ACS Flashcards
Définir la microscopie à épifluorescence
Permet l’observation des tissus, structures cellulaires ou localisation de molécules grâce a l’utilisation de fluoro.
Quel produit pour observation ADN (noyau)
DAPI
Quel produit pour observation mitochondrie ou RE ?
DIOC6
Quel produit pour filaments d’actine ‘
Rhodamine
Pourquoi utilise-t-on les lampes a vapeur de mercure pour epifluo ?
besoin de beaucoup de bleu violet et ultraviolet.
Qu’est-ce que l’écart de stockes ?
écart entre max d’emission et excitation. Plus il est grand, meilleur est la résolution
Quand est-ce que le fluorochrome est illuminé au max ?
AU max du spectre d’excitation
De quoi est constitué un bloc filtre ?
Un filtre d’excitation
Un miroir dichotoique
un filtre d’émission
A quoi sert le filtre d’excitation ‘
A sélectionner la bande spectrale d’excitation du fluorochrome.
A quoi sert e miroir dichotoique ?
Il réfléchit certaines longueurs d’ondes sous une certaine valeur de longueur d’onde et est transparent pour les autres.
A quoi sert le filtre d’émission ?
A sélectionner la bande spectrale d’emission du fluorochrome.
A quoi sert un filtre passe-bas ?
Laisse passer uniquement les longueurs d’ondes sous une certaine valeur.
A quoi sert un filtre passe-haut ?
laise passer uniquement au dessus d’une certaine longueur d’nde
Filtre BP ? passe bande
Laisse passer entre deux valeurs, bloque le reste
Notch filter ?
Laisse tout passer sauf entre deux valeurs.
a quel ange un miroir dichotoique laisse passer les longueurs d’onde ?
45°
un BP centré sur 405 avec BP de 40nm laisse passer de ou a ou ?
405-(40/2) et 405+(40/2)
Pourquoi faut-il attention de ne pas prendre un filtre d’excitation et d’émission trop large ?
Le filtre d’excitation va exciter le 2e fluorochrome et le filtre d’emission va prendre l’éission des deux fluorochromes ce qui va fausser l’observation. Il faut prendre un filtre d’emission plus restreint qui ne prendra pas le signal du mauvais fluorochrome, m’eme si le filtre d’excitation excitait un peu l’autre fluorochrome.
comment comparer l’efficacité de deux filtres ?
On regarde le % de transmission. + haut mieux c’est.
