T2-Caracterização, Classificação e Identificação Flashcards
Quais as capacidades dos seres vivos?
- Utilização de alimentos como fonte de energia
- Síntese de substâncias e formação de estruturas celulares
- Excreção
- Resposta a estímulos exteriores e alterações do ambiente
- Multiplicação
- Mutação
Quais os grupos taxonómicos?
- Domínio (o nível mais elevado da classificação biológica)
- Filo (uma linhagem de células num dos 3 domínios da vida)
- Classe
- Ordem
- Família
- Género
- Espécie
Que 3 tipos de classificação existem para os organismos?
- Prática;
- Estrutural;
- Molecular.
Qual a classificação prática?
- Classificação prática
o Animais
o Plantas
o Fungos
o Algas
o Protozoários
o Bactérias
Qual a classificação estrutural?
- Classificação estrutural
o Eucariontes
o Procariontes
Qual a classificação molecular?
- Classificação molecular
o Eucariontes
o Bactérias
o Arqueas
Quais os três domínios adotados atualmente?
- Eukarya.
- Bacteria.
- Arquea.
Que tipos de meio de cultura existem em relação ao estado físico?
- Líquido
- Sólido
- Meio semi-sólido
Como se obtém o meio sólido?
o Para a obtenção do meio sólido adiciona-se agar a 1,5% (p/v) ao meio líquido
o Funde-se a partir de 90-95ºC e solidifica a partir de 45ºC
o O agar tem vantagem em relação à gelatina por solidificar a temperaturas mais elevadas e não é utilizado como fonte de nutricional pelos microrganismos
o O agar é extraído de algas marinhas vermelhas da classe Rodophyta
Que tipos de meio de cultura existem?
- Meio Definido;
- Meio Complexo;
- Meio Seletivo;
- Meio Diferencial.
O que é a caracterização cultural dos microrganismos?
- Descrição dos organismos no meio de cultura!!!
- Tem de ser feito em cultura pura (originada a partir de uma só célula)
- Os nutrientes necessários ao crescimento e as condições físicas do ambiente que proporcionam o crescimento influenciam a cultura e o crescimento de microrganismos
O que é o Meio Definido?
- Conhece-se a quantidade exata de cada composto
- A composição varia de acordo com as exigências nutricionais do microrganismo
O que é o Meio Complexo?
- Contêm todos os compostos necessários para o crescimento de um determinado microrganismo, mas não se conhecem as quantidades exatas de cada composto
- Ou seja, sabemos os componentes, mas não sabemos as quantidades
- Num estrato nunca sabemos as quantidades exatas de cada composto
- Os meios complexos contêm estratos
- Ex: leite, carne, sumos de fruta
O que é um Meio Seletivo?
- Têm na sua composição compostos que vão eliminar os microrganismos acompanhantes (que não interessam) do grupo alvo;
- O crescimento de determinado grupo é privilegiado (selecionado) através de substâncias que inibem o crescimento de outros microrganismos distintos dos de interesse.
O que é o Meio Diferencial?
- Permite a distinção do microrganismo de interesse através das características bioquímicas.
- O meio de cultura diferencial geralmente contém um indicador, como um corante ou pH sensível, que muda de cor em resposta a uma atividade metabólica específica.
Qual a importância dos meios seletivos e diferenciais?
Os meios seletivos e diferenciais são importantes para controlarmos e distinguirmos o crescimento dos organismos que os acompanham.
Que tipos de processos são aplicados à cultura de bactérias?
- Inoculação;
- Espalhamento;
- Incorporação;
- Conservação.
Que tipo de características apresentam os microrganismos?
- Morfológicas;
- Metabólicas;
- Composição Química;
- Ecológicas;
- Genéticas.
A que se referem as características Morfológicas dos microrganismos?
- Forma e dimensões da célula, agrupamento, diferenciação e identificação das culturas.
