Primers de PCR Flashcards
O que são PCR?
Pequenas sequências de oligonucleotídeos, geralmente com cerca de 18 a 25 pares de bases, que são projetadas especificamente para se ligar a sequências de ADN alvo durante uma reação de PCR.
O que é PCR?
Reação em Cadeia da Polimerase.
Como podemos obter esses Primers?
Os iniciadores são “desenhados” por pesquisadores em computadores específicos;
Como a sequência de primers é escolhida?
Preciso escolher o DNA que quero amplificar e selecionar a região que essa amplificação irá começar.
Como nós escolhemos o primer?
Deve ser ESPECÍFICO ao alvo
* Pares com temperatura de anelamento, tamanho, e grau de dimerização do primer próximas.
Os primers de PCR, também conhecidos como?
oligonucleotídeos, iniciadores ou iniciadores de PCR.
A PCR é uma técnica de?
Biologia molecular amplamente utilizada para replicar e amplificar seletivamente segmentos específicos de DNA em laboratório.
Os primers são essenciais para a PCR, pois?
Determinam quais segmentos de DNA serão amplificados.
Design Específico
São projetados para serem complementares a sequências de DNA específicas que se deseja amplificar.
Tamanho?
18 a 25 pares de bases de comprimento, o tamanho pode variar dependendo da aplicação.
Temperatura de Fusão (Tm).
Determinada pela composição de nucleotídeos dos primers.
Sentido.
São projetados em pares: um primer de sentido direto (forward) e um primer de sentido reverso (reverse).
Aplicações.
Sequenciamento, diagnóstico de doenças genéticas, identificação de patógenos, análise de expressão gênica…
Síntese
Em laboratório ou adquiridos comercialmente de empresas que oferecem serviços de síntese de oligonucleotídeos.
