Genetičko inžinjerstvo

Question 1

Što je genetičko inženjerstvo i koji je drugi naziv?

Answer 1

Tehnologija rekombinantne DNA; skup tehnika kojima se može mijenjati nasljedna tvar neke stanice

Question 2

Koji su postupci gen. inženjerstva?

Answer 2

Izolacija gena, umnožavanje gena, sekveciranje gena (određivanje redoslijeda nukleotida) te ugradnja gena u genom i proučavanje njihove aktivnosti.

Question 3

Što je potrebno za gen. inž.?

Answer 3

Restrikcijski enzimi i DNA-ligaza (najvažniji!)
Prenositelji DNA, tzv. vektori (bakterijski plazmid, virus)
Organizam-domaćin u kojem novi gen treba davati produkt

Question 4

Restrikcijski enzimi!

Answer 4

Zovu se još i restrikcijske endonukleaze; izolirani su iz bakterija (70-ih godina) i poznato ih je više stotina.
Prepoznaju određeni slijed nukelotida (4-8 parova baza) i na tim mjestima režu DNA u fragmente u “cik-cak” formi.

Question 5

Što je ligaza?

Answer 5

Enzim koji spaja prerezane krajeve DNA molekule.

Question 6

Što je moguće kombiniranim djelovanjem restr. enzima i ligaze?

Answer 6

Kombinacije dijelova DNA od nesrodnih vrsta.

Question 7

Što je rekombinantna DNA?

Answer 7

DNA proizvedena spajanjem gena različitih vrsta tako da oni funkcioniraju, tj. stvaraju svoje produkte (npr. umetanje ljudskih gena u bakterijski plazmid).

Question 8

Što je EcoR1 i što radi?

Answer 8

Restrikcijski enzim izoliran iz bakterije E. coli.
Npr. on reže željeni gen u cik-cak formi: krajevi prerezane molekule DNA sadrže nekoliko nesparenih nukleotida; istim enzimom prereže se plazmid i obje vrste molekula se pomiješaju.
Ligaza može ponovno spojiti krajeve plazmida, ali može spojiti i krajeve plazmida sa željenim stranim genom –> rekombinantni plazmid