número de partículas de soluto disueltas en ella, independientemente del tamaño o carga de los iones o moléculas presentes.
¿Qué tipo de Análisis es la Osmometría?
Análisis cuantitativo.
¿Qué es la Osmolalidad?
Número de partículas de soluto por unidad de masa de disolvente (mOsm/kg)
Medida masa/masa.
¿Qué es la Osmolaridad?
Número de partículas de soluto por unidad de volumen de la disolución. (mOsm/l)
Medida masa/volumen
¿Qué instrumento se usa en la Osmometría?
El Osmómetro
¿Qué tipos de Osmómetro existen?
- Osmómetro de Punto de Congelación
- Cuando aumenta la osmolalidad, disminuye el punto de congelación.
- Osmómetro de Presión de Vapor o Punto de Condensación.— Cuando aumenta la osmolalidad, aumenta la presión de vapor.
¿En qué se basan las Técnicas Electroquímicas?
Se basan en la medida de una señal eléctrica que se produce en un sistema en el que tiene lugar una reacción química.
¿Qué es la Potenciometría?
Diferencia de potencial entre un electrodo indicador y uno de referencia.
¿Que es la Potenciometría Directa e Indirecta?
Potenciometría Directa: No se diluye la muestra
Potenciometría Indirecta: Se diluye la muestra
¿Para qué se usa la potenciometría?
Para medir componentes Iónicos y CO2.
¿Qué mide la Potenciometría, y en dónde?
En Suero, Plasma y Orina, miden:
— H
— Na
— K
— Cl-
— Ca2
— Li
¿Qué tipos de Electrodo Indicador, dentro de la Potenciometría, existen?
- Electrodo de Membrana de Vidrio
- Electrodo de Membrana Líquida
- Electrodo de CO2 o Severinghaus
- Electrodo de Membrana Sólida
Dentro de la Potenciometría, ¿Qué mide el Electrodo de Membrana de Vidrio?
Mide pH, Na y K.
¿Qué mide el Electrodo Severinghaus?
La presión de CO2
¿Qué mide el Electrodo de Membrana Líquida, dentro de la Potenciometría?
Mide:
- Ca2
- K
- NO3-
- ClO4
- BF4-
¿De qué está hecha la Membrana Líquida del Electrodo de Membrana Líquida, en Potenciometría?
De una sustancia porosa, de acetato de celulosa saturada con sustancia hidrófoba.
¿Dentro de la Potenciometría, qué Electrodo de usa para medir el ión Cl-?
El Electrodo de Membrana Sólida
¿De qué está hecho el Electrodo que mide el Cl-?
De Cristal Sulfuro y Cloruro de Plata
¿Qué es la Amperometría?
Mide la intensidad de corriente cuando se aplica un voltaje.
¿Qué mide la Amperometría?
Presión de O2
¿Cuál es el Electrodo que se usa para medir la pO2?
El electrodo de Clark (O2)
¿De qué está hecho el Electrodo de Clark?
Cátodo de Platino
Ánodo de Ag/AgCl
¿Qué es la Columbimetría?
Cantidad de carga necesaria para convertir por electrolisis el componente de una sustancia que se va a analizar en otra sustancia.
¿Qué mide la Columbimetría?
Cl-
¿Qué son los Biosensores?
Dispositivos que acoplan una actividad Biológica que se quiere medir en una corriente eléctrica.
¿Qué electrodos se usan en los Biosensores?
Electrodos de Membrana Enzimática
¿En qué se basan los Electrodos de Membrana Enzimática, en los Biosensores?
Utilizan un agente biológico (enzima) para detectar una especie química.
¿En qué se basan los Electrodos de Membrana Enzimática, en los Biosensores?
Utilizan un Agente Biológico (enzima) para detectar una especie química.
¿En qué se basan los Electrodos de Membrana Enzimática, sujetos a un método Amperométrico para Biosensores?
La enzima inmovilizada en una membrana en presencia del sustrato desencadena la formación de un compuesto como Peróxido de Hidrógeno. Crea un flujo de electrones captado por el electrodo.
¿En qué se basan los Electrodos de Membrana, con un método Potenciométrico para Biosensores?
La reacción enzimática se acopla a la generación de un ión o un gas que serán detectados por electrodos selectivos.
¿Qué genera la enzima Ureasa sobre la Urea, en Biosensores?
NH4
¿Qué acción realiza la enzima Ureasa sobre la Urea?
NH4
¿Qué Acción realiza la Descarboxilasa o la Desaminasa?
Genera CO2 y NH3
¿Qué es la Automatización Parcial?
Requiere de la participación activa o control por parte de varios técnicos de laboratorio.
¿Qué es la Automatización Parcial?
Requiere una participación activa o control por parte de varios técnicos de laboratorio.
¿Qué es la Automatización Parcial?
Requiere una participación activa o control por parte de varios técnicos de laboratorio.
¿Qué fases pueden Automatizarse Parcialmente?
Fase Preanalítica, Fase Analítica, Fase Post-Analítica
¿Qué son los Autoanalizadores, dentro de la Automatización de la Fase Analítica?
Existen:
- Dispositivo de Carga
- Dispositivo de Identificación de Muestras
- Dispositivo de Dispensación de Reactivos.
- Dispositivo de Toma y Dispensación de Muestras.
- Dispositivo de Almacenaje de Reactivos.
- Sistema de Medida
- Cubeta de Reacción
- Sistema informático
¿Qué sistema de Medida se usa en los Autoanalizadores de la Automatización de la Fase Analítica?
- Espectrofotometría
- Fluorescencia
- Nefelometría
- Electroquimia.
¿Qué Sistemas de Medidas se usan en los Autoanalizadores de la Automatización de la Fase Analítica?
- Espectrofotometría
- Fluorescencia
- Nefelometría
- Electroquimia
¿De qué están hechas las cubetas de los Autoanalizadores, en la Automatización de la Fase Analítica?
De Vidrio o Plástico
¿En qué se basa la Automatización de la Fase Post-Analítica?
- Generar Pruebas Reflejas
- Crear archivos de muestras
¿En qué se basa la Automatización Total del Laboratorio?
Diseño de sistemas que permiten la obtención de resultados analíticos sin apenas intervención humana.
Cita elementos propios de la Automatización Total del Laboratorio:
- Cinta Transportadora
- Brazo robotizado
- Sistemas informáticos
