PCR e sequenziamento del DNA Flashcards
La PCR
La Real Time PCR
PCR-RFLP
Sequenziamento del DNA
Il metodo di Gilbert è chiamato anche metodo chimico l. In questo metodo viene marcato il fosftato in 5’ in modo di determinare sempre l’inizio di ciascun trammento realizzato con reazioni chimiche che tagliano in punti specifici come ad esempio sequenze di sole guanine. Poi questo frammenti vengono analizzati con elettroforesi su gel, posso rilevare i frammenti e metterli in ordine. I filamenti saranno tagliato solo in corrsipondenza di guanine e questo procedimento può essere ripetuto con le altri BA
L’altro metodo è quello di Sanger in cui sintetizz il DNA DAun filamento stampo e si usa un dna primer (infatti della sequenza che dobbiamo sequenziare deonbiamo conoscere i primi nucleotidi per il primer) quindi si mettono sia dNtp sia dideossinucleotidi che non possono completate la catena.
Poi con elettroforsei su gel e vari rivelatori si possono osservare i colori e ossevare la sequenza
NGS- Next generation Sequencing
