PCR Flashcards
Que significa PCR?
Reaccion en Cadena de la Polimerasa
Quien invento el PCR y cuando?
Mullis
1986
Porque se invento la PCR?
Para obtener millones de copias de fragmentos de DNA
En que se basa la PCR?
En la replicacion de DNA
Que 4 cosas se requiere para hacer una PCR?
Secuencia de DNA DNA polimerasa (Taq) Desoxirribonucleotidos Primers Termociclador (maquina)
De donde se saca la DNA polimerasa?
De una bacteria llamada “Taq”
Porque se usa una DNA polimerasa de una bacteria?
Porque soporta las altas temperaturas del proceso de PCR
Cual sera el cofactor de la Taq polimerasa?
Cloruro de Magnesio
Cual de los 4 componentes para realizar una PCR son diseñados por el cientifico?
Los Primers
De que se conforman los primers?
De altas cantidades de G y C (guanina y citocina)
Cual es la funcion de los primers en la PCR?
Identifican los extremo 5’ y 3’
Cuales son los tres pasos importantes de la PCR?
Desnaturalización
Hibridacion/Amplificacion
Extension
Donde se alinean los primers en la PCR?
En el extremo 3’
Cuales son los tipos de PCR?
PCR tiempo real o qRPC PCR punto final PCR multiple PCR con enzimas de restriccion (RFLP) PCR transcriptasa reversa (RPC)
Caracteristicas esenciales de PCR punto final o estandar
Cualitativa a un solo segmento de DNA
Amplificacion de un segmento de DNA
Usa Agarosa
Caracteristicas esenciales de PCR multiple
Cualitativa a varios segmentos de DNA
Amplificacion de 2 o mas segmentos de DNA
Usa Agarosa
Caracteristicas esenciales de PCR con enzimas de restriccion
Deteccion de polimorfismos
Usa enzimas de restriccion
Caracteristicas esenciales de PCR transcriptasa reversa (RPC)
Sintesis de DNA a partir de RNA
Deteccion de Virus de RNA
Caracteristicas esenciales de PCR tiempo real o qRPC
Cuantifica DNA
Por lo tanto mide la carga viral
La PCR tiempo real o qRPC usa Agarosa
FALSO
NO usa Agarosa
Que se hace despues de la PCR estandar y multiple?
Electroforesis
Que es la electroforesis?
Tecnica mediante la cual se separan biomoleculas cuando son sometidas a un campo electrico
Donde se colaca el lado del DNA en la camara de electroforesis?
Del lado negativo
Que elementos se necesitan para hacer la electroforesis?
Camara de electroforesis
Gel de Agarosa
Marcador de Peso molecular
Transiluminador ultravioleta
La cantidad de Agarosa sera proporcional al tamaño del acido nucleico
VERDADERO
Cuales seran los tipos de sistemas reporteros de fluorescencia?
Especificos
NO especificos
Cuales son los dos tipos de cuantificacion en la qRPC?
Absoluta
- Concentracion precisa de DNA
Relativa
- Evaluar cambios en la expresion de genes
Cuales son las PCR que se usan para el diagnostico de enfermedades?
PCR tiempo teal
PCR estandar
PCR transcriptasa reversa (RFLP)
Que tipo de PCR usamos en la Tuberculosis?
PCR GeneXpert
Que tipo de PCR usamos en la Sepsis?
qSOFA
Sepsis@Quick
