Technique de detection - Reactifs aux acides animés Flashcards
NIN importee de quel domaine scientifique?
Biologie
Couleur du p roduit de réaction de NIN?
pourpre
Conditions de développement de la NIN ?
temp, humidite, qql minutes = pour faire reagir la nin
Compatible avec quels supports ?
papier
Pourquoi est-il important de cibler les acides amines?
-grande chance dans le traces pap = sueur ecrines
-variation de quantite ne change pas dun donneur a un autre
-molecule stable dans le temps
penetre dans le support puis se stabilise (par la cellulose)
–> cible ideale
De quoi sont composes les acides amines? (4) REVOIR STRUCTURE ACIDE AMINE DES 4 DANS LE COURS
Serine
Glycine
Ornithine
Alamine
Quel compose cherche t’on a faire reagir lors de la detection des acides amines?
Celui qui est en commun avec les 4 composes principales (chaine laterale de leurs mol)
Quelles sont les caracteristiques au pdv chimique de la detection des acides am?
etre compatibles avec les reactions in situ, sur support –> preservation du support
rendements et produits de reactions variable
–> entre reactif (mecanismes, intermediaire mol, prod de reaction)
–> pour un mm reactif : variation selon l’acide amine
–> mais du coup efficacite variable des reactifs
Quelles sont les caracteristiques au pdv chimique de la detection des acides am?
-ciblage generiques, non specifique –> on cible une famille
-application sur supports (sem-)poreux car forte affinite aa-cellulose
-nec de preserver (au mieux) l’integrite des supports/traces –> immersion breve et conditions de reaction “douces” car fractio ac.am la + fragile car hydrosoluble
-prod de reaction colore et/ou luminescant
Quand est ce quon detecte les aa dans les seq de detection?
position haute car:
>environnement –> influence deletere
-migration/solubilisation des aa
-stockage non controle (veillessement)
>technique a base aqueuse –> infleuce deletere
-revelateur physique (PD)
-depo mono et multi-metallique (SMD/MMD)
mais
>impact negligeable des techniques sans solvant comme cyano, et depo metallique sous vide (VMD)
Quelles sont les facteurs influencant l’efficacite des techniques ciblant les aas?
controles:
-choix du reactif (IND, NIN, DFO)
-formulation/mode d’application
-conditions environnementales (labo, contexte)
-processus de revelation (quel temp, quel degre d’humidite)
non-controles:
-support
-compositions des secretions
DESSINER STRUCTURE NIN
DANS LE COURS
Quand a ete synthetisee la nin?
en 1910 par Siegfried
Comment apparait la nin?
Pourpre sur une feuille blanche
Quel methode de visualisation utilsie pour voir la nin?
chromatographie
Quand a lieu la premiere utilisation forensique de la nin?
1954
Donner le mecanisme reactionnelle de la nin?
NIN + aa –> Int* (avec anine) + NIN –> Pourpre de Ruhemann
deux mol de nin qui ont reagis avec un ac.am –> Pourpre de Ruhemann
DESSINER PROUPRE DE RUHEMAN
DANS LE COURS
de quoi est compose la phase intermediaire
d’une premier nin qui devient une intermediaire avec une amine
va se rattacher ensuite a une deuzieme nin pour former le pourpre
Est ce que la technique de la detection par la nin est optimale pour tout les ac.am?
non certain ne donne pas le pr mais Cependant, la plupart des ac . aminés présents dans les traces digitales mènent au pR
Ou se situe l’absorption selective de pr? alt et pref?
415nm –> mauve pour alt
550nm –> vert pour pref –> couleur que l’on va choisir pour renforcer le contraste visuel = absorbance selective si on observe a l’oeil nu en lumiere blanche
Que se passe til alors lorsqu’on observe en lumiere verte la nin?
le violet absorbe le vert –> violet ressors plus fonce –> la trace ressort plus fonce
Est-il possible d’observer le resultat de la nin en luminescence?
non a cause de sa structure chimique –> cycle a 6 et le rond est riche en electron a cause des double liaison = pas de plan = pas luminescent
Comment peut on rendre la nin luminescente?
rigidifie le pourpre de r pour quil reste plane ? –> Complexe de coordination et luminescence pR*
ou
modifier la nin pour que le prod soit luminescent ?
