T2-Caracterização, Classificação e Identificação Flashcards
1
Q
Quais as capacidades dos seres vivos?
A
- Utilização de alimentos como fonte de energia
- Síntese de substâncias e formação de estruturas celulares
- Excreção
- Resposta a estímulos exteriores e alterações do ambiente
- Multiplicação
- Mutação
2
Q
Quais os grupos taxonómicos?
A
- Domínio (o nível mais elevado da classificação biológica)
- Filo (uma linhagem de células num dos 3 domínios da vida)
- Classe
- Ordem
- Família
- Género
- Espécie
3
Q
Que 3 tipos de classificação existem para os organismos?
A
- Prática;
- Estrutural;
- Molecular.
4
Q
Qual a classificação prática?
A
- Classificação prática
o Animais
o Plantas
o Fungos
o Algas
o Protozoários
o Bactérias
5
Q
Qual a classificação estrutural?
A
- Classificação estrutural
o Eucariontes
o Procariontes
6
Q
Qual a classificação molecular?
A
- Classificação molecular
o Eucariontes
o Bactérias
o Arqueas
7
Q
Quais os três domínios adotados atualmente?
A
- Eukarya.
- Bacteria.
- Arquea.
8
Q
Que tipos de meio de cultura existem em relação ao estado físico?
A
- Líquido
- Sólido
- Meio semi-sólido
9
Q
Como se obtém o meio sólido?
A
o Para a obtenção do meio sólido adiciona-se agar a 1,5% (p/v) ao meio líquido
o Funde-se a partir de 90-95ºC e solidifica a partir de 45ºC
o O agar tem vantagem em relação à gelatina por solidificar a temperaturas mais elevadas e não é utilizado como fonte de nutricional pelos microrganismos
o O agar é extraído de algas marinhas vermelhas da classe Rodophyta
10
Q
Que tipos de meio de cultura existem?
A
- Meio Definido;
- Meio Complexo;
- Meio Seletivo;
- Meio Diferencial.
11
Q
O que é a caracterização cultural dos microrganismos?
A
- Descrição dos organismos no meio de cultura!!!
- Tem de ser feito em cultura pura (originada a partir de uma só célula)
- Os nutrientes necessários ao crescimento e as condições físicas do ambiente que proporcionam o crescimento influenciam a cultura e o crescimento de microrganismos
12
Q
O que é o Meio Definido?
A
- Conhece-se a quantidade exata de cada composto
- A composição varia de acordo com as exigências nutricionais do microrganismo
13
Q
O que é o Meio Complexo?
A
- Contêm todos os compostos necessários para o crescimento de um determinado microrganismo, mas não se conhecem as quantidades exatas de cada composto
- Ou seja, sabemos os componentes, mas não sabemos as quantidades
- Num estrato nunca sabemos as quantidades exatas de cada composto
- Os meios complexos contêm estratos
- Ex: leite, carne, sumos de fruta
14
Q
O que é um Meio Seletivo?
A
- Têm na sua composição compostos que vão eliminar os microrganismos acompanhantes (que não interessam) do grupo alvo;
- O crescimento de determinado grupo é privilegiado (selecionado) através de substâncias que inibem o crescimento de outros microrganismos distintos dos de interesse.
15
Q
O que é o Meio Diferencial?
A
- Permite a distinção do microrganismo de interesse através das características bioquímicas.
- O meio de cultura diferencial geralmente contém um indicador, como um corante ou pH sensível, que muda de cor em resposta a uma atividade metabólica específica.
16
Q
Qual a importância dos meios seletivos e diferenciais?
A
Os meios seletivos e diferenciais são importantes para controlarmos e distinguirmos o crescimento dos organismos que os acompanham.
17
Q
Que tipos de processos são aplicados à cultura de bactérias?
A
- Inoculação;
- Espalhamento;
- Incorporação;
- Conservação.
18
Q
Que tipo de características apresentam os microrganismos?
A
- Morfológicas;
- Metabólicas;
- Composição Química;
- Ecológicas;
- Genéticas.
19
Q
A que se referem as características Morfológicas dos microrganismos?
