Primjena DNA tehnologije Flashcards
Objasni kloniranje ljudskog gena za inzulin!
- bakt. stanice se kidaju te se oslobađaju i izdvajaju plazmidi (vektori za gen)
- restr. enzimom izrezuje se gen za inzulin iz genomske ljudske DNA te se istim enzimom na određenom mjestu cijepaju plazmidi
- plazmidi se pomiješaju s ljudskim genima
- krajevi plazmida i lj. gena povežu se spontano komplementarnim sparivanjem baza, a šećerno-fosfatnu okosnicu DNA zalijepit će ligaza
- rekombinantni plazmidi pomiješaju se s bakterijama-domaćinima, a neke od njih unose plazmid kroz svoju membranu
- rek. plazmidi se umnožavaju, kao i stanice-domaćini
- plazmidi imaju gen za otpornost na antibiotike –> bakterije će rasti na hranjivoj podlozi koja sadrži antibiotike i tako se izdvojiti od onih koje nemaju plazmide
- na podlozi rastu i bakterije koje sadrže nerekomb. plazmid i one s rekom. plazmidom pa se mogu identificirati i izolirati
- umnožavanjem bakt. stanica dobiju se klonovi koji nose kopije ljudskog gena
Koje su prednosti DNA tehnologije?
- Proizvodnja velikih količina ljudskih bjelančevina: inzulina, interferona, faktora 8., hormona rasta, cjepiva (protiv hepatitisa, herpesa, bjesnoće)
- Bjelančevine su identične organizmu koji ih treba (nema imunološke reakcije)
- Jednostavniji postupak dobivanja
- Jeftinija proizvodnja
Što su transgenične ili genetički preinačene (modificirane) biljke?
To su biljke koje sadrže gen druge vrste (GMO); dobiju se genetičkim inženjerstvom biljaka.
Svrha je dobiti bilje otporne na nametnike (kukce, viruse) i herbicide te bolje prehrambene vrijednosti (više vitamina, minerala) i dr.
Navedi primjere GMO biljaka.
Rajčica - uklonjen joj je gen za ubrzano omekšavanje i propadanje ploda
Kukuruz, krumpir, šećerna repa, duhan, pamuk, riža, soja (soja je otporna na herbicid kad je modificirana)
Golden rice - poboljšana nutritivna vrijednost
Postupak dobivanja GMO biljaka?
- Umnažanje željenog gena pomoću npr. plazmida E. coli
- Unošenje stranog gena u jezgru stanice: mikropipetom ili elektroporacijom (el. strujom stanice nakratko otvore pore na membrani kroz koje uđu komadići DNA)
- npr. rod Agrobacterium - plazmid vektor; pomoću njega se unosi željeni gen u stanicu jer je on intracelularni parazit; on ulazi u stanicu pa se pomoću njega unose ti geni, ne izaziva tumor
- Ugradnja stranog gena - enzimi za DNA-popravak (misle da se radi o oštećenju molekule te ugrađuju gen u vlastiti genom)
Prednosti GMO-a?
Jeftinija hrana, više hrane, veća nutritivna vrijednost, smanjenje gladi u svijetu i poboljšanje kvalitete namirnica.
Što su transgenične životinje?
Krupnije životinje, meso im je bolje kvalitete (riba, svinja, krava, ovca, kunić).
Imaju gene za proizvodnju nekih ljudskih bjelančevina koje se izlučuju u mlijeku, npr. laktoferin (protein u majčinom mlijeku).
Postupak: gen se ubacuje u jajnu stanicu ili zigotu; postupak unošenja gena sličan kao kod biljaka