- Coloração Gram
- apuradas com o auxílio do microscópio e de colorações
adequadas - Descrição da colónia;
- Mobilidade.
A que se referem as características Metabólicas dos microrganismos?
- Conjunto de processos químicos vitais levados a cabo pelos microrganismos.
A que se referem as características Composição Química dos microrganismos?
- Faz-se a determinação da composição química da parede e da membrana celular;
- Identificação dos principais constituintes químicos da célula microbiana;
A que se referem as características Ecológicas dos microrganismos?
- Ocorrência no meio ambiente e relações com outros organismos.
A que se referem as características Genéticas dos microrganismos?
- Hereditariedade e variabilidade;
- Podemos fazer a análise do genoma total de uma bactéria.
REVER PROCESSOS!
Que tipo de métodos Genotípicos existem?
- Hibridação DNA-DNA;
- Perfil de DNA;
- Multilocus sequence typing;
- Teor de GC.
O que é a Ribotipagem?
Técnica de Perfil de DNA;
- é útil para as estirpes patogénicas. É uma “técnica de ouro”, pois é executada em diferentes laboratórios internacionais e o resultado é sempre igual.
- Técnica de tipagem molecular que envolve o uso de sequenciamento de ácidos ribonucleicos (RNA) para identificar e caracterizar organismos microbianos.
-Envolve a análise da sequência do RNA ribossomal (rRNA), especificamente do 16S rRNA para bactérias e do 18S rRNA para eucariotos unicelulares, como leveduras e protozoários.
Qual era a divisão de Linneus?
- Animalia;
- Plantae.
Qual era a divisão de Ernest HaecKel (1834-1919)?
- Animalia;
- Plantae;
- Protista (bactérias, algas, fungos, protozoários).
Qual era a divisão de Robert H. Whittaker?
Propôs a divisão dos seres vivos em cinco reinos:
- Monera (bactérias);
- Protista (protozoários e microalgas);
- Fungi (leveduras e fungos filamentosos);
- Plantae e Animalia
A divisão de Robert H. Whittaker é baseada em que critérios?
- No modo de nutrição (fotossíntese, absorção e ingestão).
O que é a Teoria da Simbiogénese e quem a defendeu?
- Lynn Margulis 1938-2011;
- Teoria da simbiogénese :
- As mitocôndrias e os cloroplastos tiveram origem a partir dos procariontes a viver em simbiose com os organismos eucariontes. Segundo esta teoria as mitocôndrias tiveram origem nas bactérias aeróbias (proteobactérias) e os cloroplastos a partir das cianobactérias.
Qual foi a contribuição de Carl Woese para a Taxonomia?
Descobriu o valor filogenético das sequências nucleotídicas de RNA dos ribossomas (rRNA) de várias bactérias e dos eucariontes:
o Descobriu que a subunidade 16S dos ribossomas 70S tem valor filogenético;
o Fez o mesmo para o gene 18S das eucarióticas
Qual o sistema de Woese?
Os domínios:
- Bacteria;
- Archae;
- Eucarya.
Como funciona o sistema Binominal de nomenclatura Linnaeus?
- O organismo é designado pela combinação de nome do género e da espécie;
- Uma espécie bacteriana pode ser considerada como uma coleção de estirpes que têm em comum muitas características e distinguem-se de modo significativo de outros grupos de estirpes;
- A estirpe é um isolado de um determinado habitat
O que é uma estirpe tipo?
- Estirpe tipo – é aquela que podemos utilizar para identificarmos e distinguirmos a nossa espécie.
Que elementos se deve ter em conta na caracterização cultural?
- Existem elementos que temos de ter em conta:
o pH do meio de cultura
o Temperatura de incubação
o Atmosfera (aerobiose, anaerobiose, microaerofilia (concentrações baixas de oxigénio))
Qual o Princípio de funcionamento do meio seletivo e diferencial na Salmonella e Shigella Agar?
- A adição dos sais biliares, citrato de sódio e verde brilhante serve para inibir os coliformes Gram-positivos e inibir a dominância de Proteus spp., permitindo o crescimento de Salmonella.
O extrato de carne, a digestão enzimática de caseína e tecido animal fornece fontes de azoto, carbono e vitaminas necessárias para o crescimento.
A lactose é o hidrato de carbono presente no meio.
O tiossulfato e o citrato férrico permitem a detecção de sulfeto de hidrogénio pela produção de colónias com centros negros.
O vermelho neutro fica amarelo na presença de um pH ácido, evidenciando a ocorrência de fermentação.
De onde vêm o Agar?
É extraído de algas marinhas vermelhas da classe Rodophyta.
Qual a vantagem do Agar sobre gelatina?
Vantagens sobre a utilização da gelatina:
- solidifica a temperaturas mais elevadas e não é utilizado pelos microrganismos.
A conservação das culturas de trabalho é feita a que temperatura de refrigeração?
- Conservação das culturas de trabalho a 4ºC.
Dê um exemplo de um agente crioprotetor utilizado na congelação?
- Por exemplo, glicerol a 25%.
Que técnicas de Conservação das culturas de trabalho existem?
- Refrigeração a 4°C. (cultura de trabalho)
- Congelação a -80°C (cultura de manutenção)
- Conservação em azoto líquido (-196°C)
- Liofilização: processo de desidratação em que o meio é congelado sob vácuo e o gelo formado, sublimado.
Qual a melhor opção de conservação a longo prazo?
- Liofilização.
Como funciona a técnica de Tipagem por rep-PCR?
É baseada na utilização de sequências oligonucleotídicas iniciadoras complementares de sequências de DNA repetitivas (com elevado nível de conservação e presentes em numerosas cópias no genoma da maioria das bactérias, em particular as Gram negativas, mas também Gram positivas).
Como funciona a técnica de Ribopitagem?
- Há hibridação de fragmentos de DNA com sondas de RNA ribossomal (rRNA) 16S e 23S ou com sequências de DNA que codificam o rRNA (rDNA)
- Depois da hibridação, temos um perfil
- Grande parte dos microrganismos possuem várias cópias destas sequências
- A reprodutibilidade é bastante elevada e regra geral os perfis são de simples interpretação
O que é um Ecótipo?
- Ecótipo- são espécies com características próprias daquele habitat.
Como podem as novas espécies de procariotas surgir?
- Através da seleção periódica !!!
- Pode ocorrer mutações dentro de um ecótipo, durante a reprodução, que traz benefícios em relação aos outros indivíduos, oq permite que a célula se reproduza melhor
- Então os seus progenitores tornar-se-ão dominantes
- Com o tempo e suficientes modificações é possível que a nova linhagem seja considerada uma nova espécie
O que é um Fluxograma em Microbiologia e como pode ele ser utilizado na identificação de procariontes?
Um fluxograma é uma ferramenta que ajuda a organizar e sistematizar o processo de identificação com base em várias características, testes e ensaios microbiológicos.
Quais os passos de um Fluxograma de identificação de microorganismos procariontes?
1º- Isolamento em cultura pura;
2º- Reação/ Coloração Gram;
3º- Características macroscópicas (forma, p.ex)
4º- Anaeróbio ou Aeróbio (fermenta ou respira)
5º - Testes Bioquímicos
* Teste de Indol;
* Teste Voges-Proskauer
Para que serve o Teste de Indol?
- Determinar a capacidade de uma bactéria de produzir indol, um composto derivado da degradação do triptofano, um aminoácido.
Para que serve o Teste de Voges-Proskauer?
- Teste bioquímico usado na microbiologia para determinar a capacidade de uma bactéria de realizar a fermentação ácida do ácido 2,3-butanodiol.
O que é uma Estirpe?
Uma estirpe (ou cepa) é uma população de organismos da mesma espécie que compartilham características genéticas e fenotípicas específicas e que são isolados ou derivados de um ancestral comum.