A
- Forma e dimensões da célula, agrupamento, diferenciação e identificação das culturas.
- Coloração Gram
- apuradas com o auxílio do microscópio e de colorações
adequadas - Descrição da colónia;
- Mobilidade.
20
Q
A que se referem as características Metabólicas dos microrganismos?
A
- Conjunto de processos químicos vitais levados a cabo pelos microrganismos.
21
Q
A que se referem as características Composição Química dos microrganismos?
A
- Faz-se a determinação da composição química da parede e da membrana celular;
- Identificação dos principais constituintes químicos da célula microbiana;
22
Q
A que se referem as características Ecológicas dos microrganismos?
A
- Ocorrência no meio ambiente e relações com outros organismos.
23
Q
A que se referem as características Genéticas dos microrganismos?
A
- Hereditariedade e variabilidade;
- Podemos fazer a análise do genoma total de uma bactéria.
24
Q
REVER PROCESSOS!
A
25
Que tipo de métodos Genotípicos existem?
1. Hibridação DNA-DNA;
2. Perfil de DNA;
3. Multilocus sequence typing;
4. Teor de GC.
26
O que é a Ribotipagem?
Técnica de Perfil de DNA;
- é útil para as estirpes patogénicas. É uma “técnica de ouro”, pois é executada em diferentes laboratórios internacionais e o resultado é sempre igual.
- Técnica de tipagem molecular que envolve o uso de sequenciamento de ácidos ribonucleicos (RNA) para identificar e caracterizar organismos microbianos.
-Envolve a análise da sequência do RNA ribossomal (rRNA), especificamente do 16S rRNA para bactérias e do 18S rRNA para eucariotos unicelulares, como leveduras e protozoários.
27
Qual era a divisão de Linneus?
- Animalia;
- Plantae.
28
Qual era a divisão de Ernest HaecKel (1834-1919)?
- Animalia;
- Plantae;
- Protista (bactérias, algas, fungos, protozoários).
29
Qual era a divisão de Robert H. Whittaker?
Propôs a divisão dos seres vivos em cinco reinos:
- Monera (bactérias);
- Protista (protozoários e microalgas);
- Fungi (leveduras e fungos filamentosos);
- Plantae e Animalia
30
A divisão de Robert H. Whittaker é baseada em que critérios?
- No modo de nutrição (fotossíntese, absorção e ingestão).
31
O que é a Teoria da Simbiogénese e quem a defendeu?
- Lynn Margulis 1938-2011;
- Teoria da simbiogénese :
* As mitocôndrias e os cloroplastos tiveram origem a partir dos procariontes a viver em simbiose com os organismos eucariontes. Segundo esta teoria as mitocôndrias tiveram origem nas bactérias aeróbias (proteobactérias) e os cloroplastos a partir das cianobactérias.
32
Qual foi a contribuição de Carl Woese para a Taxonomia?
Descobriu o valor filogenético das sequências nucleotídicas de RNA dos ribossomas (rRNA) de várias bactérias e dos eucariontes:
o Descobriu que a subunidade 16S dos ribossomas 70S tem valor filogenético;
o Fez o mesmo para o gene 18S das eucarióticas
33
Qual o sistema de Woese?
Os domínios:
- Bacteria;
- Archae;
- Eucarya.
34
Como funciona o sistema Binominal de nomenclatura Linnaeus?
* O organismo é designado pela combinação de nome do género e da espécie;
* Uma espécie bacteriana pode ser considerada como uma coleção de estirpes que têm em comum muitas características e distinguem-se de modo significativo de outros grupos de estirpes;
* A estirpe é um isolado de um determinado habitat
35
O que é uma estirpe tipo?
* Estirpe tipo – é aquela que podemos utilizar para identificarmos e distinguirmos a nossa espécie.
36
Que elementos se deve ter em conta na caracterização cultural?
* Existem elementos que temos de ter em conta:
o pH do meio de cultura
o Temperatura de incubação
o Atmosfera (aerobiose, anaerobiose, microaerofilia (concentrações baixas de oxigénio))
37
Qual o Princípio de funcionamento do meio seletivo e diferencial na Salmonella e Shigella Agar?
