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¿Qué significa PCR?
PCR significa en español “Reacción en cadena de la polimerasa”
Describe la idea del PCR y cómo funciona
La idea del PCR consiste en utilizar 2 primers que son complementarios a las cadenas opuestas de una secuencia de ADN, lo que permite que la enzima ADN polimerasa actúe sobre ellos para replicar el ADN, resultando en una gran cantidad de esa secuencia de ADN de interés.
¿Cuáles son las etapas del PCR?
Desnaturalización, hibridación y elongación
¿De qué otra manera se conoce al PCR? (además de reacción en cadena de la polimerasa)
Amplificación de ADN in vitro
¿En qué consiste la etapa de la desnaturalización en el PCR?
En la desnaturalización, los fragmentos de ADN a amplificar se calientan a 95° para romper los puentes de hidrógeno que mantienen unidas ambas hebras de ADN, de esta forma, separándolas.
¿En qué consiste la etapa de la hibridación en el PCR?
Durante la hibridación en el PCR, se baja la temperatura a 55° para que los primers se unan de manera complementaria a cada hebra de ADN.
¿En qué consiste la etapa de la elongación en el PCR?
En la etapa de la elongación en el PCR, se sube la temperatura a 72° para que la enzima “TaqADN Polimerasa” agregue nucleotidos libres desde los primers, para generar las hebras complementarias. Luego, este proceso se repite varias veces para obtener una gran cantidad de la secuencia de ADN de interés.
¿De qué otra forma se les conoce a las enzimas de restricción?
Se les conoce como endonucleasas de restricción
¿Qué son las enzimas de restricción?
Son enzimas que reconocen una secuencia específica de nucleotidos, denominados sitios de restricción, y cortan en esa secuencia la cadena de ADN.
¿De dónde reciben su nombre las enzimas de restricción?
Reciben su nombre debido a que limitan o previenen las infecciones víricas, degradando el ácido nucleico invasor.
Señala las dos razones por las que cortar el ADN en lugares específicos (enzimas de restricción) es tan importante
- Permite generar mapas físicos en el ADN a partir de la localización de los sitios de corte.
- Permite la creación de moléculas recombinantes a partir de fragmentos.
¿Cómo se llama el ADN hibrido que surge de la unión de secuencias de ADN de diferentes origenes?
ADN recombinante
¿En qué consiste la electroforesis en gel?
Esta técnica usa un gel como tamiz molecular para separar los ácidos nucleicos o las proteínas en tamaño, carga eléctrica y otras propiedades físicas.
¿Cómo funciona la electroforesis en gel?
Se vierten muestran de ADN de diferentes tamaños. Las moléculas de los ácidos nucleicos como poseen cargas negativas por sus grupos fosfato, viajan al ánodo del sistema (hacia abajo). La mayor parte de las fibras polimericas obstruyen el paso de las moléculas largas en mayor medida que las cortas, por lo que las moléculas largas se amontonan arriba y las cortas abajo, generándose una separación por longitud y carga.
¿Qué relación hay entre las enzimas de restricción y la electroforesis en gel?
Una vez que una secuencia de ADN es fragmentada por las enzimas de restricción, los fragmentos de separan a través de la electroforesis en gel, permitiendo analizar los fragmentos.