Comment peut on rendre le pr plane? Comment apparait alors la trace? dans quel cas c’est utile?
Post traitement aux sels métalliques IIb (ajout d’un ion)
> chgt de la couelur de la trace (pourpre –> orange/rouge)
>luminescence observable a 77k avec un laser Argon
neccessite azote liquide –> pour que les mol bougent moins
trace apparait jaune fluo sur fond noir
cas utile: fond qui gene la revelation de la trace
MONTRER A QUOI RESSEMBLE LA STRUCTURE POUR VOIR LA TRACE NIN AVEC LES IONS METALLIQUES?
VVF
Que peut on utiliser comme autre facon de rendre la mol de nin luminente? def le nom. Donner les 2 types
analogue de la nin –> mol qui ressemble a la nin
-soit analogue structurel: composé ayant une structure chimique similaire à un autre composé, mais différant de celui ci par un certain composant (atome, groupe fonctionnel, sous structure)
-soit analogue fonctionnel: = composé qui présente des propriétés physiques, chimiques, biochimiques ou pharmacologiques similaires à un autre (reagissent de la mm maniere)
Comment sont les analogues a la nin?(de quel type)
analogues structurels et fonctionnels
Quelles sont les caracteristiques requis des analogues fonctionnels et structurels de la nin?
-réaction avec les acides aminés
-propriétés optiques et/ou sensibilité améliorées
(ex. luminescents à T amb après complexation aux sels métalliques)
et si possible …
-peu chers
-solubles dans des solvants non polaires = ne font pas couler les encres
-peu toxiques
Comment est ce que les analogues de la nin etaient luminescent ?
en temp ambiante
5-MXN + Zn avec temp ambiante –> luminescent
Quelles sont les inconveniants des analogues a la nin? Que s’est il donc passe?
-trop cher
au mm moment, une mol est apparu pour sa capacite a detecter les ac. ami et est luminesent sans azote –> DFO
Donner le nom de mol de DFO et dessiner sa structure?
Le 1,8 diazafluorèn 9 one [DFO]
Quand a ete utiliser le DFO en forensique la 1ere fois? pq est il mieux que la nin? est il tjr utilise?
1989
produit de réaction luminescent à T amb sans la nécessité de former un complexe aux sels métalliques -> avantage indéniable sur la NIN
abandonne pour le indanedione/zinc (IND/ZN)
Comment est le mecanisme reactionnel de DFO?
suppose similaire a la NIN
Comment peut on observer le DFO en lumiere blanche? en luminescence?
apparait rose pale mais la plupart du temps on ne le voit pas a l’oeil nu –> parait blanche
il est que luminescent –> orange et traces marron
Quel est sa longueur d’onde d’excitation et demission?
560 (excitation) –> vert (ce quil est)
575 (emission) –> orange (ce quon voit)
Pourquoi peut on observer des pointilles sur les traces ?
cest a cause que la sueur eccrine est a l’ednroit des pores –> flux de crete
Donner la technique de detection des ac.am la plus utilise. nom + nom de la mol + dessin
L’1,2 indanedione [IND] et son dérivé au zinc [IND/Zn]
Quand est ce que le IND a ete utilise en foresique pour la 1ere fois? particularite par rapport a la nin? quel est son inconveniant, solution? ind ou dfo?
1997
produit de réaction luminescent à T amb sans la nécessité de former un complexe aux sels métalliques
sensible au support et condition environnementales –> post traitement au Zn POUVANT ameliorer le resultats
IND < DFO –> Ind a une etape en plus et ind depend de la ou on vit
Pourquoi malgre tout le ind est reste? comment?
probleme de l’humidite a ete regle en donnant une humidite rel
fabrication d’un “premix” integrant sdu ZnCl2 qui va donc donner du IND/Zn
Quelles sont les caracteristiques de ind/zn?
