Molekylærbiologiske metoder

Question 1

Hva er prinsippet bak isolering av DNA/RNA/proteiner?

Answer 1

Samle vev/celler, lysere disse og fjerne de partene man ikke ønsker (enten fjerne proteiner, eller fjerne cellerester fra protein).

Question 2

Hva er prinsippet bak gelelektroforese?

Answer 2

Separasjon av løste molekyler ved bruk av medie (gel) og elektrisitet. Molekylene tilsettes i gelen og separeres på grunnlag av ladning, masse, størrelse etc.

Question 3

Hva er prinsippet bak PCR?

Answer 3

Kopiere en bestemt DNA-sekvens, for å kunne bruke i videre forsøk

Question 4

Hva er prinsippet bak real-time-PCR?

Answer 4

PCR og analyse (Deteksjon) skjer i samme rør. Ser på fluoresens som kommer av at fluoriserende stoffer binder seg til DNA.

Question 5

Hva er elektroblotting?

Answer 5

Overføring av proteiner til en membran, ved bruk av spenning.

Question 6

Hva er in situ hybridisering?

Answer 6

Tilfører en probe til vevsmateriale for å finne en bestemt DNA-sekvens.

Question 7

Hvordan merker man DNA og protein for deteksjon?

Answer 7

Tilsettes fluoriserende forbindelser til partiklene i prøven.

Question 8

Hva er DNA-sekvensering?

Answer 8

Bestemmelse av nukleotid-sekvensen av DNA-fragmenter.

Question 9

Hva er western blot?

Answer 9

Analyse for proteindeteksjon. Identifikasjon og kvantifisering av proteiner, hvor det først blir gjennomført elektroforese, som så overføres til en membran ved bruk av elektroblotting

Question 10

Hva gjør ligase?

Answer 10

Limer sammen DNA-trådene

Question 11

Hva gjør polymerase?

Answer 11

Forlenger DNA-tråden. Skjer naturlig i replikasjon av DNA, brukes i genteknologi som PCR.

Question 12

Hva er nukleaser?

Answer 12

Enzymer som kutter DNA-tråd ved å bryte sukker-fisfat kjeden.

Question 13

Hva er revers transkriptase?

Answer 13

Enzym som danner DNA fra RNA-templat.

Question 14

Hva er SYBR Green?

Answer 14

Fluoreserende stoff som binder seg til DNA. Binder seg til alt dobbelttrådet DNA. Brukes i real-time PCR.

Question 15

Hva er TaqMan probe?

Answer 15

To primere og en probe som definerer sekvensen man ønsker å kopiere.

Question 16

Når brukes konvensjonell PCR, og når brukes real-time PCR?

Answer 16

Konvensjonell PCR kan brukes til å kopiere opp DNA til gelelektroforese, og f.eks. detektere mutasjoner. Real time PCR kan brukes til å f.eks. påvise virus,

Question 17

Hva er et plasmid? Hvordan kan det brukes i genteknologi?

Answer 17

Et plasmid er et lite og sirkulært DNA-molekyl som replikeres uavhengig av genomet. Kan brukes til å bære DNA-fragmenter ved å spleise det med et plasmid. Man setter inn ønsket DNA.