Partie 1

Question 1

Quels sont les trois rôles d’un microscope ?

Answer 1

Agrandir
Résoudre
Transmettre

Question 2

Que provoque l’ajout d’une deuxième lentille ?

Answer 2

Augmente le grossisement

Question 3

Avec quoi peut-on voir bactéries, cellules ?

Answer 3

Microscopes photoniques

Question 4

Avec quoi peut-on voir Virus ?

Answer 4

Microscopes électroniques

Question 5

Quel microscope permet de voir au niveau moléculaire ?

Answer 5

Le microscope à effet tunnel

Question 6

De quoi est composée la lumières ?

Answer 6

De photons qui se propagent comme une onde.

Question 7

Donner les caractéristiques d’une lampe à incandescence

Answer 7

Lampes halogènes
Longue durée de vie
Peu d’émissions UV, continues entre UV et IR, fortes en IR
Chauffe

Utilisée pour microscopes en trans-illumination

Question 8

Quelle lampe est utilisée en microscopie à épi illumintaion ?

Answer 8

Des lampes à vapeur de mercure.

Question 9

Décrire un oculaire.

Answer 9

Loupe grossissant de 5-15 fois

Question 10

Qu’est-ce qu’un système binoculaire ?

Answer 10

Système permettant d’ajuster la distance inter-pupilles pour permettre l’observation de l’échantillon avec nos deux yeux.

Question 11

Décrire un objectif.

Answer 11

Diverses lentilles permettant un grossissement de 4 à 100 fois. Possède une ouverture numérique, longueur, distance de travail.

Question 12

La platine : de quoi s’agit-t-il ?

Answer 12

La surface plane ou l’on pose l’échantillon.

Question 13

Qu’est-ce que le condenseur ?

Answer 13

il s’agit de la partie qui permet de focaliser la lumière sur l’échantillon.

Question 14

A quoi servent les diaphragmes ?

Answer 14

A optimiser l’éclairage.

Question 15

Combien y a-t-il de diaphragmes ?

Answer 15

2.

Question 16

A quoi sert le diaphragme de champ ?

Answer 16

Optimiser la surface éclairée. Plus il est fermé plus la surface est petite.

Question 17

A quoi sert le diaphragme d’ouverture ?

Answer 17

A régler la netteté de l’image.

Question 18

A quoi correspond l’ouverture numérique ? Quelle est sa valeur optimale ?

Answer 18

L’ouverture numérique correspond au cône de lumière.

La valeur optimale est quand ON fait la taille de l’objectif

Question 19

Comment calculer la fréquence d’une onde ?

Answer 19

Célérité/longueur d’onde

Question 20

Donner les principaux domaines lumineux.

Answer 20

Sous 400 nm : UV
Entre 400 et 700 nm : lumière visible
Au dessus de 700 : IR

Question 21

Qu’est-ce que une onde en opposition de phase ?

Answer 21

il s’agit d’ondes dont les oscillations sont déphasées : les interférences sont donc destructrices (affaiblit l’onde)

Question 22

Quand un objet est coloré d’ou provient la couleur ?

Answer 22

Il s’agit d’une longueur d’onde non abosrbée, que l’objet réfléchit

Question 23

Qu’est-ce que l’indice de réfraction n ?

Answer 23

Il s’agit de la célérité dans le vide/la célérité dans le milieu

Question 24

De quoi dépend également l’indice de réfraction n ?

Answer 24

De la longueur d’onde. Quand la longueur d’onde diminue, n augmente.

Question 25

Quand l'indice de réfraction augmente comment évolue la fréquence F ?

Answer 25

F reste constante !

Question 26

Un retard de phase peut être induit lors de la traversée de la matière. Après être ressortie, l'onde possède encore son retard de phase ?

Answer 26

Non

Question 27

Comment peut on se servir du phénomène de réfraction en microscopie ?

Answer 27

On peut augmenter la pouvoir de résolution d'un microscope en placant une couche d'huile entre la lentille frontale et l'objectif.

Question 28

Qu'est-ce que le phénomène de diffraction ?

Answer 28

Il s'agit du phénomène des rayons déviés par le passage dans un espace plus petit que le rayon initial (fente, cercle). Il en résulte des rayons déviés selon une configuration particulière.

Question 29

Quelle est la configuration d'un rayon dévié par une fente ?

