Seminar 3

Question 1

Typische Endosporen Bildner?
Auslösung der Sporenbildung?
Allgemeine Eigenschaften von Sporen?

Answer 1

Gattung Bacillus (viele Bodenbakterien, auch B. thuringiensis (insektenpathogen), B. anthracis (Milzbrand))

Gattung Clostridium (saccharolytische, peptolytische; zu letzteren zählen die Krankheitserreger C. histolyticum, C. tetani, C. botulinum)

Auslösung: Nährstofflimitation (NUR!, nicht allgemein Stress)

Allgemeine Eigenschaften: geringer Wassergehalt, Hitzeresistenz, chemische Resistenz, Strahlenresistenz

Question 2

Zyklus der Sporenbildung

Answer 2

Question 3

Ca-Dipicolinat/ Dipicolinsäure

Answer 3

• eine Substanz, die während der Sporulation (Sporenbildung) von Mikroorganismen gebildet wird. Sie kommt nur im Kern (Sporenprotoplasten) von Endosporen (5–15 % des Trockengewichts) vor, ist jedoch nicht in vegetativen Zellen enthalten.

Question 4

Sterilisationsverfahren

Answer 4

Physikalisch

• Feuchte Hitze (i.d.R. 20 min bei 1210C) → Autoklavieren!
• Trockene Hitze (5 h bei 180 0C)
• Bestrahlung mit ɣ-Strahlen
• Filtrieren (durch Membranfilter mit Porengrößen von 0,2 μm)

Chemisch

• z.B. Begasung mit Formaldehyd, Ethylenoxid, Chlorgas, Ozon

Question 5

Verfahren zu Teilentkeimung im Labor und in der Nahrungsmittelindustrie

Answer 5

Labor

• Bestrahlung mit UV-Licht
• Behandlung mit Desinfektionsmitteln

Nahrungsmittelindustrie

• Pasteurisieren (Erhitzen, 20 s, 130 °C)
• Zuckern (Wasserentzug)
• Salzen, Pökeln (NaNO2)
• Räuchern (Wasserentzug, bakterizide Substanzen im Rauch)
• Säuern/ Zusatz Säure produzierender Bakterien

Question 6

Differenzierung von Mikroorganismen nach ihren Stoffwechseleigenschaften

Answer 6

• Produktion fluoreszierender Fe3+-Siderophore (Pyoverdine)
• Wachstum auf Benzoat
• Art der Ringspaltung bei der Verwertung von Benzoat
• Oxidase-Test
• Gram-Test

Question 7

Siderophore, Funktion und Typen
Pyoverdine

Answer 7

• eine Stoffgruppe von rund 200 eisenbindenden niedermolekularen Verbindungen und Oligopeptiden, die von aeroben Bakterien, Pilzen und Pflanzenwurzeln gebildet und in das umgebende Medium ausgeschieden werden
• Typen: Catechol-, Hydroxamat-, Carboxylat-Typ
• Pyoverdine: fluoreszierende Siderophore, die von den Stämmen Pseudomonadenarten produziert wird

⇒ Wachstum auf einer King-B-Platte und fluoreszierend unter UV-Licht: Psuedomonas putida wurde so differenziert

Question 8

Wachstum auf Benzoat

Answer 8

• nicht alle Bakterien sind dazu fähig aromatische Verbindungen zu spalten
  ⇒ Differenzierung anhand des Wachstums: P. putida und A. vinelandii wachsen auf Benzoat

Question 9

Art der Ringspaltung bei der Verwertung von Benzoat

Answer 9

Question 10

Oxidase-Test

Answer 10

Test auf Vorhandensein von c-Typ Cytochromen (Cyt bc1-Komplex, lösliches Cytochrom c und Cytochrom c-Oxidase in der Atmungskette

“Standard”-Atmungskette

NADH-Dehydrogenase → Chinone → bc1-Komplex → Cyt c → Cyt c-Oxidase (O2 → H2O)

Enterobakterien

NADH-Dehydrogenase → Chinone → Chinol-Oxidasen (O2 oder andere e- -Akzeptoren)

Question 11

Reaktion des Kovacs-Reagenz im Oxidase-Test

Answer 11

1. Tetramethyl-p-phenylendiamin wird oxidiert, gibt ein Elektron ab und bildet Wurster-Blau
2. TMPD wird nur von der Cytochrom-C-Oxidase oxidiert
   ⇒ Ansatz wird nicht blau, wenn keine Cytochrom C Oxidase: Bei E. coli fällt der Test negativ aus