Seminar 4

Question 1

Gram-Test
Was passiert im Bakterium?

Answer 1

Grampositive Bakterien:

1. In den Zwischenräumen der Mureinhülle sammelt sich die Lugolsche Lösung an
2. Alkohol wirkt dehydratisierend → Abstand zwischen Molekülen wird verringert → Farb-Komplexe “festgehalten” und nicht ausgespült

Gramnegative Bakterien:

1. Alkohol wirkt lipidlösend → die aufgelagerte Lipidmembran wird aufgelöst und die dünne Mureinhülle freigelegt wird
2. Farbstoff-Komplexe vom Ethanol wieder ausgewaschen

Question 2

Gram-Test
Wie wird er durchgeführt?

Answer 2

1. hitzfixierten Ausstrich mit Kristallviolett 1 min lang färben → alle Zellen violett
2. Jodlösung 3 min einwirken lassen → alle Zellen bleiben violett
3. kurz mit Alkohol entfärben ca. 20 Sekunden → grampositive Zellen sind violett; gramnegativ farblos
4. 1-2 min mit Safranin gegenfärben → grampositive Zellen sind violett, gramnegative Zellen sind rosa bis rot

Question 3

Gram-Test
KOH-Test

Answer 3

• Zellen (aus Einzelkolonie) mit sterilem Zahnstocher in einem Tropfen KOH auf Objekträger verreiben
• Zahnstocher vorsichtig aus dem Tropfen heben

⇒ Zellwand von gramnegativen Bakterien wird durch die Kalilauge lysiert und die DNA frei wird, dadurch erhöht sich die Viskosität und die Flüssigkeit kann mit einem Zahnstocher zu einem Faden gezogen werden

Question 4

Was wird in der IMViC-Reihe getestet?

Answer 4

I → Indolbildung: Tryptophanabbau

M → Methylrot: Nachweis von sauren Gärungsprodukten

V → Voges-Proskauer-Test: Butandiol Bildung

C → Citratverwertung: