P1 - dokument Flashcards
Kako dokazujemo prisutnost određenih tvari u biološkim uzorcima?
dokazujemo mjerenjem različitih fizikalnih (naboj, gustoća, masa i oblik) i kemijskih (veza, topljivost i struktura) svojstava
Nabroji metode odjeljivanja kojima odjeljujemo tvari prema veličini čestica.
(Ultra)filtracija, dijaliza, gel-filtracijska kromatografija
Što je filtracija?
metoda kojom odvajamo neotopljene čestice čvrste tvari od tekućine
propuštanjem suspenzijske smjese preko filtera ( filter sadrži pore kroz koje ne mogu proći čestice koje su veće od pora)
Što je ultrafiltracija?
metoda koja se temelji na istom principu kao i filtracija, ali otopina prolazi kroz poroznu (polupropusnu) membranu pod tlakom
Što je dijaliza? Navedi primjere dijaliza
metoda koja koristi prolazak kroz polupropusnu membranu (npr. pergament, nitroceluloza, životinjske opne i sl. ) za
razdvajanje Kroz polupropusnu membranu difuzijom mogu proći otopljene tvari dok velike molekule ne prolaze
npr. dijaliza bubrega, elektrodijaliza
Nabroji metode odjeljivanja kojima odjeljujemo tvari prema masi i gustoći.
centrifugiranje
Što je centrifugiranje?
postupak odvajanja čestica od tekućine pod utjecajem centrifugalne sile ubrzavanjem sedimentacije
Tijekom centrifugiranja razvija se relativna centrifugalna sila koja djeluje na uzorak
Što je diferencijalno centrifugiranje?
kod takvog centrifugiranja postupak se provodi u koracima
Uzorak za svaki slijedeći korak je tekućina preostala iz prijašnjeg koraka
Sa svakim slijedećim korakom povećava se trajanje centrifugiranja i centrifugalna sila
Objasni centrifugiranje u gradijentu gustoće.
Što se najčešće koristi kao medij u tom centrifugiranju?
Centrifugiranje u gradijentu gustoće koristi medij koji stvara gradijent gustoće - u takvom mediju čestice tijekom centrifugiranja putuju i zaustavljaju u onom dijelu u kojem je gustoća čestice jednaka gustoći medija
Najčešće se koriste saharoza, cezijev klorid, dekstran
Što je protočna citometrija?
metoda za analizu pojedinačnih stanica koju karakterizira sposobnost analize velikog broja stanica u kratkom vremenu
Stanice prolaze kroz sloj tekućine jedna po jedna i bilježe se svjetlosni signali koji nastaju nakon osvjetljavanja stanica laserom
Što je spektroskopija?
- analitička metoda koja se zasniva na analizi apsorpcije i emisije elektromagnetskog zračenja
- spektroskopija omogućava proučavanje izmjene energije između elektromagnetskog zračenja i biomolekule na koju je ono primijenjeno
Kako dijelimo spektroskopiju?
Spektroskopske tehnike se mogu generalno podijeliti na apsorpcijsku, emisijsku i interferencijsku spektroskopiju.
Što je apsorpcijska spektroskopija? Što spada pod nju?
- bilježi elektromagnetsko zračenje kada atom apsorbira energiju i prelazi u više energijsko stanje, pri čemu nastaju specifični spektri koji se koriste za identifikaciju biomolekula
- ubrajamo atomsku apsorpciju, ultraljubičastu/vidljivu (UV/VIS), infracrvenu (IR) i Mossbauer-ovu spektroskopiju
Što je spektroskopija ultraljubičastog i vidljivog (UV/VIS) zračenja? Za što se koristi?
zasniva se na apsorpciji svjetlosti nakon pobude elektrona i njihovog prijelaza u više energetsko stanje
Molekule koji apsorbiraju UV/VIS zračenje u svojoj strukturi sadržavaju apsorbirajuće skupine koje se nazivaju kromofori
- koristi se za strukturalne, kvantitativne i farmaceutske analize
Što je spektroskopija infracrvenog (IR) zračenja?
koristi elektromagnetsko zračenje čija je frekvencija i energija manja od one kod vidljivog svjetla, međutim glavna razlika je u tome što apsorbirana energija uzrokuje pobuđivanje vibracije u molekuli zbog specifične frekvencije pri kojima kemijske veze vibriraju, istežu se, savijaju ili se rotiraju što odgovara količini primljene energije
