selectie van celbiologische technieken Flashcards
celcultuur
cellen (geisoleerd uit plant of dier) die groeien onder gecontroleerde omstandigheden op de juiste voedingsbodem (=medium)
immortaliseren van een cel
een cel oneindig laten delen dr telomeren stabiel te houden(=> DNA stabiel te houden) adhv telomerase
celcultivering
het in stand/ leven houden van een celcultuur
cultuurrecipiënten
gesloten flessen
open platen
rollerplaten
CO2 ovens
MEM
= minimum essential medium
isotonische zouten
energiebron
aminozuren en vitamines
serum
antibiotica in celculturen
tegen contaminatie (van bacteriele groei), want steriel werken is moeilijk
waarom glas coaten?
glas (neg geladen) coaten zodat het pos geladen wordt en de cellen zich daar aan kunnen vasthechten
anoïkis
vorm van geprogrammeerde celdood / apoptose (want adherente cel kan zich niet vasthechten)
anoïkis vermijden dr
- juiste medium
- cellen op een feeder cellaag laten groeien (w bepaalde cellen hebben een onderlaag nodig)
aspecifieke fysische interactie ts cellen
toelaten van celspreiding en cellulaire adhesie
specifieke functionele interactie met onderlinge cellen en ECM
interactie met cellen dr contact met basaalmembraan:
cellen kunnen vasthechten + geeft instructies hoe cel zich moet gedragen
confluente laag
petrisschaal zit vol met cellen en stopt met delen dr contactinhibitie, tenzij een kanker cel (=vormt torentjes en hebben vermogen contactinhibitie verloren)
mitogenen
proteïne, die celdeling bevordert dr cellen aan te zetten tot celdeling
celproliferatie
toename v aantal cellen als gevolg van celgroei en celdeling
EDTA
verbreekt bepaalde intercellulaire adhesies met calcium en magnesium
trypsine
degradeert oppervlakte-eiwitten van cellen
celmigratie (in het kort)
aan de ene kant tijdelijke inhibitie van celadhesie
aan de andere kant wordt celadhesie opgebouwd
eigenschap stamcellen
kunnen oneindig delen
definitie stamcellen
lichaamscellen die onbeperkt kunnen delen en zorgen voor de aanmaak van gespecialiseerde cellen
totipotente stamcellen
bevruchte eicel, kan uitgroeien tot volledige mens
multipotente stamcellen / adulte stamcellen
meeste gespecifieerde stamcellen
geven specifieke aanleiding tot groei van iets
pluripotente stamcellen
gespecialiseerde stamcellen
maken alleen cellen aan met een specifieke functie -> multipotente stamcellen
- in blastocyt
waarom kan een totipotente stamcel meer als een pluripotente stamcel
door het verschil in expressie van eiwitten en waar hun genoom zitten -> hetero en euchromatine met compact of minder compact chromatine die beschikbaar is voor transcriptie
IPS
geïnduceerde pluripotente stamcellen (gemaakt rechtstreeks uit lichaamscellen / somatische cellen)
organoïden
organen laten groeien uit geisoleerde multipotente stamcellen
paraclone
gedifferentieerde cel
meroclone
intermediaire cel
holoclone
(multipotente) stamcel
ectopisch
cel zit op een andere plaats dan normaal in het lichaam
vb kankercellen
orthotopisch
cel zit op zijn normale plaats in het lichaam
teratoom
tumor van geslachtcellen
typisch bij karyogram van kankercellen
er zijn extra chromosomen aanwezig
betekenis amplificatie
uitbreiding/ vermeerderen
stappen van PCR
- denaturatie (DNA enkelstrengig maken dr verwarming, w H-bruggen breken)
- annealing (primers toevoegen v stuk dat je wil kopiëren)
- extension (polymerase start polymerisatie waar primers zitten)
identificatie cellijn authenticiteit
co amplificatie met PCR van 9 kleine repetities om aan te tonen dat je de juiste cellijn hebt gebruikt in je onderzoek
-> zit in een grote verzamelbank
cellijn
onsterfelijke populatie van cellen v e meercellig organisme dat normaal nt oneindig zou prolifereren