Answer 29

forme un rectangle central + d'autres rectangles symétriques et plus faibles.

Question 30

Par un cercle ?

Answer 30

Point central intense, cercles concentriques d'initensités de moins en moins forte "Disques d'Airy"

Question 31

Que se passe-t-il si le trou dans la plaque permettant la diffraction est réduit ?

Answer 31

L'intensité est de plus en plus forte au milieu, et beaucoup moins répartie sur les côtés.

Question 32

Quel est le rapport de la diffraction en microscopie ?

Answer 32

Limite la résolution de certains microscopes

Question 33

Comment calculer un angle de diffraction ?

Answer 33

On a angle = longueur d'onde / largeur fente | ou angle = largeur tache centrale / 2* distance fente-écran

Question 34

Relation entre longueur d'onde, rayon tache centrale, distance ouv/écran et longueur ouverture ?

Answer 34

longueur d'onde / longueur ouverture = rayon tache centrale / distance ouv/écran

Question 35

Quels sont les paramètres qui changent lorsque l'on change d'objectif ?

Answer 35

L'ouverture numérique, le grossisement changent.

Question 36

Définir la résolution.

Answer 36

L'image d'un point est une tache d'airy. Une image est une multitude de point. La résolution est la distance permettant de séparer deux taches contigues. Plus la distance est petite, meilleure est la résolution.

Question 37

Comment calculer la distance de résolution ?

Answer 37

d = 0.61 x lambda / ON

Question 38

Quel effet a l'augmentation d'objectifs sur la résolution ?

Answer 38

elle augmente la résolution.

Question 39

Qu'est-ce que la profondeur de champ ?

Answer 39

la profondeur de champ correspond à la zone de l'espace dans laquelle doit se trouver le sujet à observer pour que l'on puisse en obtenir une image que l'œil acceptera comme nette.

Question 40

Comment la calculer ?

Answer 40

profondeur = 0,61 lambda/(ON*tan(angle))

Question 41

Comment évolue donc la profondeur si on augmente l'ouverture numérique?

Answer 41

Elle diminue.

Question 42

Pour obtenir de la lumière polarisée on a besoin de deux éléments. Quels sont-ils ?

Answer 42

D'un polariseur et d'un analyseur.

Question 43

D'ou proviennent les couleurs obtenues par l'analyseur ?

Answer 43

Elles proviennent des retards de phase induits par le polariseur.

Question 44

Définir luminescence.

Answer 44

Phénomène quand les électrons sont excités et relâchent en partie cette énergie sous forme de lumière.

Question 45

Il y a deux types de luminescences. Lesquelles ?

Answer 45

La phosphorescence (la lumière est émise encore après l'excitation) et la fluorescence (la lumière s'arrête dès que l'électron n'est plus excité (temps hyper court, sous 10^-8 sec)

Question 46

Qu'est-ce que la photoluminescence ?

Answer 46

Si l'énergie excitant provient d'une onde lumineuse on a affaire a la photoluminescence.

Question 47

Qu'est-ce que la chimiluminescence ?

Answer 47

Si l'énergie excitant provient d'une réaction chimique ou enzymatique on a affaire à la chimiluminescence.

Question 48

Qu'est-ce qu'un fluorochrome ? Exemple ?

Answer 48

C' est une substance chimique capable d'émettre de la lumière de fluorescence après excitation -> ex : FITC

Question 49

Donner un exemple de fluorochrome naturel.

Answer 49

GFP (provient de méduses) ~ 238 acides aminés

Question 50

Qu'est-ce que le rendement quantique ?

Answer 50

Nombre photons émis / nombre total de photons absorbés

Question 51

Coefficient d'extinction ?

Answer 51

Efficacité d'absorbtion de la lumière excitante.

Question 52

Brillance ?

Answer 52

Rendement quantique x coeff d'extinction.

Question 53

Citer 3 propriétés biochimiques importantes de la GFP.

Answer 53

Très stable (T° d'activité relativement haute, sous 65°, pH d'activité large). Résiste à la plupart des enzymes (sauf pronase). Beaucoup de mutation pour adapter à nos besoins (Chgt solubilité, maximas d'absorbtion et excitation).

Question 54

Problème des fluorochromes ?

Answer 54

Fluorescence limitée dans le temps. on peut utiliser des fluorochromes plus performants pour limiter le problème.(ex : sonde ALEXA)