Semaine 6 - ADN recombinant

Question 1

Quel est le dogme central de la biologie moléculaire?

Answer 1

L’ADN est la source du matériel génétique
- Localisé dans le noyau
- Structure de double hélice (AT, CG)

Question 2

Est-ce qu’un organisme plus complexe a nécessairement un génome de plus grande taille?

Answer 2

Non

Ex: L’humain se situe entre le raison et la poule
- Humain a un génome plus grand que la poule, mais plus petit qu’un raisin…

Question 3

Qu’est-ce qui se passe lors de la transcription?

Answer 3

ADN transcrit en ARNm
- Chaque séquence de 3 nucléotides code pour un a.a

Concernant l’ARNm
- Ribose au lien de 2-deoxyribose (aRn, pas aDn)
- Simple brin
- T remplacé par U

Question 4

Quelle est l’étape après la trancription?

Answer 4

L’épissage alternatif
- On épisse (enlève) les introns
- Plusieurs isoformes d’ARNm sont produits après l’épissage

Question 5

Quelle est l’étape après l’épissage et que se passe-t-il?

Answer 5

Traduction: ARNm est traduit en protéine
- Chaque codon code pour un a.a spécifique
- Chez l’humain : > 1 000 000 protéines
- Les différentes isoformes d’ARNm = différentes isoformes de protéines
- Modifications post-traductionnelles = plus de diversification

Question 6

Quels sont les deux types de criblage?

Answer 6

Criblage classique (forward)
Criblage inversé (reverse)

Question 7

Décris chacun des types de criblage

Answer 7

Classique:
- But: identifier les gènes important pour un phénotype biologique connu (surtout pour identifier les gènes causant des phénotypes anormaux)
- Milliers de gènes à la fois
- Permet de générer des hypothèses

Inversé:
- But: sélectionner un gène connu et déterminer les phénotypes associés
- Un seul gène à la fois
- Permet d’évaluer des hypothèses

Question 8

Quelles sont les 5 étapes du criblage classique?

Answer 8

1.Élaborer un test afin de mesurer le phénotype
- Simple
- Quantitatif
- Permet de distinguer les animaux normaux de ceux avec phénotype anormal

2.Obtenir un mutant (mutagénèse)

3.Dépistage d’un phénotype anormal
- Première génération instable et mosaïque
- Prochaines générations, les mutations sont fixées
- Évaluation des lignées (test étape 1)
- Lignées avec phénotype sont maintenues (possibilité de outcross = nettoyage du bagage génétique)

4.Regroupement des mutants
- Complémentation: fait la distinction entre la mutation dans le même gène ou gènes différentes
- Test allélique: Est-ce que 2 mutants ensemble peuvent restaurer le phénotype?

5.Localiser le gène
- Utilisation de techniques permettant de cartographier le gène responsable d’une mutation ou d’un phénotype
- Séquence de transposon (mutagénèse par insertion)
- Analyse de lisaison (mutagénèse chimique er irradiation