Module 8: Diagnostic des infections

Question 1

Qu’est-ce qu’un antigène?

Answer 1

Substance reconnue par le système immunitaire capable de susciter ou non une réaction immunitaire spécifique de nature humorale ou cellulaire. Peut être un pathogène entier ou une partie du pathogène

Question 2

Qu’est-ce qu’un immunogène?

Answer 2

Antigène qui induit une réponse immune. Induit la création d’anticorps contre l’immunogène, c’est pourquoi on a besoin de bon immunogènes dans les vaccins

Question 3

Qu’est-ce qu’un épitope?

Answer 3

Petite partie d’un antigène qui peut être reconnue par un anticorps qui lui est spécifique

Question 4

Qu’est-ce qu’un anticorps?

Answer 4

Protéine produite par les lymphocytes B suite à l’interaction avec l’antigène, présent dans le sang, le lait, la salive et les sécrétions intestinales

Question 5

Quelles sont les deux régions d’un anticorps?

Answer 5

Région effectrice (constante d’un anticorps à l’autre, permet l’action de l’anticorps)

Région de reconnaissance (variable et spécifique à chaque antigène)

Question 6

Qu’est-ce qui distingue la réponse primaire de la réponse secondaire à la présence de nouveaux d’antigènes?

Answer 6

Réponse primaire: première réponse de courte durée qui produit de plus faibles quantité d’anticorps

Réponse secondaire: deuxième réponse à l’antigène, de plus forte empleur et de plus longue durée

Question 7

Quelles sont les caractéristiques des immunoglobulines de type G?

Answer 7

Majorité des immunoglobulines du sérum et des tissus
Transfert au via le placenta au foetus
Présent majoritairement dans la réponse secondaire
Haute spécificité
Deux sites de reconnaissance sur l’anticorps

Question 8

Quelles sont les caractéristiques des immuniglobulines de type M?

Answer 8

Présentes en plus faible quantité dans les tissus et le sérum
Pas de transfert au foetus via le placenta
Présente lors de la réponse primare
Peu spécifiques (mais produits rapidement)
10 sites de reconnaissance

Question 9

Quelles sont les caractéristiques des immunoglobulines de type A?

Answer 9

Plus important dans la protection locale
Produit dans la glande mammaire, le tractus intestinal, respiratoire…
Résistances aux enzymes protéolitiques (car anticorps=protéines donc pour endroits où il y a des enzymes protéolitiques, besoin d’immunoglobulines spéciales)
Plus importantes dans les sécrétions
4 sites de reconnaissances

Question 10

Comment sont produits les anticorps polyclonaux?

Answer 10

1. On injecte plusieurs fois un lapin avec une solution contenant un type d’antigène avec plusieurs épitopes.
2. La lapin produit beaucoup d’anticorps différents contre ces différents épitopes.
3. On récolte le sérum contenant les différents anticorps

Les anticorps sont dit polyclonaux car ce type de sérum contient plusieurs anticorps différents, chacun spécifique à un épitope et chacun étant synthétisé par un type de clone de lymphocyte B. Les anticorps sont donc le résultat du travail de plusieurs clones différents

Question 11

Comment sont produits les anticorps monoclonaux?

Answer 11

1. Injecte plusiuers fois une souris avec une solution contenant des antigènes contenant plusieurs épitopes.
2. On euthanasie la souris et on récolte la rate
3. On récolte les lymphocytes B de la rate
4. On croisa les lymphocytes B avec des cellules tymorales pour que les lymphocytes puissent croître indéfiniment
5. On dilue les lymphocytes B jusqu’à obtenir des cultures pures avec un seul type de lymphocyte B produisant un seul type d’anticorps

Question 12

Quelle quantité d’antigènes seront détectés pour une infection aiguë, chronique ou sous-clinique (porteur sain)?

Answer 12

Infection aiguë: Beaucoup d’antigène

Infection chronique: peu d’antigène (mais plus que sans infection)

Infection sous-clinique: +/-

Question 13

Quels sont avantages et inconvénients des systèmes de détection d’antigènes avec des anticorps polyclonaux?

Answer 13

• Très sensible puisque peut détecter plusieurs épitopes présents sur un anticorps
• La sensibilisé peut mener à de faux positifs car peut détecter des épitopes semblables présents sur un autre antigène que celui recherché

Question 14

Quels sont les avantages et inconvénients des systèmes de détection d’antigènes avec des anticorps monoclonaux%

Answer 14

• Très spécifique car ne détecte qu’un seul type d’épitope

- Peut mener à de faux négatif s’il y a une légère variation de l’épitope à détecter

Question 15

Décrire les étapes du fonctionnement du test de détection ELISA sandwich pour la détection d’antigènes?

Answer 15

1. Production préalable d’un anticorps contre l’antigène recherché qu’on lie à une enzyme (conjugué)
2. Prend un puit dont les bords sont tapissés par anticorps spécifique à la toxine recherchée + LAVAGE
3. Met échantillon dans puit. Si la toxine est présente, va se lier à l’anticorps + LAVAGE pour éliminer débris (tout ce qu’il reste c’est la toxine et l’anticorps de départ)
4. Ajoute le conjugué dans les puits. Le conjugué se lie à la toxine (antigène) + LAVAGE pour enlever conjugué non-lié
5. Ajout de chromogène qui réagit avec l’enzyme du conjugué pour produire de la couleur–­>détection de la toxine

Question 16

Pourquoi utilise-t-on un test en sandwich plutôt que simplement ajouter le conjugué au mélange?

Answer 16

• Car le conjugué pourrais se lier à un épitope d’un autre antigène que celui recherché et créer un faux positif (dans méthode en sandwich, on élimine les conjugués liés aux mauvais épitopes par le lavage)
• En raison de la présence d’autres substances en suspension, conjugué pourrait manquer la toxine et créer un faux négatif

Question 17

Décrire la méthode de détection d’anticorps par ELISA

Answer 17

1. Injection préalable d’anticorps IgG (plus communs) d’un chien chez un lapin. Le lapin va produire des anticorps anti-IgG donc contre la majorité des anticorps de chien. On récorle les anticorps anti-IgG et on les lie à une enzyme (conjugué)
2. On prend des puits qui contiennent collé sur les bords l’antigène qui est spécifique pour l’anticorps dont on veut détecter la présence + LAVAGE
3. On ajoute le sérum et si l’anticorps est présent, il se lit à l’antigène + LAVAGE (anticorps reste accroché sur l’antigère sur la paroi)
4. On ajoute le conjugué anti-IgG + LAVAGE
5. Ajout de chromogène qui réagit avec le conjugué pour faire de la couleur