10 sec (10min pour dfo, 24h pour nin)pour avoir des resultats
pas d’influence de l’env
ion zn 2+ marche mieux si on le met avant et il est important
IND/ZN > DFO
Que fait supposement le Zn dans le mecanisme reactionnel de IND/ZN?
Stabilise un intermediaire
Comment peut on voir le resultat d’un test IND/ZN?
que en luminescence
mettre en vert et voir en orange
Que ajoute ton toujours lors d’un test IND/ZN comme autre procede?
ajout de la nin –> les deux se completent
Est ce suffisant de n’appliquer qu’un seul réactif aux ac . aminés?
non
Pourquoi l’ordre de la sequence actuelle est IND/Zn et pas nin?
ind/zn –> luminescent, on lui donne toute les chances
nin –> reagit avec bcp mais pas tout donc on a pas besoin doptimiser
pq pas IND/ZN -> DFO -> NIN ?
3 reactifs -> lourd a mettre en oeuvre, degradation de support pour un meme truc mais chimiquement faisable (2 max)
dfo et ind/zn -> 2 luminescent –> gain nulle
Quelles sont les modes d’application pour les reactifs aux ac.am?
-par immersion brève
-par spray (NIN)
-en “sandwich
Expliquer le mode d’application en sandwich?
a sec
reserve aux doc particulierment fragles ou avec une quantite importante de texte manuscrit
-pas de contact du doc avec un solution liquide (papier buvare qui va etre immerse dans le IND/ZN puis le doc est place entre ces deux papiers puis presser pendant 24h-48h)
-requiert formulation adaptees (IND/ZN en sandwich –> + concentre en reactif_
- - efficace que la methode par immersion
Quelles sont les conditions de developpement (humidite) pour les 3 reactifs? conditions mise en place?
–> luminescence max juste après la sortie de l’étuve (four pendant 20 min et observation direct apres sinon on va perdre de la luminescence)
[IND/Zn]: humidité nécessaire dans le mécanisme réactionnel
–> l’humidité du support suffit, en règle générale
–> problèmes possibles si manque ou excès
Quelles sont les appareil utilise pour les 3 reactifs?
NIN –> enceinte climatique
DFO –> Etuve (sec)
Ind/Zn –> Presse a chaud
Qu’est ce qui est se passe lors de la formulation des reactifs aux ac.am?
-nombreuses variantes
-neccessite d’une sol legerement acide (presence acide acetique)
-compromis entre solubilisation et preservation des encres
car [NIN, DFO, IND] peu solubles dans les solvants apolaires
-pré solubilisation dans méthanol/éthanol/acide acétique
–> ! effets délétères sur texte manuscrit
solvants porteurs apolaires
PQ l’encre est un probleme pour les reactif? Quelles sont les solutions?
-si bcp d’encre –> sandwich sinon certaines encres peuvent couler lors de la phase d’immersion
▪ particulièrement problématique en luminescence (on voit lencre qui a coule)
▪ NIN faiblement impactée
solution#1: formulation adaptée ex. “IND/Zn ink “ ; méthanol remplacé par CH 2 Cl 2
solution #2: application en sandwich
–> efficacité moindre par rapport à la formulation classique
Que faut il faire avant de faire une application sur un support? comment faire?
Vérification de l’efficacité d’une solution préparée
-neccessaire avant toute utilisation
2 manieres:
traditionnelle –> trace digitale sur support usuel (papier) (avant mais etant trop dependant du donneur et on savait pas si cetait a cause du donneur ou de la solution)
standardise: “test strip” –> Avant dappliquer sur un piece traces artificielle
Expliquer le “test-strip”
solution imprimée = mélange d’acides aminés
concentrations décroissantes (1/10 –>1/10’000
bande avec 4 carre: on doit observer 3 carre pour nin en lumiere blanche et 4 en luminecence pour IND/Zn pour prouver de l’efficacite du test
Que se passe til si un doc est mouille? consequence?
-solubilisation des acides aminés (traces)
-dégradation des performances de détection (–>non détection)
-réactifs aux acides aminés éliminés de la séquence (préservation de l’intégrité chimique des traces en
-premières techniques appliquées = celles ciblant les lipides ou la fraction non hydrosoluble
