Techniques analytiques Flashcards

1
Q

Définition électrophorèse ?

A

Méthode de séparation des constituants d’un mélange basée sur différentes vitesses procurées par la charge elec/taille/forme dans un champs électrique.

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2
Q

Formule liée à la charge électrophorétique U ?

A

v = U.E

U = Q/(6pi . n . r)

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3
Q

Que contient la phase liquide pr électrophorèse ?

A

des électrolytes qui permettent de diriger et soutenir le champs élec.

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4
Q

Différents gels pr électrophorèse ?

A

agarose, acétate de cellulose, polyacrylamide

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5
Q

Qu’est ce que le flux électro-osmotique ?

A

C’est un courant d’électroendosmose, qd toute la phase liquide elle-même est mise en mouvement.

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6
Q

Quelles sont les méthodes de révélation/detection en electrophorèse ?

A

photomoètre (pdnt migration)
BET, MidoriGreen, Bleu Coomassie, Argent (migration ended)

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7
Q

Comment sont présentés les résultats en electrophorèse ?

A

Electrophorégramme :
Absorbance en fonction d migration
Surface = K*[molec]

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8
Q

Quels sont les 3 types d’électrophorèse ?

A

Electrophorèse de zone : séparation fct° charge/PM
Isoélectrofocalisation : gradient de pH
Isotachophorèse : gradient de champs électrique (s’arrête au nv des electrolytes)

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9
Q

Formation gel d’acrylamide

A

Acrylamide = monomère
Le Bisacrylamide = agent pontant
=> mailles

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10
Q

Calcul du taux d’un gel polyacrylamide

A

T = (macryl*mbisacryl)/Vgel

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11
Q

2 types de gel dans un SDS ?

A

Gel d’empilement/concentration/stacking
Gel de séparation/migration/solving

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12
Q

Principe d’une électrophorèse Bidimensionnelle ?

A

Ex : IEF suivi d’un SDS-PAGE (double migration successives)

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13
Q

Définition d’un chromatographie ?

A

Méthode de séparation basée sur la différence de vitesse des constituants procurée par l’interaction de chaque molec avec une phase mobile et une stationnaire

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14
Q

Que contrôle le module d’injection ?

A

l’étanchéité
le volume d’échantillon
(l’état liquide/gazeux de l’échantillon)

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15
Q

Qu’appelle-t-on l’élution ?

A

avant : le mouvement de la phase mobile
aujd : on ajt celui des molécules

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16
Q

Comment sont rendus les résultats d’une chromato ?

A

Chromatogramme : signal mesurée par détecteur en fonction temps écoulé depuis injection
S = K*Q

17
Q

HPLC ?

A

High Pressure Liquid Chromatography

18
Q

Quels sont les modes d’élution ?

A

constitution phase mobile : Isocratique / gradient de [C]
pression phase mobile : isobare / gradient de pression
T° des 2 phases : isotherme / gradient de T°

19
Q

La silice (ex de phase stationnaire) est apolaire, comment la rendre apolaire ?

A

Fixation d’autres molec

20
Q

Classer les 8 exemples de phases mobiles vues en cours , de la plus polaire à la plus apolaire

A

eau
acétonitrile
méthanol
isopropanol
dichlorométhane
hexane
phosphate de potassium
heptanesulfate de sodium

21
Q

Définir phase normal et phase inverse ?

A

phase normal : polarité phase fixe > phase mobile
phase inverse : polarité phase fixe < mobile

22
Q

Intérêt phase normales et inverses ?

A

normale : séparer des molec plutôt polaires
inverse : séparer molec plutôt apolaires

23
Q

Quels sont les rôles de la pompe ?

A

conférer débit, appliquer une pression, retirer les gaz dissouts grâce à un dégazeur, (mélanger plusieurs solvants)

24
Q

caractéristiques HPLC de l’IUT

A

débit : mL/min
pression : 400 bar
volume injecté : 20µL
Spectrophotomètre UV : lampe au deutérium

25
Q

Caractéristiques GC IUT

A

Flame ionization detector : FID, le signal est une différence de potentiel
split/splitless
gaz vecteur : N2 ( H2, He ou Ar possibles = gaz stables et inertes à haute T°)