* A adição dos sais biliares, citrato de sódio e verde brilhante serve para inibir os coliformes Gram-positivos e inibir a dominância de Proteus spp., permitindo o crescimento de Salmonella.
O extrato de carne, a digestão enzimática de caseína e tecido animal fornece fontes de azoto, carbono e vitaminas necessárias para o crescimento.
A lactose é o hidrato de carbono presente no meio.
O tiossulfato e o citrato férrico permitem a detecção de sulfeto de hidrogénio pela produção de colónias com centros negros.
O vermelho neutro fica amarelo na presença de um pH ácido, evidenciando a ocorrência de fermentação.
38
De onde vêm o Agar?
É extraído de algas marinhas vermelhas da classe Rodophyta.
39
Qual a vantagem do Agar sobre gelatina?
Vantagens sobre a utilização da gelatina:
* solidifica a temperaturas mais elevadas e não é utilizado pelos microrganismos.
40
A conservação das culturas de trabalho é feita a que temperatura de refrigeração?
- Conservação das culturas de trabalho a 4ºC.
41
Dê um exemplo de um agente crioprotetor utilizado na congelação?
- Por exemplo, glicerol a 25%.
42
Que técnicas de Conservação das culturas de trabalho existem?
* Refrigeração a 4°C. (cultura de trabalho)
* Congelação a -80°C (cultura de manutenção)
* Conservação em azoto líquido (-196°C)
* Liofilização: processo de desidratação em que o meio é congelado sob vácuo e o gelo formado, sublimado.
43
Qual a melhor opção de conservação a longo prazo?
- Liofilização.
44
Como funciona a técnica de Tipagem por rep-PCR?
É baseada na utilização de sequências oligonucleotídicas iniciadoras complementares de sequências de DNA repetitivas (com elevado nível de conservação e presentes em numerosas cópias no genoma da maioria das bactérias, em particular as Gram negativas, mas também Gram positivas).
45
Como funciona a técnica de Ribopitagem?
* Há hibridação de fragmentos de DNA com sondas de RNA ribossomal (rRNA) 16S e 23S ou com sequências de DNA que codificam o rRNA (rDNA)
* Depois da hibridação, temos um perfil
* Grande parte dos microrganismos possuem várias cópias destas sequências
* A reprodutibilidade é bastante elevada e regra geral os perfis são de simples interpretação
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O que é um Ecótipo?
* Ecótipo- são espécies com características próprias daquele habitat.
47
Como podem as novas espécies de procariotas surgir?
* Através da seleção periódica !!!
* Pode ocorrer mutações dentro de um ecótipo, durante a reprodução, que traz benefícios em relação aos outros indivíduos, oq permite que a célula se reproduza melhor
* Então os seus progenitores tornar-se-ão dominantes
* Com o tempo e suficientes modificações é possível que a nova linhagem seja considerada uma nova espécie
48
O que é um Fluxograma em Microbiologia e como pode ele ser utilizado na identificação de procariontes?
Um fluxograma é uma ferramenta que ajuda a organizar e sistematizar o processo de identificação com base em várias características, testes e ensaios microbiológicos.
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Quais os passos de um Fluxograma de identificação de microorganismos procariontes?
1º- Isolamento em cultura pura;
2º- Reação/ Coloração Gram;
3º- Características macroscópicas (forma, p.ex)
4º- Anaeróbio ou Aeróbio (fermenta ou respira)
5º - Testes Bioquímicos
* Teste de Indol;
* Teste Voges-Proskauer
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Para que serve o Teste de Indol?
- Determinar a capacidade de uma bactéria de produzir indol, um composto derivado da degradação do triptofano, um aminoácido.
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Para que serve o Teste de Voges-Proskauer?
- Teste bioquímico usado na microbiologia para determinar a capacidade de uma bactéria de realizar a fermentação ácida do ácido 2,3-butanodiol.
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O que é uma Estirpe?
Uma estirpe (ou cepa) é uma população de organismos da mesma espécie que compartilham características genéticas e fenotípicas específicas e que são isolados ou derivados de um ancestral comum.
