mRNA Processing & Proteinsyntes i Eukaryoter

Question 1

Vilka tre olika Post-translationella modifieringar sker på mRNA innan det är “moget”?

Answer 1

• 5’-capping
• Splicing
• 3’-polyadenylering

Question 2

Vad är skillnaden på moget respektive Precursor mRNA?

Answer 2

• Storleken på moget mRNA är mindre så introner (och i vissa fall eoner) klipps bort
• Det har även skett modifieringar på kedjan

Question 3

Hur går 5’-capping till?

Answer 3

• Sker på 5’-änden av mRNA med m7G-CAP
• 5’-ände på mRNA har trifosfatgrupp
• Fosfohydrolas inverkar
• Två fosfat spjälkas av
• Guanylyltransferas inverkar
• Fäster Guanylyl-grupp till 5’-änden på mRNA
• m7G-CAP är färdig
• (Överför en metionin på position 7 på mRNA)

Question 4

Vad kallas “omoget” mRNA?

Answer 4

• Precursor mRNA

Question 5

Vad är Splicing?

Answer 5

• Processen där introner och eoner klipps bort
• Förkortar mRNA-kedjan
• Utförs av Spliceosomen

(Alternativ splicing är när en gen kan ge upphov till flera olika proteiner, detta tros ingå i genreglering)

Question 6

Hur går Splicing till?

Answer 6

• Spliceosomen känner igen 5’-Splice Site (brukar börja med GU)
• Spliceosomen känner igen 3’-branch point (brukar sluta med AG)
• U1 binder till 5’-splice site och U2 basparar med Adeninet på 3’-splice site
• Adeninets OH grupp nukleofil attack
• Spliceosomens U3, U4, U5, U6 loopar —> LASSOSTRUKTUR och fäster vid U2 som lasso
• U4 lossnar
• Båda splice site binds samman
• Adeninet gör nukleofil attack på 5’-splice site som frigör hela lassot
• U5 binder samman exonerna med FOSFODIESTERBINDNING och splicing är nu klar, intron borta

Question 7

Beskriv förloppet av PolyAdenylering

Answer 7

• RNA-Polymeras syntetiserar och når sekvensen AAUAAA
• Sekvensen signal för Endonukleas
• Endonukleas klyver vid sekvensen
• Krävs mycket ATP (byggstenar för Adenyleringen)
• Förlänger 3’-änden med inverkan av CTD-svansen på RNA-Polymeras II

Question 8

Vilka effekter får Alternativ Splicing? Hur går det till?

Answer 8

• Effekter: Samma gen-sekvens kan koda för en mängd olika proteiner
• Alternativ splicing = Introner OCH exoner klipps bort från mRNA
• Sekvensen blir kortare och proteinet blir annorlunda än om alla exoner hade varit kvar

Question 9

Vilka viktiga funktioner har 5’ capping?

Answer 9

• Skyddande egenskap mot Nukleaser
• Kan skydda mot virala infektioner
• Viktig vid intieringen av Translationen och transporten till ribosomen

Question 10

Vilka funktioner har 3’ polyadenylering?

Answer 10

• Kan göra mRNA mer stabilt mot nedbrytning
• Framhäva genuttryck